Сколько делается гистология информация, новости, диагностика заболеваний и лечение в Израиле

Сколько делается гистология информация, новости, диагностика заболеваний и лечение в Израиле | BK Medical Logistic

консультация помощника врача

Вопрос «Сколько дней делается гистология?» каждой медклиникой решается в индивидуальном порядке, поскольку этот срок во многом зависит от особенностей ультрасовременного оборудования, наличия собственной лаборатории, количества и уровня медперсонала. Если брать усредненный показатель по отрасли, то результат исследования в основном известен уже  через 8-10 дней.

Многих волнует, сколько готовиться гистология, когда уже проводится полосная операция и пациент лежит на операционном столе. Например, в операционной у хирурга появляются подозрения о наличии опасных раковых образований, и чтобы получить 100 % уверенность, необходимо моментально проанализировать образец ткани. Такая гистология проводится очень быстро, чтобы у оперирующего хирурга была возможность удалить выявленную онкологическую опухоль. Экспресс-гистология дает высокоточный результат за один-три часа.

В других менее срочных случаях пациентам приходится ждать примерно пять дней, если в выбранной клинике есть частная лаборатория с инновационным медицинским оснащением. Если же гистология проводится в лаборатории другого медцентра, то сроки увеличиваются на 2-4 дня (время на отправку и доставку образцов).

Узнать полную стоимость лечения в Израиле

Наши специалисты свяжутся с Вами и ответят на все вопросы по лечению заболеваний в израильских клиниках

Второе мнение МРТ (магнитно-резонансной томографии)

Что такое второе мнение в магнитно-резонансной томографии? В каких случаях необходима ревизия анализов?

Подробнее

Израильская оптическая технология диагностирования меланомы

Своевременная диагностика рака кожи, включая один из самых тяжелых его видов – меланому, может иметь судьбоносное значение для пациента, спасти ему жизнь.

Подробнее

Второе мнение врача – уверенность в правильном диагнозе

В современной медицине всё большую популярность приобретает новая услуга — «Второе мнение врача». Чем же второе мнение так привлекательно и почему считается, что экспертная оценка другого врача — это совершенно новый подход в области лечения и диагностики?

Подробнее

Второе мнение ПЭТ-КТ — что это?

Что такое ПЭТ-КТ? Когда следует обратиться за вторым мнение или ревизией анализов? Рассказываем в нашем блоге.

Подробнее

Если в Израиле дорого для вас — все равно обратитесь

так как консультация бесплатная, а медлогист — это медицинский навигатор

Гистология: показания, как проводится, этапы

Гистология – это раздел науки, который изучает строение, жизнедеятельность и развитие тканей организма человека или животных. Каждая ткань в организме человека имеет определенную структуру, характерные признаки и особенности, а любое отклонение от нормы является патологией. Для выявления различных нарушений в состоянии тканей организма применяется гистологическое исследование.

В плане диагностической эффективности гистологическое исследование является «золотым стандартом» для выявления многих заболеваний организма человека, прежде всего наиболее опасных для здоровья — злокачественных опухолей и предраковых состояний. В большинстве случаев именно гистология ставит окончательный диагноз, являясь завершающим этапом диагностических исследований.

Показания для гистологии

Анализ тканей организма проводится во многих областях медицины, но лучшей информативностью и ценностью данный метод обладает при анализе тканей различных новообразований. Гистология позволяет определить характер опухоли (доброкачественный или злокачественный), скорость увеличения ее размеров, степень дифференцировки клеток (насколько атипичные клетки отличаются от здоровых). Данные исследования позволяет составить эффективную схему лечения и контролировать его результаты, при необходимости вносить изменения в терапию.

Гистологические исследования широко используются во всех разделах медицинской практики – гинекологии, гастроэнтерологии, нефрологии, пульмонологии, урологии, дерматологии, оториноларингологии и других. Помимо диагностики различных новообразований, гистология применяется для дифференциации воспалительных процессов, происходящих  в тканях.

