Гистологические и цитологические исследования | Клиника Рассвет

Гистологические и цитологические исследования — методы лабораторной диагностики, направленные на выявление патологических процессов в организме, установление точного диагноза и контроль эффективности терапии.

Цитологический метод обладает высокой чувствительностью и специфичностью, помогает выявлять аномальные изменения элементов клеток. Основная сфера применения цитологического исследования — гинекология, однако оно информативно и используется при диагностике патологий других органов и систем: дыхательных путей, мочевыводящих путей, желудочно-кишечного тракта, щитовидной железы, слюнных желез, лимфатических узлов.

Для проведения цитологического исследования и оценки патоморфолог наносит исследуемый материал (эксфолиативный, пункционный, биопсийный или операционный) на предметное стекло, специальным образом окрашивает его и изучает отдельные клетки образца под микроскопом.

Гистологическое исследование помогает выявить морфологические признаки патологического процесса в тканях. Являясь «золотым стандартом» диагностики онкологических заболеваний и верификации опухолей, гистологическое исследование широко применяется при диагностике эндокринных патологий, аутоиммунных заболеваний, патологий ЖКТ и печени, нефрологических заболеваний, заболеваний ЛОР-органов, доброкачественных образований, при оценке воспалительных процессов, динамическом наблюдении и определении эффективности противоопухолевой терапии.

Забор фрагмента ткани пораженного органа или новообразования осуществляется во время биопсии или операции. Он помещается в фиксирующий раствор, обрабатывается и нарезается на тонкие срезы, которые затем окрашиваются гистологическими красителями гематоксилинном и эозином, использующимися в рутинной практике патоморфологов. Дополнительно может проводиться иммуногистохимическое или молекулярно-генетическое исследование.

Рассвет оснащен всем необходимым оборудованием для проведения цитологических и гистологических исследований. Мы проводим цитологическую диагностику поражений кожи, исследование соскобов и отпечатков эрозий, ран, свищей, цитологическую диагностику заболеваний щитовидной железы, мочеполовой системы, молочных желез, гистологическое исследование биопсийного материала кожи, мягких тканей и внутренних органов. В клинике работают эндоскописты и патоморфологи высшей квалификационной категории, поэтому мы проводим исследования любой сложности, гарантируем точную интерпретацию их результатов и даем заключения, соответствующие современным требованиям и классификациям.

Цитология и гистология. В чем разница?

Цитология

Цитология (греч. κύτος «клетка» и λόγος — «учение», «наука») — раздел биологии, изучающий живые клетки, их органеллы,строение и функционирование, процессы клеточного размножения, старения и смерти.

Цитологические исследования в лаборатории проводят каждый день. Самыми простым примером может служить общий клинический анализ крови. Врач-лаборант ежедневно проводит исследования большого количества мазков крови, подсчитывает популяцию клеток, дифференцирует их и указывает на нарушение строения, в случае если таковые имеются.

То есть цитологическое исследование подразумевает под собой исследование клеток под микроскопом на предмет их строения и изменений.

Когда же еще можно использовать данный метод?

Чаще всего цитологией пользуются дерматологи и онкологи.

Дерматологам данное исследование позволяет оценить тип и интенсивность воспаления, обсеменение микрофлорой или грибами. Чаще всего цитологическое исследование врач проводит прямо на приеме, чтобы назначить корректное лечение вашему питомцу.

А вот в случае подозрения на новообразование у питомца сложнее. Врач на приеме может взять тонкоигольную биопсию. А врач-лаборант окрасит полученный материал специальными красителями для качественного исследования. Цитолог в свою очередь будет тщательно оценивать изменения в клетках, определять наличие или отсутствие воспаления, микрофлоры, грибов.

Так же цитологически исследуют выпоты в брюшную или грудную полости, синовиальную жидкость, ликвор и многое другое.

Преимущества цитологии:

• Быстрый результат (от 1 часа до 3 дней)
• Несложный забор материала у животного
• Постановка предварительного диагноза
• Помощь врачу качественно назначить необходимое лечение

Цитология

Гистология

Гистология (от греч. ἱστός «ткань» + λόγος «знание, слово, наука») — раздел биологии, изучающий строение, жизнедеятельность и развитие тканей живых организмов

Гистология изучает ткани, которые в свою очередь состоят из клеток. То есть изменения рассматривают в более крупном объеме.

Для проведения гистологического исследования необходимо получить образец ткани (кусочек кожи, кусочек кости и т.п.). Материал специально готовится перед тем, как гистолог будет его исследовать. Этот процесс может занимать от 3 до 10 дней. Далее врач будет оценивать строение и изменения в ткани.

Зачем же гистология:

• Подтвердить или опровергнуть цитологический диагноз
• Дать предварительный диагноз для дальнейшего исследования (например, иммуногистохимии)
• Помощь врачу в выборе тактики и лечения питомца с онкологическими заболеваниями.

Гистология. Фото врача-гистолога Лисицкой К.В.

Таким образом, для корректного лечения вашего питомца важны как цитология, так и гистология.

Здоровья вам и вашим питомцам!

Лаборатория МВЦ «ПиК»

Цитология и гистология — показания к проведению исследований, как проводят, результаты диагностики

Цитология и гистология — в чем отличия?

Отличия исследований

Если говорить о названных научных направлениях, то разница между ними будет ясна сразу:

• Гистология – научное направление, занимающееся анализом строения ткани;
• Цитология – научное направление, предметом исследования которого являются клетки.

У цитологии и гистологии в плане анализа есть определенные расхождения.

Первое – это метод оценки характеристик элементов клетки исследуемого биоматериала. Метод применим для выявления опухолей и неопухолевых патологий.

Второе являет собой метод диагностики лабораторной, предметом исследования которой являются образцы биоптата, то есть забранных в ходе манипуляции тканевых элементов.

Оба направления важны с чисто практической точки зрения: они дают врачу картину для постановки диагноза, предварительного либо окончательного, при различных патологиях. Широко применимы они и в онкологии.

Цитология

Проводят его, чтобы оценить морфологические спецификации элементов клеток тканей самых разных органов, а также жидкостей и разного рода выделений организма.

Проведение процедуры помогает медикам понять сущность диспластических и злокачественных преобразований конкретных клеток и на основании собранной информации поставить предварительный диагноз.

Метод имеет свои преимущества:

• Он доступен;
• Экономичен для пациента;
• Не требует сложного дорогостоящего оборудования;
• По длительности проведения укладывается в 60 минут;
• Неинвазивен или малоинвазивен (здесь все зависит от выбранной врачом методики забора материала).

Согласитесь, перечисленные преимущества объясняют широкую популярность исследования, его охотно применяют, например, в рамках первичного обследования разных заболеваний.

Специфика изъятия материала стала основой следующей классификации исследования:

• Дооперационная;
• Интраоперационная.

Первая имеет следующие виды:

• Эксфолиативная. Здесь объектом анализа становится отделяемое мочеполовых органов, мокрота, пот, моча, и др. Данная разновидность имеет один существенный недостаток – сохранность материала оставляет желать лучшего.
• Абразивная. Объект исследования – соскобы с областей внутренних органов. Чтобы изъять материал, врач использует специальные инструменты. Данный подход позволяет хорошо сохраняться материалу, а значит, результат будет более четким.
• Аспирационная. Используют методику тонкоигольной биопсии. Это дает врачу самые широкие возможности для доступа в любой орган. Данный способ нашел свое широкое распространение в диагностике опухолей молочной железы на ранней стадии их развития.

Одного только цитологического анализа, при всех его неоспоримых плюсах, недостаточно для постановки анализа окончательного. С помощью метода врач может констатировать наличие злокачественного новообразования, не более того. Существуют современные методики, благодаря которым предварительный диагноз ставится более точно и на основании его врач может спланировать лечебную тактику.

Несколько слов необходимо сказать о цитологическом исследовании в гинекологии. Здесь оно проявляет себя как метод высоко информативный, абсолютной безопасный и дающий врачу необходимую картину для начала лечения при наличии выявленной патологии.

Цитология мазка шейки матки – необходимая и обязательная мера в плане диагностики болезней половой сферы женщины.

Сама процедура не причиняет пациентке неудобств или беспокойства, ее проведение безболезненно и не занимает длительного времени.

Исследования гистологические

Данный вид исследования проводят с целью подтверждения или опровержения предварительного диагноза.

Объектом исследования становится материал (биоптат), взятый во время биопсии Прежде чем начать изучение биоптата, необходимо правильно подготовить его. Подготовка требует времени, поэтому результат анализа приходиться ждать несколько дней. С этим нужно мириться, так как само исследование высоко информативно и надежно с точки зрения правильности диагноза.

Лишь в случаях экстренных проводят срочные исследования, когда необходимо быстро принять решение о пересадке органа либо его удалении.

Посредством метода анализируют характер фрагмента ткани, а не отдельных клеток. Можно сказать о том, что сегодня данное исследование единственное, которое позволяет окончательно верифицировать опухолевые образования, в том числе онкологические.

Забор биоптата для последующего анализа производится следующими вариантами:

• Щипковый – кусочки ткани врач откусывает специальными щипчиками;
• Кюретаж – для выскабливания используют кюретку;
• Биопсия пункционная – ткань забирают из разных локаций органа;
• Биопсия эксцизионная – врач удаляет весь орган, чтобы затем провести его анализ, изучаются при этом отдельные фрагменты органа.

Как мы уже отметили, подготовка к исследованию занимает достаточно времени. Вначале биоптат помещают в парафин и делают мельчайшие срезы.

Затем срезы окрашивают и начинается этап микроскопии, т.е. изучения биоптата под микроскопом.

Исследователь оценивает разные аспекты, например, клеточное строение, взаимоотношение клеток в рамках слоя ткани и т.д.

Гистологическое исследование – метод, сопряженный с трудностями, и связан с различными техниками забора биоптата, подготовки его к анализу, способами микроскопии.

Среди способов микроскопии выделяют:

• Микроскопия в темном поле. Использование явления рассеивания света на границе двух объектов с разными показателями преломления.
• Фазово-контрастная и интерференционная. В их основе – способность биологических структур изменять фазу проходящих через них лучей.
• Поляризационная. В основании – свойство двойного лучепреломления структур в клетках и тканях.
• Флюоресцентная (люминесцентная). В основе регистрация флюоресцирующих веществ, которая делает возможным изучать клетки и ткани при освещении ультрафиолетом или сине-фиолетовыми лучами.
• Ультрафиолетовая. Использована абсорбция ультрафиолетовых лучей химическими структурами клеток.

Узнайте в клинике интегративной онкологии Onco.Rehab информацию, которая интересует Вас!

Цитология и гистология – сдать анализы в Сети клиник МЕГИ

Наиболее распространенной причиной смерти от злокачественных образований у женщин является рак шейки матки. В качестве диагностики для выявления заболевания на ранней стадии используется мазок на цитологию.

Анализ проводят под микроскопом, определяя морфологические особенности клеток в исследуемом биоматериале. Благодаря данному методу исследования получилось в несколько раз снизить смертность от рака. Особым преимуществом теста перед другими методиками исследований является точность диагностики, особенно на начальных этапах рака.

Результаты лабораторного анализа позволяют предположить вероятный характер патологического процесса в близлежащих тканях и помогают диагностировать различные заболевания.

Показания к исследованию

Сдать анализ на цитологию рекомендуется женщинам через 3 года после начала интимной жизни. При отрицательных результатах нужно проводить скрининг один раз в 2-3 года.