Как проводится гистологический анализ?

Гистологическое исследование в медицинской практике – это забор и последующее изучение биоматериала. В данном случае для анализа берутся образцы тканей организма, которые вызывают вопросы у врача.

Гистологическому исследованию предшествует процедура биопсии, при которой врач производит забор биоптата для исследования. Методика проведения биопсии отличается в зависимости от расположения исследуемого участка. Забор биоматериала может производиться несколькими способами:

• Толстой пункционной иглой (таким способом берут материал из печени или простаты).
• При соскобе, материал берется специальной острой ложечкой-кюретой (проводится при выскабливании матки или цервикального канала).
• С помощью щипка. Материал берется специальными щипчиками, чаще эндоскопическими во время эндоскопического обследования или операции.
• При помощи аспирации. Материал отсасывается маленькой трубкой с помощью вакуума, таким способом получают биоматериал из миоматозных узлов, узлов щитовидной железы и т.д.
• С эпителиальных клеток берется мазок с помощью специальной щетки.

Биопсия может быть инцизионной, материал для которой врач берет во время хирургической операции. Для исследования берется часть пораженной ткани. Гистологическое исследование обязательно проводится после удаления органа или новообразования.

Этапы гистологического исследования

• Забор материала, фиксация его в специальном растворе.
• Доставка биоматериала в лабораторию.
• Обезвоживание тканей и пропитка заливочным материалом (парафином).
• Тонкие образцы тканей помещают на предметные стекла и окрашивают.
• Осмотр образцов тканей под сильным увеличением.

Результаты гистологического анализа готовы на 7-10 день, при исследовании биоматериалов костной ткани заключение будет готово только спустя две недели.

Противопоказания для проведения исследования

Противопоказания для проведения гистологии очень мало. Как правило, противопоказанием является нарушение свертываемости крови и аллергия на анестетики (это не позволит провести забор биоматериала). Биопсия не берется, если есть риск прерывания беременности, при сердечной недостаточности, а также у маленьких детей.

Что показывает гистология?

В процессе гистологического исследования проводится подробный анализ ткани, определяется ее цвет, плотность и консистенция. Описываются обнаруженные патологические изменения в ткани и клетках. В бланке с результатом гистологии указывается вид исследуемых тканей, наличие атипичных клеток, их вид, есть ли злокачественные клетки, есть ли нарушения структуры ткани, наличие воспалительного процесса и другие особенности.

Данные гистологического исследования может оценить только специалист, поэтому, даже получив заключение на руки, не спешите сами ставить себе диагноз и тем более назначать лечение. Лучше в этом вопросе обратиться за квалифицированной помощью.

В многопрофильном медицинском центре «Longa Vita» проводятся гистологические исследования гинекологического профиля, а также анализы новообразований кожи, подкожно-жировой клетчатки, молочной и щитовидной желез, простаты, печени, почек и др. Наш центр специализируется на ранней диагностике рака и у нас работают высококвалифицированные врачи онкологи с многолетним опытом работы в данной области.

Лабораторное время обработки хирургических биопсий в службе гистопатологии в Нигерии

Niger Med J. 2020 июль-август; 61(4): 180–183.

Опубликовано онлайн 2020 август 4. DOI: 10.4103/nmj.nmj_173_20

, ^{1, 2 , 2 , 2 , 2 , 3 , 4 и 5 , 3 , 4 и 5} , ³ , ⁴ и ⁵ , , ³ , ⁴ и ⁵ , ³ , ⁴ и ⁵ , ³ , ⁴ и ⁵ .

Информация об авторе Примечания к статье Информация об авторских правах и лицензиях Отказ от ответственности

Введение:

Лабораторное время оборота определяется как время между получением пробы в лаборатории и моментом, когда отчет готов к сбору/отправке. Это важнейший компонент обеспечения качества лаборатории, и он был определен в качестве ключевого показателя эффективности работы лаборатории. Это исследование направлено на оценку времени оборота в отделении гистопатологии нашего центра и сравнение результатов с аналогичными исследованиями.