Существует ряд показаний, по которым проведение анализа выполняется внепланово:

1. Наличие ВПЧ в организме, передающейся половым путем и выступающей главным провоцирующим фактором образования злокачественных опухолей;
2. Генитальный герпес и другие венерические заболевания;
3. Нарушение микрофлоры и наличие патологических выделений из влагалища;
4. Сложные роды, аборты;
5. Эрозия шейки матки;
6. Рак в ремиссии;
7. Изменения ткани на шейке, обнаруженные во время осмотра.

В стандартном анализе используется биоматериал, полученный с помощью щетки из экзоцервикса и эндоцервикса. В сети клиник МЕГИ специалисты берут образцы эпителия с внутренней и наружной поверхностей шейки матки. Процедура абсолютно безболезненная и занимает не более 10 секунд. Полученный биоматериал окрашивают, изучают его состав и делают вывод на основании размеров, форм и количества клеток, содержащихся в биоматериале.

Анализ на жидкостную цитологию

Цитологическое исследование отличается от стандартного тем, что полученный материал помещают во флакон с транспортной средой. Такой тест считается наиболее результативным в выявлении интраэпителиальных неоплазий.

Преимущества жидкостного ПАП-теста:

1. Сохранение всех биологических и морфологических свойств у клеток;
2. Более длительный срок хранения;
3. Можно приготовить разное количество цитологических препаратов.

Процедуру взятие урогенитального мазка рекомендуется проводить до менструации или через 2-3 дня после ее завершения.

В клиниках МЕГИ клинико-диагностический анализ мазка на цитологию берут гинекологи с большим опытом работы по диагностированию онкопатологии различной локализации. Они помогут выявить возможные отклонения от нормы и подберут лечение для своевременного их устранения.

Цитологические исследования

Цитологическое исследование — это оценка характеристик морфологической структуры клеточных элементов в цитологическом препарате (мазке) с целью установления диагноза доброкачественной или злокачественной опухоли и неопухолевых поражений. Оно основано на изучении с помощью микроскопа особенностей строения клеток, клеточного состава органов, тканей, жидкостей организма человека в норме и при патологических процессах. 

Цитологические исследования

520₽

Цитологическое исследование соскоба с шейки матки

465₽

Цитологическое исследование соскоба из цервикального канала

465₽

Цитологическое исследование смешанного соскоба c шейки матки и из цервикального канала

660₽

Цитологическое исследование аспирата из полости матки

500₽

Цитологическое исследование мокроты

660₽

Цитологическое исследование пунктатов молочной железы и кожи

590₽

Цитологическое исследование пунктатов щитовидной железы

685₽

Цитологическое исследование пунктатов других органов и тканей

685₽

Цитологическое исследование материала, полученного при хирургических вмешательствах

660₽

Цитологическое исследование соскобов и отпечатков ВМС, эрозий, ран, осадка мочи, свищей, отделяемого

480₽

Цитологическое исследование соскобов и отпечатков опухолей и опухолевидных образований

565₽

Цитологическое исследование соскобов и отпечатков опухолей и опухолевидных образований

300₽

Жидкостная цитология BD ShurePath с автоматизированной системой просмотра цитологических препаратов BD FocalPoint GS

1 800₽

Жидкостная цитология BD ShurePath с автоматизированной системой просмотра цитологических препаратов BD FocalPoint GS

5 100₽

*Определение онкомаркера p16ink4a

3 300₽

**Скрининг рака шейки матки (жидкостная цитология BD ShurePath с автоматизированной системой просмотра цитологических препаратов BD FocalPoint GS и с ВПЧ-тестом (ROCHE COBAS4800)

2 795₽

Гистологическое исследование материала, полученного при хирургических вмешательствах и других срочных исследованиях

1 700₽

Гистологическое исследование биопсийного материала (эндоскопического материала, тканей женской половой системы, кожи, мягких тканей, кроветворной и лимфоидной ткани, костно-хрящевой ткани)

2 980₽

**Пункционная биопсия мультифокальная

11 365₽

Не секрет, что одним из важнейших критериев качественного результата лабораторной диагностики является профессиональный уровень сотрудника, который проводит исследование.  Поэтому в Клинике 112 с особым вниманием относятся к подготовке персонала, периодически отправляя  лаборантов на курсы переподготовки и в обязательном порядке отслеживаем процесс диагностики, опираясь на многоуровневую систему контроля качества международного образца.

Цитологический анализ используют:

• Скрининге (профилактическом осмотре).
• Установлении (уточнении) диагноза при заболевании.
• Установлении (уточнении) диагноза во время операции.
• Контроле в ходе лечения и после лечения.
• Динамическом наблюдении (для раннего выявления рецидивов).

Материалы для цитологического исследования:

Жидкости: мокрота, моча, сок предстательной железы, смывы из различных органов во время эндоскопии, а также из шейки и полости матки (цитологическое исследование мазков, цитологическое исследование шейки матки), выделения из молочных желез, соскобы и отпечатки с эрозированных или язвенных поверхностей, свищей, ран, жидкость из суставных и серозных полостей, цереброспинальная и амниотическая жидкость;
Пунктаты: материалы, полученного при аспирационной диагностической пункции, преимущественно тонкой иглой;
Отпечатки с удаленных тканей, например поверхности свежего разреза оперативно удаленной или взятой для гистологического исследования ткани.

Подготовка к цитологическому исследованию

• Нельзя проводить такие исследования в период приема любых антибактериальных препаратов.
• Эти исследования не сдаются в период менструации и в течение 1-2 дней после её окончания.
• За 2-3 дня до визита в клинику следует прекратить использование любых влагалищных таблеток, шариков, свеч — и лечебных, и противозачаточных (Фарматекс, Пантекс-Овал, клион Д, Полижинакс и прочие).
• Накануне вечером и с утра в день взятия мазка не следует подмываться и спринцеваться.
• ВАЖНО! Нельзя брать мазки на ПЦР после проведения кольпоскопических проб.

Гистология и биопсия это одно и тоже?

Когда пациент сталкивается серьезным заболеванием, он часто слышит от специалиста такие слова как гистология и биопсия – насколько эти термины аналогичны и однозначны и есть ли перед ними отличия?

В частности стоит сразу сказать – это разные термины:

1. Так биопсия представляет собой способ забора биологического материала, который далее передается на исследование.

2. В то время как гистология – способ исследования, наравне с цитологией. Именно гистология и цитология – это дополнительные методы диагностики, которые назначает врач при невозможности получить точный и развернутый ответ в подтверждение или опровержение предварительного диагноза.

Биопсия назначается к проведению при подозрении на онкологию и помогает определить наличие в организме пациента злокачественного ракового очага, отличить его от предракового состояния.

Говоря конкретно о гистологии – это лабораторный метод исследования, позволяющий дать точный и информативный ответ на наличие/отсутствие патологических в организме клеток, злокачественной природы новообразований. Гистологию врач назначает при проведении обследования самых разных органов и с учетом этого выделяют самые разные методики забора биоматериала:

1. Мазок – отпечаток.
2. Соскоб и тканевой срез.
3. Пункция при помощи иглы.
4. Посредством проведения аспирации.

После, полученный биологический материал сразу отправляют на микроскопическое исследование для выявления как патологических процессов, так и патологических в образце клеток. С целью проведения гистологического вида исследования – применяют такие оптического типа приборы:

• Классический для исследований световой аппарат.
• Растровый аппарат и люминесцентные спектральные лабораторные аппараты.
• Микроскоп Фрица Цернике.

Помимо этого могут применять и экспресс – методику диагностирования и исследования биологического материала и к нему прибегают в процессе проведения оперативного вмешательства, когда были выявлены подозрительного типа новообразования.

Как видим – гистология и проводимая биопсия не есть синонимами и аналогичными терминами, разница меж ними достаточно существенна и очевидна. Для проведения гистологии и данного вида лабораторного исследования – необходимо провести биопсию. Сама по себе биопсия, без последующего проведения гистологии или же цитологического исследования не несет в себе никакой сути и ценности.

21.11.2017

Цитологический метод в диагностике опухолей и опухолеподобных процессов

Цитопатология, клиническая или диагностическая цитология, изучает клеточный состав патологических процессов. В качестве отдельной медицинской специальности официально признана в 1941 г. после работ Папаниколау Г. и Траута Н. К чести нашей страны разработка цитологического метода диагностики начата в 1938 г. в клинико-диагностической лаборатории Московского научно-исследовательского онкологического института им. П.А. Герцена. В 1941 г. профессор Н.Н. Шиллер-Волкова на сессии института доложила о первых результатах по исследованию выделений из влагалища, мокроты и пунктатов. В развитии цитологии можно выделить три основных этапа: эксфолиативная, в основном гинекологическая цитопатология; аспирационная цитология, бурный расцвет которой начинается с 80-х годов и связан с внедрением ультразвуковой диагностики, и современный этап развития определяется применением иммуноцитохимических и молекулярных методов исследования, а также автоматизированного скрининга в гинекологической цитологии.

Цитологический метод технически прост, быстр, сравнительно дешев, малотравматичен. Однако «легкость» цитологического метода обманчива, так как цитологическое исследование должно заканчиваться формулировкой заключения, основываясь на котором разрабатывается тактика лечения.

По способу получения материала цитологию можно подразделить на дооперационную (эксфолиативную, абразивную, аспирационную) и интраоперационную. Эксфолиативная цитология включает в себя исследование вагинальных мазков, мокроты, мочи, плевральной, перитонеальной, перикардиальной, цереброспинальной, синовиальной жидкости и т.д. Этот раздел цитологии отличается простотой техники получения большого количества различного типа клеток, в том числе воспалительного ряда. Клеточный материал может быть не очень хорошо сохранен. Для получения информативного материала с поверхности патологического очага удаляют гноевидные массы, корочки, некротический налет. Если полученный материал представляет жидкость, то в нее добавляется цитрат натрия, чтобы жидкость не свернулась.

Абразивная цитология получает материал из определенного участка внутренних органов, в том числе исследуются субэпителиальные поражения с помощью фиброоптических инструментов. При таком взятии материала клетки хорошо сохраняются, и препараты легко интерпретировать. Материал получают из шейки матки, вагины, эндометрия, респираторного, желудочно-кишечного, мочеполового тракта.

Тонкоигольная биопсия в настоящее время позволяет получить материал практически из любого органа. Метод постоянно совершенствуется и дает оптимальные результаты, что делает его в плане диагностики высокоэффективным и экономичным.

Взятый для цитологического исследования материал помещают на край предметного стекла и другим предметным или покровным стеклом равномерно, сильно не надавливая, тонким слоем распределяют по всей поверхности препарата.

В последние годы помимо рутинных цитологических мазков для получения качественных монослойных цитологических препаратов используется жидкостная система: пунктаты вносятся в специальную среду накопления, после чего центрифугируются в режиме 1000 оборотов в течение 5 минут при среднем ускорении на центрифуге (Суtospin-3, Суtospin-4). Применение методики жидкостной цитологии имеет ряд преимуществ: обеспечивает сохранность клеточных структур, уменьшает фон, клетки сосредотачиваются в одном месте – «окошке», что сокращает время просмотра препарата и значительно экономит дорогие сыворотки при проведении иммуноцитохимического исследова-
ния. Для создания архива и возможности последующего исследования материала используется методика Cell-block, при которой получаются препараты, занимающие промежуточное положение между цитологическими и гистологическими.

Влажная фиксация препарата в спирте сразу после взятия мазков применяется при окраске по Папаниколау. В остальных случаях мазки высушивают на воздухе, а затем фиксируют уже в лаборатории. Наиболее распространенный способ фиксации – в равных объемах спирта и эфира (смесь Никифорова). Для иммуноцитохимического исследования применяют фиксацию ацетоном. При окраске мазков используют панхромную окраску азур-эозином по методу Романовского – Гимза в различных модификациях (Лейшмана, Паппенгейма), а также окраска гематоксилином и эозином, особенно при исследовании гинекологического материала используется окраска по Папаниколау. Возможно при рутинном исследовании или специальной окраске выявление бактериальной флоры, в том числе бацилл Коха, лепры, хеликобактера, трихомонад и т.д.