Методология:

Это было проспективное описательное исследование первых 500 последовательных образцов хирургических биопсий, представленных для анализа в отделении гистопатологии Учебной больницы Университета Джос. Образцы отслеживались от стойки регистрации, где они передаются в пункт отправки, где клиенты собирают результаты. Для каждого образца регистрировали время сбора данных (T1), время обработки (T2), время составления отчета (T3) и время транскрипции (T4). Полученные данные были проанализированы с помощью программного обеспечения SPSS и представлены в виде простых частот и процентов.

Результаты:

Среднее время обработки в лаборатории составило 7,5 + 9,7 дней с диапазоном от 3 до 18 дней. Целых 20,8% отчетов были готовы к отправке к 3-му дню и 100% к 18-му дню. В целом, время сбора данных (T1), время обработки (T2), время отчетности (T3) и время расшифровки (T4) составило 17,5. %, 35,5%, 27,7% и 19,3% от общего затраченного времени соответственно.

Заключение:

Мы рекомендуем разработку практически осуществимых целей для гистопатологических лабораторий в отношении своевременности. Это должно регулярно оцениваться для обеспечения соответствия и улучшения качества обслуживания в этом отношении.

Ключевые слова: Гистопатология, лаборатория, время оборота

В условиях стационара лабораторное ТАТ (LTAT) — это время между получением образца в лаборатории и моментом, когда отчет готов к сбору/отправке. ^{1 ,2 ,3 ,4 ,5 ,6} LTAT является важным показателем работы лаборатории. ^{7 ,8 ,9 ,10 ,11 ,12 ,13 ,14} Задержка с выдачей отчетов способствует увеличению времени ожидания лечения пациентами, снижает удовлетворенность и увеличивает стоимость больницы. ¹⁵

Патологическая практика в развивающихся странах, как сообщается, характеризуется системными задержками, связанными с получением, обработкой и отчетом об анализируемых образцах. Это исследование направлено на оценку ТАТ в отделении гистопатологии нашего центра и сравнение результатов с аналогичными исследованиями.

Это было проспективное описательное исследование первых 500 последовательных хирургических образцов, представленных для анализа в отделении гистопатологии Учебной больницы Университета Джос. Образцы отслеживались от стойки регистрации, где они были представлены, до момента, когда результаты были готовы для получения клиентами.

Временной интервал между этими крайними значениями (время лабораторного оборота) был разделен на четыре составные части (доля образцов, прошедших процедуры, завершенные с течением времени). Время сбора (T1) — это время (в днях) между отправкой образцов и моментом завершения сбора. Затем следует время обработки (T2) (период, в течение которого ткань обрабатывается), время между завершением сбора ткани и отправкой гистологических слайдов для отчета. Следовательно, Т1 и Т2 составляют преаналитическую фазу. Время отчетности (T3) представляет собой период отчетности и определяется как интервал между представлением образцов для отчетности и временем их отправки на типирование. Это аналитический этап. Наконец, время транскрипции (T4) (постаналитическая фаза) — это период, в течение которого отчеты печатаются, вычитываются и печатаются. Отчеты сразу готовы к сбору/отправке. Все времена были последовательными календарными днями, включая выходные. Полученные данные были проанализированы с использованием программного обеспечения Statistical Package for the Social Sciences (SPSS) (IBM. Статистика SPSS для Windows. Версия 21.0. Armonk, NY: IBM; 2017) и представлены в виде простых частот и процентов.