Цитологическая диагностика основана на следующих принципах:

• Разница клеточного состава в норме и патологии.
• Оценка не одной отдельно взятой клетки, а совокупности клеток, большое значение придается фону препарата.
• Цитолог должен иметь патологоанатомический базис.
• Каждое исследование завершается формулировкой заключения.

Критерии цитологической диагностики злокачественных новообразований составляются из оценки клетки, ядра и ядрышка.

Клетка:

– увеличена в размере, иногда гигантская, редко размер близок к норме, что затрудняет цитологическую диагностику, например, при коллоидном, тубулярном раке, маститоподобном варианте долькового рака молочной железы, фолликулярном раке щитовидной железы, карциноиде, почечноклеточном светлоклеточном раке, высокодифференцированных веретеноклеточных саркомах;

– изменение формы и полиморфизм клеточных элементов;

– нарушение соотношения ядра и цитоплазмы в сторону увеличения доли ядра;

– диссоциация степени зрелости ядра и цитоплазмы, например, молодое ядро в ороговевшей цитоплазме при высокодифференцированном плоскоклеточном раке.

Ядро:

– увеличение размера, полиморфизм, бугристость, неравномерный рисунок хроматина, наиболее постоянный признак – неровность контуров, гиперхромия, фигуры клеточного деления в цитологических препаратах сравнительно редки.

Ядрышко:

– число ядрышек больше, чем в нормальной клетке, ядрышки увеличены в размере, неправильной формы.

Несмотря на присутствие критериев злокачественности у подавляющего большинства клеток, в некоторых клетках рака эти критерии могут отсутствовать или быть выражены в неполном объеме. Необходимо обращать внимание на особенности взаимного расположения клеток, характер межклеточных связей. Заключение формулируют по совокупности признаков при достаточном количестве клеточного материала. Попытка оценить мазок по неадекватно взятому материалу – наиболее частая причина ошибочных заключений.

Основные задачи цитологической диагностики состоят в следующем:

1. Формулировка заключения до лечения.
2. Интраоперационная срочная диагностика.
3. Контроль эффективности лечения.
4. Оценка важнейших факторов прогноза течения заболевания.

Цитологическое заключение до лечения включает:

• определение гистогенеза новообразований;
• установление степени дифференцировки опухолевого процесса;
• уточнение степени распространенности опухоли;
• изучение фоновых изменений;
• определение некоторых факторов прогноза;
• возможность исследования бактериальной флоры.

Современное цитологическое заключение не только констатирует наличие рака, но и указывает гистологический тип опухоли и степень дифференцировки согласно общепринятым международным классификациям (МКБ-О и ВОЗ).

Критериями достоверности цитологического метода являются результаты сопоставления с плановым гистологическим исследованием. Наибольший процент совпадений цитологического заключения с окончательным гистологическим заключением наблюдается при исследовании образований кожи, молочной, щитовидной железы, при метастатическом поражении лимфатических узлов. Результаты исследования гиперпластических процессов в эндометрии неудовлетворительны (достоверность 30–50%) и заставляют искать пути совершенствования диагностики. Достоверность цитологической диагностики патологии шейки матки составляет 75–90%. 3–24% исследований, в зависимости от локализации и способа получения материала, оказываются неудачными из-за неадекватно полученного, неинформативного материала.

Таблица 1. Достоверность цитологических исследований
опухолей различных локализаций.

Уверенное цитологическое заключение о наличии злокачественного новообразования, совпадающее с клиническими симптомами и данными других диагностических исследований, расценивается как морфологическое подтверждение диагноза злокачественной опухоли. Это предъявляет к цитологическому методу высокие требования и заставляет искать пути предупреждения возможных ошибок. По характеру ошибки цитологов можно разделить на две большие группы: ложноотрицательные и ложноположительные. Ложноотрицательные заключения преобладают и приводят к гиподиагностике опухолевого процесса, чаще всего из-за небольшого количества информативного материала в пунктате. Имеются и объективные трудности в оценке изменений, связанные чаще с высокой дифференцировкой опухоли, например, практически невозможно диагностировать фолликулярный рак щитовидной железы с минимальной инвазией, трудно диагностируется тубулярный, маститоподобная форма долькового рака молочной железы.

Гипердиагностика опухолей на нашем материале многие годы не превышает 1%, однако может служить причиной ненужного, а иногда и калечащего лечения. Истинная гипердиагностика, то есть ложное цитологическое заключение о наличии опухоли, объясняется несколькими наиболее типичными причинами.

Выраженная пролиферация клеточных элементов является наиболее частой причиной гипердиагностики рака. Например, пролиферация эпителия протоков и долек молочной железы при фиброаденоме и пролиферирующем аденозе, особенно при укрупнении ядер, наиболее часто приводит к гипердиагностике рака молочной железы. Правильной диагностике помогает анализ ядерных характеристик клеток опухоли: наличие ровных контуров ядра и равномерное распределение хроматина.

Реактивные изменения эпителия служат также нередкой причиной неадекватной цитологической диагностики. Наиболее тяжелые ошибки встречаются при ангиомиолипоме почки, при которой реактивные изменения почечного эпителия с укрупнением и полиморфизмом ядер приводят к ошибочному диагнозу высокодифференцированного почечноклеточного светлоклеточного рака. Диагностике ангиомиолипомы помогает обнаружение сосудистых структур и веретенообразных клеток, экспрессирующих виментин, десмин, НМВ-45.