Таблица 1

Распределение временных интервалов как доля образцов, подвергшихся процедурам, завершенным с течением времени (дни) по отношению к времени оборота в хирургической патологии T1=Время сбора (%) T2=Время обработки (%) T3=Время отчета (%) T4=Время транскрипции (%) Итого=LTAT=T1 + T2 + T3 + Т4 (%) 1 59.6 17.0 43. 8 87.6 — 2 74.2 32.0 63.4 92.4 — 3 92.4 49.4 71.2 94.4 20.80 4 97. 6 63.6 76.2 100. 33.00 5 100.0 76.0 80.8 — 43.00 6 — 93.8 86.0 — 54. 80 7 — 94.6 87.4 — 64.20 8 — 100.0 100.0 — 73.20 9 — — — — 81. 80 10 — — — — 88.40 11 — — — — 92.40 12 — — — — 95. 20 13 — — — — 97.40 14 — — — — 98.40 15 — — — — 99. 40 16 — — — — 99.60 17 — — — — 88.80 18 — — — — 100. 00

Открыть в отдельном окне

LTAT – Время оборота в лаборатории

продолжалось.

Этических проблем не возникало, так как исследование предполагает не прямое использование информации пациентов или диагнозов, полученных на образцах, а строго временные интервалы.

Среднее время оборота в лаборатории составило 7,5 ± 9.7 дней с диапазоном от 3 до 18 дней. Целых 20,8% отчетов были готовы к отправке на 3-й день и 100% на 18-й день []. Среднее время сбора, время обработки, время отчетности и время транскрипции составили 1,6 ± 1,6 дня, 3,5 ± 3,8 дня, 1,9 ± 5,0 дня и 1,1 ± 2,5 дня соответственно с соответствующими диапазонами 1–5 дней, 1–8 дней. дней, 1-8 дней и 1-4 дней.

Доля образцов, собранных, обработанных, зарегистрированных и расшифрованных в первый день, составила 59,6%, 17,0%, 43,8% и 87,6% соответственно.

В целом время сбора данных (T1), время обработки (T2), время отчетности (T3) и время транскрипции (T4) составило 17,5 %, 35,5 %, 27,7 % и 19,3 % от общего затраченного времени соответственно.

Время выполнения работ в лаборатории является неотъемлемым компонентом обеспечения качества. ^{12 ,14} В этом исследовании он колеблется от 3 до 18 дней. Аналогичные значения 2–16 дней и 2–27 дней были зарегистрированы в Кано, Нигерия, и Барселоне, Испания, соответственно. ^{16 ,17} Кроме того, отчет из Элдорета, Кения, за 3–59 дней, однако, был выше. ¹⁴ Кроме того, среднее значение 7,5 ± 9,7 дней в нашем исследовании аналогично 6,2 дням в Кано, ¹⁶ 6,24 ± 3,16 дням в Испании, ¹⁷ , но меньше, чем 16,2 ± 10,20 дням в Кении. ¹⁴ Кроме того, в исследовании, проведенном в Руанде, медиана длительности LTAT составила 32 дня. ¹¹ Сообщалось, что разрыв между развивающимися и развитыми странами в ТАТ объясняется факторами, граничащими с внутрилабораторными ограничениями, межпрофессиональной конкуренцией, плохо структурированными внутренними/внешними программами обеспечения качества, неадекватной инфраструктурой, политикой и экономикой. ¹⁸ Однако это исследование дает надежду на стремление развивающихся стран к повышению эффективности в этом отношении.

LTAT может оцениваться на основе доли запросов, выполненных с течением времени. Коллегия американских патологоанатомов рекомендовала, чтобы LTAT для рутинной хирургической биопсии не превышала 2 дней, а более сложные случаи длились дольше. ^{19 ,20} В 2013 году Королевский колледж патологов рекомендовал, чтобы процент диагностических биопсий, зарегистрированных, подтвержденных и разрешенных в течение 7 дней после биопсии, составлял 80%. Однако позже, в 2014 году, порог был зафиксирован на уровне 9.0%. Кроме того, процентная доля всех окончательных отчетов гистопатологии и диагностической цитологии, доступных в течение 10 календарных дней после процедуры, была предварительно привязана к 80% и увеличилась до 90% к апрелю 2014 года. случаев должны быть завершены к 5-му дню. ² Наш онлайн-поиск показал, что национальные или местные руководства по LTAT в гистопатологии не всегда доступны. Это требует преднамеренных действий со стороны властей развивающихся стран для наращивания потенциала и обеспечения устойчивых сроков и подотчетности, чтобы преодолеть разрыв в этом отношении.