Хронический аутоиммунный тиреоидит типа Хашимото сопровождается образованием сосочковоподобных структур, к оценке которых необходимо подходить осторожно и помнить, что при этом процессе реактивные изменения эпителия можно ошибочно принять за папиллярный рак щитовидной железы. Для хронических дерматитов, язв характерны атипические реактивные разрастания многослойного плоского эпителия, нередко представляющие непреодолимые трудности в дифференциальной диагностике с высокодифференцированным плоскоклеточным раком.
Выраженные дистрофические изменения клеток являются также одной из причин ошибочной цитологической диагностики. Например, выраженная жировая дистрофия гепатоцитов может привести к гипердиагностике метастаза почечноклеточного светлоклеточного рака, особенно при уже состоявшемся диагнозе рака почки.

Большую проблему цитологии представляет дифференциальная диагностика различных степеней диспластических изменений эпителия и внутриэпителиального рака. Присутствие при тяжелой дисплазии полиморфных крупных клеток с большими неправильно округлыми ядрами, иногда с увеличенными ядрышками, двуядерных клеток с тяжистым рисунком хроматина может быть неверно расценено как рак. При диспластических изменениях плоского эпителия необходимо учесть, что большинство клеток сходны с клетками глубоких слоев, крупные атипические клетки находятся в тесной связи с клетками без признаков атипии, имеются клетки стромы. Для объективизации дифференциальной диагностики различных степеней дисплазии и внутриэпителиального рака желательно проведение морфометрии клеток и ядер, что позволяет значительно снизить процент ошибочных заключений.

Нередко причиной гипердиагностики метастатического поражения в лимфатических узлах являются комплексы клеток укрупненного эндотелия и гистиоцитов, образующих эпителиоподобные структуры, а также наличие макрофагов с содержанием бурого пигмента. При затруднениях диагностики помогает иммуноцитохимическое исследование с небольшим набором антител (VIII фактор, цитокератины, ЭМА, НМВ-45), позволяющее подтвердить или отвергнуть наличие метастазов рака или меланомы.

Во избежание ошибок морфологической диагностики большое значение имеет четкое указание на характер проведенного лечения. Например, прием довольно распространенного антибиотика тетрациклина приводит к накоплению в клетках щитовидной железы бурого пигмента и ошибочному диагнозу метастаза меланомы. Прием мерказолила при зобе сопровождается резким полиморфизмом фолликулярного эпителия, что служит причиной цитологической и даже гистологической гипердиагностики фолликулярного рака. Проведение лучевой терапии вызывает выраженные изменения не только опухолевых клеток, но и нормального эпителия: укрупнение, полиморфизм клеток, патологическое ороговение, что является причиной гипердиагностики рака.

Имеются и объективные диагностические проблемы, например, в дифференциальной диагностике между эндометриоидной высокодифференцированной аденокарциномой и атипической гиперплазией эндометрия, себоррейной (базальноклеточной) кератомой и базально-клеточным раком, инфекционным мононуклеозом и болезнью Ходжкина, где достаточно высокий процент ошибочных заключений и требуется дальнейшая разработка цитологических критериев диагностики.

Знание клинической картины, характера проведенного лечения, применение современных методик морфологической диагностики с использованием иммуноцитохимии и морфометрии способствует сведению случаев гипердиагностики к нулю.

Вместе с истинной цитологической гипердиагностикой существует ложная гипердиагностика, когда цитолог дает уверенное заключение о злокачественном процессе, а при гистологическом исследовании опухоли не обнаруживается, то есть фактически имеет место гистологическая гиподиагностика. Пересмотр цитологических препаратов несколькими высококвалифицированными специалистами, повторное взятие биопсии, клиническое течение заболевания в дальнейшем подтверждают результаты цитологического исследования. Больше всего ложной цитологической гипердиагностики относится к исследованию биопсийного материала из бронхов и гортани, а также при исследовании лимфатическиих узлов, когда при цитологическом исследовании выявлялись единичные комплексы анаплазированных клеток, несомненно принадлежащих раку. При приготовлении гистологических препаратов эти комплексы теряются в готовых гистологических препаратах. Реальная потеря немногочисленных опухолевых клеток при приготовлении гистологических препаратов не допускает игнорирования клиницистом данных цитологического исследования и приводит к «золотому» стандарту – совместному цитологическому и гистологическому исследованию биоптата.

Интраоперационная цитологическая диагностика – одно из основных направлений цитологического метода исследования. Во время операции, используя цитологический метод, уточняется характер патологического процесса, степень распространенности с выявлением метастазов в лимфатические узлы, печень и другие органы, производится контроль радикальности выполненной операции с исследованием краев резекции. Роль цитологии возрастает при разработке показаний к расширенным лимфоаденэктомиям и при определении так называемых «сторожевых», или «сигнальных», лимфатических узлов, которых может быть шесть, и применение гистологического метода невозможно из-за длительности исследования. По данным ведущих клиник, ошибка срочного гистологического исследования «сторожевых» лимфатических узлов составляет 25%, поэтому они рекомендуют использовать интраоперационное цитологическое исследование отпечатков с поверхности разрезанного лимфатического узла. По нашим данным, достоверность срочного цитологического исследования по выявлению метастатического поражения лимфатических узлов составляет 97-99%.

Надо отметить, что к срочному морфологическому исследованию могут быть противопоказания. Срочное интраоперационное морфологическое исследование не рекомендуется выполнять при подозрении на внутриэпителиальный рак с ограниченным очагом поражения из-за того, что не останется материала для планового гистологического исследования. Цитологические критерии внутриэпителиального рака только разрабатываются, и цитолог может дать заключение о раке, не указывая, что это Carcinoma in situ. При внутрипротоковых папилломах небольшого размера срочное гистологическое исследование лучше не выполнять, а цитологическое исследование достоверно поможет установить характер процесса.

При срочной морфологической диагностике существенно помогает макроскопическое исследование операционного материала. Опытный морфолог при визуальном исследовании уже может поставить диагноз, но для подтверждения диагноза необходимо микроскопическое исследование. Например, опухолевый узел классической звездчатой формы может быть при трех совершенно разных процессах: при раке, склерозирующем аденозе с центром Семба и липогранулеме. И только микроскопическое исследование позволяет правильно поставить диагноз.

Цитологический метод позволяет в динамике, не травмируя пациента, изучать лечебный патоморфоз при химиолучевой и фотодинамической терапии.

XX столетие названо в медицинских кругах веком цитопатологии. Оценивая возможности цитологического метода, можно сказать, что есть еще возможности его развития в комбинации с другими дисциплинами и методами.

Иммуноцитохимическое исследование нередко является решающим в дифференциальной диагностике новообразований, когда при рутинном исследовании возникают непреодолимые трудности для установления гистогенеза отдельных опухолей, определения источника метастазирования, трактовки первично-множественных поражений.

За последние годы достигнут огромный прогресс в клиническом использовании различных биологических маркеров. В отличие от сывороточных маркеров, клеточные маркеры определяются непосредственно в опухолевых клетках ИЦХ исследованием, в основе которого лежит реакция антиген-антитело. В их числе онкогены, рецепторы эстрогенов и прогестерона, молекулы, опосредующие апоптоз, рецепторы факторов роста и т. д. Все эти показатели позволяют более детально изучить молекулярно-биологические особенности опухолевых клеток, ассоциированные со степенью дифференцировки, способностью к инвазии и метастазированию, чувствительностью к химиотерапии, и, следовательно, с особенностями течения и прогнозом заболевания в каждом конкретном случае.

Специфических маркеров дифференциальной диагностики злокачественных и доброкачественных опухолевых процессов не существует, но на сегодняшний день активно ведутся научные изыскания в решении этой проблемы. Так, равномерное окрашивание герминативных центров лимфоидных фолликулов с использованием антител bcl-2 указывает на фолликулярную лимфосаркому, в то время как негативная реакция свидетельствует о доброкачественном гиперпластическом процессе; реакция с антителами HBME-1 при ИЦХ исследовании опухолей щитовидной железы часто положительная в злокачественных новообразованиях и практически отсутствует при доброкачественных, в дифференциальной диагностике широко применяют галектин-3, экспрессирующийся карциномами щитовидной железы из А-клеток (папиллярный, фолликулярный) с отсутствием экспрессии в фолликулярных аденомах, зобах и нормальной ткани щитовидной железы.

Для установления гистогенеза и дифференциальной диагностики опухолей разработаны и постоянно совершенствуются, схемы C.R.Taylor и R.J. Cote (1994 г.). Разнообразие моноклональных антител, используемых в иммуноцитохимических исследованиях тонкоигольных пунктатов, в каждом конкретном случае позволяет ответить на вопрос, имеет ли данная опухоль эпителиальное происхождение или является саркомой, меланомой, лимфомой. Иммуноцитохимия широко применяется для иммунофенотипирования злокачественных лимфом, без чего, по современным канонам, невозможно начать лечение.

Иммуноцитохимическое исследование помогает в определении источника метастазирования при невыявленном первичном очаге. К сожалению, органоспецифических маркеров не так уж и много. К их числу могут быть отнесены специфический антиген предстательной железы (ПСA), позволяющий идентифицировать метастазы рака простаты более чем в 95% случаев; тиреоглобулин, экспрессирующийся в 92–98% фолликулярного и папиллярного рака щитовидной железы, и кальцитонин, экпрессирующийся в 80% медуллярных раков щитовидной железы В некоторых случаях рак щитовидной железы может экспрессировать и кальцитонин, и тиреоглобулин, что только с помощью иммуноферментной диагностики позволяет диагностировать диморфные А-С-клеточные раки.

Одним из первых показателей, вошедших в практику лечения больных раком молочной железы (РМЖ), и относящихся к категории клеточных маркеров, были рецепторы стероидных гормонов. Рецепторы стероидных гормонов – это белки, специфически и избирательно связывающие соответствующие стероиды после их проникновения в клетку.

По данным ВОЗ (2003 г.), экспрессия рецепторов эстрогенов (РЭ+) и прогестерона (РП+) в инвазивных протоковых раках составляет 70-80%; инвазивный дольковый рак в 70-95% экспрессирует РЭ, в 60-70% -РП, 100% экспрессия РЭ отмечена в инвазивном криброзном, муцинозных опухолях молочной железы. Эдокринная терапия наиболее эффективна у больных с первичными опухолями с высоким уровнем рецепторов стероидов. При метастатических поражениях степень реакции на эндокринную терапию также зависит от наличия РЭ и РП в опухоли: её эффективность составляет около 10–15% при гормонотрицательных опухолях, 27% при опухоли с РЭ+ и РП-, 46% при статусе РЭ- и РП+ и 75% при опухолях, содержащих РЭ+ и РП+. Рецепторположительные опухоли молочной железы имеют более высокую дифференцировку и более благоприятный прогноз.

Необходимо отметить, что рецепторы гормонов в доброкачественных образованиях молочной железы еще мало изучены. Отмечено повышение числа РЭ+ клеток в нормальной ткани молочной железы с увеличением возраста, а также при склерозирующем аденозе, папилломах, фиброаденомах и листовидных опухолях. Коэкспрессия РЭ+/Ki-67+ с разной степенью выраженности и соотношения большей частью выявлялась в патологии, связанной с риском развития РМЖ.

Рецепторы эстрогенов экспрессируются в клетках рака эндометрия, яичников, шейки матки, щитовидной железы, кишечника, нейроэндокринных опухолей, в том числе карциноидов.

Иммуноцитохимическое исследование позволяет на дооперационном этапе установить важнейшие факторы прогноза опухолевого процесса и скоррегировать схемы лечения. Пролиферативная активность многих новообразований оценивается с помощью антител Ki-67 в злокачественных лимфомах, опухолях молочной, предстательной, поджелудочной железы, легких, гипофиза, толстой кишки. Обнаружена связь между значениями индекса пролиферации и степенью гистологической дифференцировки опухоли и клиническим прогнозом при раке эндометрия, яичников, легкого, молочной железы, мочевого пузыря, лимфомах, опухолях нервной системы.