Мы зафиксировали LTAT 20,80%, 54,80%, 73,20% и 92,40% соответственно на 3, 6, 8 и 11 дни. Volmar et al. в американском исследовании Q-Probes с участием 56 учреждений с отчетами о 2763 крупных или сложных гистологических случаях среднее время обработки составляет 2,72 дня. ²² В Ирландии больница соответствовала национальным стандартам в 2017 г.: 80 % малых и эндоскопических биопсий были зарегистрированы к 5-му дню, а 80 % резекций рака и доброкачественных опухолей — к 7-му дню. ²³ Эта разница между нашим центром и этих западных стран объясняется факторами, выделенными выше.

В этом исследовании мы обнаружили, что на преаналитическую, аналитическую и постаналитическую фазы приходится 53,0%, 27,7% и 19,3%, соответственно, общего затраченного времени. Нигерийское исследование, проведенное Uchendu ¹⁸ , показало аналогичные результаты: 57,9%, 28,1% и 13,9% соответственно. Аналитическая фаза в гистопатологии является исключительной обязанностью анатомического патологоанатома ¹² , и в этом исследовании было обнаружено, что в среднем она составляет 1,9 ± 5,0 дней, а диапазон составляет 1–8 дней. Это было лучше, чем среднее значение 3,6 ± 2 дня в Кении, полученное Macbaria et al. ¹⁴ и 2,5 ± 3,2 дня в Нигерии Atanda et al. ²⁴ Доля сообщений в первый день составила 43,8% в этом исследовании, что соответствует 40,7%, зарегистрированным в Нигерии, ²⁴ , но ниже, чем 73,4% в Австралии. ²⁵

Это исследование показало, что, хотя существует разрыв в LTAT между развитыми и развивающимися странами, к настоящему времени были отмечены некоторые улучшения. Поэтому мы рекомендуем разработать практические цели для гистопатологических лабораторий в отношении своевременности. Это должно регулярно оцениваться для обеспечения соответствия и улучшения качества обслуживания в этом отношении.

Финансовая поддержка и спонсорство

Нет.

Конфликт интересов

Четверо из семи авторов, участвовавших в этом исследовании, входят в число 21 врача, которые регулярно участвуют в хирургической патологии в лаборатории в соответствии со своим графиком. Они также являются частью 43 сотрудников лаборатории в целом, участвующих во всем процессе выполнения работ.

1. Брейл Б., Фриц Ф., Тиманн В., Дугас М. Сопоставление времени оборота (ТАТ) с общей временной шкалой: систематический обзор определений ТАТ в клинических областях. БМС Мед Информ Децис Мак. 2011;11:34. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

2. Факультет патологии. Королевский колледж врачей Ирландии. Отчет о данных Национальной программы повышения качества гистопатологии за 2015 г., 2016 г., июль, [последнее обращение: 5 мая 2020 г.]. Доступно по адресу: https://rcpi-live-cdn-s3-amazonaws-com/wp-content/uploads/2016/09/Histopathology-National-Quality-Improvement-Programme-Data-Report-2015-Track-updates.pdf .

3. Jerjes W, Upile T, Radhi H, Petrie A, Adams A, Callear J, et al. Задержка времени обработки патологической ткани по сравнению со смертностью при раке полости рта: краткое сообщение. Голова Шеи Онкол. 2012;4:14. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

4. Дей Б., Бхарти Дж. Н., Чакраборти М. Время выполнения работ в лаборатории. Int J Health Sci Res. 2013;3:82–4. [Google Scholar]

5. Консультативный комитет по анатомической патологии. Время оборота в анатомической патологии. Королевский колледж психологов Австралии. 2015. [Последнее обращение 10 мая 2020 г.]. Доступно по адресу: https://www.rcpa.edu.au/Library/College-Policies/Guidelines/Turnaround-Time-in-Anatomical-Pathology.

6. Вестбрук Дж.И., Джорджиу А., Роб М.И. Компьютеризированные системы ввода заказов: устойчивое влияние на эффективность лабораторий и уровень смертности.? Stud Health Technol Inform. 2008; 136: 345–50. [PubMed] [Академия Google]

7. Хокинс К.Р. Время работы лаборатории. Clin Biochem Rev. 2007; 28:179–94. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

8. Ali SM, Kathia UM, Gondal MU, Zil-E-Ali A, Khan H, Riaz S. Влияние клинической информации на время оборота в хирургической гистопатологии: Ретроспективное исследование. Куреус. 2018;10:e2596. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

9. Uchendu OJ, Eze GI. Внутрилабораторное время оборота (TAT) в развивающейся стране: аудит отделения гистопатологии Нигерийской клинической больницы. Энн Троп Патол. 2013;4:41–5. [Академия Google]

10. Travers H. Индикаторы обеспечения качества в анатомической патологии. Arch Pathol Lab Med. 1990; 114:1149–56. [PubMed] [Google Scholar]

11. Mpunga T, Tapela N, Hedt-Gauthier BL, Milner D, Nshimiyimana I, Muvugabigwi G, et al. Диагностика рака в сельских районах Руанды: первые результаты поэтапного подхода к внедрению патологических анатомических услуг в условиях ограниченных ресурсов. Ам Джей Клин Патол. 2014; 142:541–5. [PubMed] [Google Scholar]

12. АнандраджВайти К., Шанмугасами К., Анандхани Г., Котастане С.Д. Анализ обеспечения качества: новый шаг в установлении сроков обработки отчетов о хирургической патологии как части системы управления качеством. IP J Diagn Pathol Oncol. 2017;2:100–3. [Академия Google]

13. Ключевые показатели эффективности в патологии. Рекомендации Королевского колледжа патологоанатомов. Впервые опубликовано в 2011 г. Исправлено и переиздано. 2013. Апрель, [последнее обращение 10 мая 2020 года]. стр. 1–23. Доступно по адресу: https://www.rcpath-org/uploads/assets/e7b7b680-a957-4f48-aa78e601e42816de/Key-Performance-Indicators-in-Pathology-Recommendations-fromthe-Royal-College-of-Pathologist.pdf.

14. Макбария Б.Н., Диангуи Ф.М., Лкбумба Д.К. Оценка времени обработки биоптатов и хирургических образцов в учебно-справочной больнице Mol, Элдорет, Кения. Кения JHealth Sci. 2015;3:16–22. [Академия Google]

15. Ши-Чоу К. Мониторинг времени оборота с использованием контрольной таблицы средних значений в лаборатории. Int J Ind Eng. 2012;19:476–87. [Google Scholar]

16. Малами С.А., Илиясу Ю. Локальный аудит диагностической хирургической патологии как инструмент обеспечения качества. Нигер J Med. 2008; 17: 186–90. [PubMed] [Google Scholar]

17. Рибе А., Рибалта Т., Льедо Р., Торрас Г., Асенхо М.А., Кардеса А. Оценка времени оборота как компонент обеспечения качества в хирургической патологии. Int J Qual Health Care. 1998;10:241–5. [PubMed] [Google Scholar]

18. Ученду О.Дж. Проблемы практики гистопатологии в развивающейся стране: перспектива Нигерии. Энн Биомед Дж. 2013; 12:68–74. [Google Scholar]

19. Патель С., Смит Дж. Б., Курбатова Е., Гарнер Дж. Факторы, влияющие на время обработки образцов хирургической патологии в академическом учреждении. Хум Патол. 2012;43:1501–5. [PubMed] [Google Scholar]

20. Zarbo RJ, Gephardt GN, Howanitz PJ. Внутрилабораторная своевременность заключения о хирургической патологии. Результаты двух исследований Q-Probes Коллегии американских патологоанатомов биопсий и сложных образцов. Arch Pathol Lab Med. 1996;120:234–44. [PubMed] [Google Scholar]

21. Ключевые показатели эффективности в патологии. Рекомендации Королевского колледжа патологоанатомов. 2013. [Последнее обращение 5 мая 2020 г.]. Доступно по адресу: https://www.rcpath.org/uploads/assets/e7b7b680-a957-4f48-aa78e601e42816de/Key-Performance-Indicators-in-Pathology-Recommendations-from-the-Royal-College-of-Pathologist.pdf .

22. Volmar KE, Idowu OM, Souers JR, Karcher SD, Nakhleh ER. Время обработки больших или сложных образцов в хирургической патологии: исследование Q-зондов колледжа американских патологоанатомов в 56 учреждениях. Arch Pathol Lab Med. 2015;139: 171–7. [PubMed] [Google Scholar]

23. Сроки выполнения гистопатологии/цитологии – когда следует ожидать публикации отчета? Больница Сент-Джеймс. Больница Святого Джеймса. [Последнее обращение 5 мая 2020 г.]. Доступно по адресу: http://www.stjames.ie/Departments/DepartmentsA-Z/H/HistopathologyCytology/DepartmentinDepth/TurnAroundTimes/

24. Atanda AT, Yusuf I, Haruna MS. Воспринимаемое и реальное время обработки гистопатологии: опыт клинической больницы. Нигер Дж. Сург. 2017;23:98–101. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

25. Kazzi JC, Lloyd PJ, Bryant S. Сроки обработки отчетов о неосложненных биопсиях в пяти основных лабораториях анатомической патологии в Новом Южном Уэльсе, Австралия. Патология. 1999; 31: 406–12. [PubMed] [Google Scholar]

Этапы и методы гистопатологии

1. Получение свежего образца

Свежие образцы тканей поступают из различных источников. Следует отметить, что они очень легко могут быть повреждены при снятии с больного или экспериментального животного. Важно, чтобы с ними обращались осторожно и надлежащим образом фиксировали как можно скорее после рассечения. В идеале фиксация должна производиться на месте удаления, возможно, в операционной или, если это невозможно, сразу после транспортировки в лабораторию.

2. Фиксация

Образец помещается в жидкий фиксирующий агент (фиксатив), такой как раствор формальдегида (формалин). Это будет медленно проникать в ткань, вызывая химические и физические изменения, которые затвердевают и сохраняют ткань и защищают ее от последующих этапов обработки. ²  Существует ограниченное количество реагентов, которые можно использовать для фиксации , поскольку они должны обладать особыми свойствами, делающими их подходящими для этой цели. Например, тканевые компоненты должны сохранять некоторую химическую реактивность, чтобы впоследствии можно было применять определенные методы окрашивания. ³  Формалин, обычно в виде фосфатно-буферного раствора, является наиболее популярным фиксатором для сохранения тканей, которые будут обрабатываться для изготовления парафиновых срезов. В идеале образцы должны оставаться в фиксаторе достаточно долго, чтобы фиксатор проник во все части ткани, а затем в течение дополнительного периода времени, чтобы химические реакции фиксации достигли равновесия (время фиксации). Как правило, это будет означать, что образец должен фиксироваться от 6 до 24 часов. Большинство лабораторий будут использовать этап фиксации в качестве первой станции на своем процессоре.

После фиксации образцы могут потребовать дальнейшего вскрытия для выбора соответствующих областей для исследования. Образцы, подлежащие обработке, будут помещены в кассеты с соответствующей маркировкой (небольшие перфорированные корзины), чтобы отделить их от других образцов. Продолжительность графика обработки, используемого для обработки образцов, будет зависеть от типа и размеров самых больших и самых маленьких образцов, конкретного используемого процессора, выбранных растворителей, температуры растворителей и других факторов. Следующий пример основан на шестичасовом графике, подходящем для использования на быстром процессоре тканей Leica Peloris™.

3. Дегидратация

Поскольку расплавленный парафин является гидрофобным (не смешивается с водой), большая часть воды в образце должна быть удалена до того, как он будет пропитан воском. Этот процесс обычно осуществляется путем погружения образцов в серию растворов этанола (спирта) возрастающей концентрации до тех пор, пока не будет получен чистый, не содержащий воды спирт. Этанол смешивается с водой во всех соотношениях, так что вода в образце постепенно заменяется спиртом. Используется серия возрастающих концентраций, чтобы избежать чрезмерного искажения ткани.

Типичная последовательность обезвоживания образцов толщиной не более 4 мм:

1. 70% этанол      15 мин
2. 90% этанол      15 мин
3. 100% этанол    15 мин
4. 100% этанол    15 мин
5. 100% этанол    30 мин
6. 100% этанол    45 мин

К этому моменту из образца должны были быть удалены все, кроме небольшого остатка прочно связанной (молекулярной) воды.

4. Клиринг

К сожалению, хотя ткань теперь практически не содержит воды, мы все еще не можем пропитать ее воском, потому что воск и этанол практически не смешиваются. Поэтому мы должны использовать промежуточный растворитель, который полностью смешивается как с этанолом, так и с парафином. Этот растворитель вытеснит этанол в ткани, который, в свою очередь, будет вытеснен расплавленным парафином. Эта стадия процесса называется «очистка», а используемый реагент называется «очищающим агентом». Термин «осветление» был выбран потому, что многие (но не все) очищающие агенты придают тканям оптическую чистоту или прозрачность благодаря их относительно высокому показателю преломления. Другая важная роль очищающего агента заключается в удалении значительного количества жира из ткани, который в противном случае представляет собой барьер для инфильтрации парафина.

Популярным очищающим агентом является ксилол, и для полной замены этанола требуется несколько замен.

Типичная последовательность очистки образцов толщиной не более 4 мм:

1. ксилол  20 мин
2. ксилол 20 мин
3. ксилол 45 мин

5. Инфильтрация воска

Теперь ткань можно инфильтрировать подходящим гистологическим воском. Хотя многие различные реагенты были оценены и использовались для этой цели в течение многих лет, наиболее популярными являются гистологические воски на основе парафинового воска. Типичный воск является жидким при температуре 60°C и может проникать в ткани при этой температуре, а затем охлаждаться до 20°C, где он затвердевает до консистенции, позволяющей последовательно резать срезы. Эти воски представляют собой смеси очищенного парафинового воска и различных добавок, которые могут включать смолы, такие как стирол или полиэтилен. Следует понимать, что эти восковые составы обладают особыми физическими свойствами, которые позволяют тканям, пропитанным воском, делать срезы толщиной не менее 2 мкм, формировать ленты при разрезании срезов на микротоме и сохранять достаточную эластичность. полностью сплющиться во время флотации на водяной бане с теплой водой.

Типичная последовательность инфильтрации образцов толщиной не более 4 мм:

1. воск      30 мин
2. воск      30 мин
3. воск      45 мин

   6. Заливка или блокировка

Теперь, когда образец полностью пропитан воском, его необходимо сформировать в виде «блока», который можно зажать в микротоме для резки срезов. Этот этап выполняется с использованием «центра заливки», где форма заполняется расплавленным воском и в нее помещается образец. Образец очень тщательно ориентируется в форме, потому что его размещение будет определять «плоскость сечения», что является важным фактором как в диагностической, так и в исследовательской гистологии.