Гиперэкспрессия онкопротеина C-erbB-2(HER2/neu), являющегося рецептором эпидермального фактора роста 2-го типа, придающего клеткам свойство неограниченного деления, служит фактором риска рецидива заболевания для ряда опухолей: рака молочной железы, толстой кишки, лёгкого и др. Экспрессия онкобелка C-erbB-2 при ИГХ исследовании обнаруживается в 15–40% РМЖ. Выявление онкопротеина C-erbB-2, по мнению некоторых авторов, ассоциируется с высокой степенью злокачественности опухоли, отсутствием РЭ и РП, высокой митотической активностью, устойчивостью к химиотерапии и требует назначение герцептина.

Наличие метастазов в лимфатических узлах при опухолевом поражении является главным дискриминирующим прогностическим признаком. С помощью иммуноцитохимического исследования можно выявить единичные циркулирующие кератин-положительные клетки РМЖ в костном мозге и периферической крови. Применение ИЦХ исследования повышает выявляемость микрометастазов в лимфатических узлах на 3,2–24%.

Иммуноцитохимические реакции оцениваются как качественно при уточнении гистогенеза опухоли, наличии метастаза в лимфатическом узле или другом органе, иммунофенотипировании лимфом, так и количественно – при оценке пролиферативной активности, экспрессии рецепторов гормонов в опухоли, онкопротеина С-erbB-2 и т.д. Иммуноцитохимическая реакция может быть ядерной, цитоплазменной и мембранной. Ядерная реакция проявляется интенсивным окрашиванием ядра и бывает при определении РЭ и РП, Ki–67, PCNA, p53 и т.д. Цитоплазменная реакция характеризуется диффузным окрашиванием цитоплазмы или отложением гранул в виде грубых пятен и зерен. Цитоплазменное окрашивание дают хромогранин, синаптофизин, белок S-100, виментин, десмин, тиреоглобулин, кальцитонин, цитокератины, bcl-2 и т.д. Оценка этой реакции требует большой осторожности и контроля, так как фоновое окрашивание цитоплазмы клеток может быть принято за истинную реакцию. Мембранное окрашивание наблюдается при проведении реакции с онкопротеином C-erbB-2 и ЭМА (эпителиальным мембранным антигеном). Окрашивание в таких случаях только цитоплазмы не должно учитываться как экспрессия антигена. Маркер крупноклеточной анаплазированной лимфомы CD-30 может экспрессироваться как в цитоплазме, так и на мембране клетки.

Для количественной оценки экспрессии маркера Мс. Carthy и соавторы разработали систему подсчета Histo score (H.S.). Система подсчета включает интенсивность иммуноцитохимической окраски, оцениваемую по 4-балльной шкале, и долю окрашенных клеток и представляет собой сумму произведений процентов, отражающих долю клеток с различной интенсивностью окраски на балл, соответствующий интенсивности реакции. Интенсивность окраски в баллах: 0 – нет окрашивания, 1 – слабое окрашивание, 2 – умеренное окрашивание, 3 – сильное, 4 – очень сильное окрашивание. Формула подсчета:

Histochemical score = ∑ P(i)×i (гистосчет),

где i – интенсивность окрашивания, выраженная в баллах от 0 – 4,

Р(i) – процент клеток, окрашенных с разной интенсивностью.

Максимальное количество Histo score соответственно должно быть 400. Подсчет проводится в трех когортах по 100 опухолевых клеток в различных полях зрения (объектив х 40).

В практической работе допустимо использование полуколичественной оценки. Реакция считается отрицательной при полном отсутствии или экспрессии антигена менее 5%–10% опухолевых клеток, слабоположительной – от 5%–10% до 24% клеток, умеренно положительной – в 25%–75%, выраженной – более чем в 75% клеток. При оценке иммуноферментной реакции принимают во внимание интенсивность и полноту окрашивания цитолеммы клеток в центре опухолевого очага. Так, яркая, мембранная, беспрерывная по контуру клетки реакция обозначает выраженную экспрессию белка С-erbB-2 (+++), что в 95% случаев подтверждается амплификацией гена С-erbB-2, выявляемой с помощью FISH (флуоресцентной гибридизацией in situ).

Сопоставляя данные иммуноцитохимических исследований различных опухолей с целью уточнения гистогенетической принадлежности и результатов послеоперационных морфологических заключений, получены следующие результаты: 89% совпадений при анализе опухолей щитовидной железы, 83% при уточнении гистогенеза первичной опухоли и метастазах в лимфатических узлах, 89% – при опухолях мягких тканей и кожи и 100% – при исследовании биологических жидкостей. При определении гормонального статуса РМЖ процент совпадения ИЦХ и ИГХ исследований составляет 88,3%, при исследовании пролиферативной активности – 83%, при определении онкопротеина C-erbB-2 – 93,2%.

При сравнении возможностей ИЦХ исследования при выполнении пункционной биопсии и ИГХ исследования при трепанобиопсии преимущества ИЦХ, на наш взгляд, несомненны. Пункционная биопсия – более простая процедура, не сопровождается такими осложнениями, как воспаление, кровотечение, и позволяет получить полноценный клеточный материал. При неудачной пункции и попадании в некроз, строму опухоли, окружающие ткани можно практически безболезненно повторить процедуру. Кроме того, отсутствует потеря и маскировка антигенов при проводке и депарафинизации материала с использованием агрессивных химических реагентов.

Использование иммуноцитохимического исследования позволяет расширить возможности морфологических методов и на дооперационном этапе уточнить гистогенез, диагностировать первично-множественные поражения, степень распространения и оценить некоторые показатели прогноза и чувствительность опухоли к химиогормонотерапии.

На современном этапе развития в цитологии используются методы молекулярной и генной диагностики: гибридизация in situ, Southern Blotting, Nothern Blooting, Western Blotting, DNK Microarray и т.д) В научной и практической работе цитологи применяют проточную цитофотометрию.

Одним из путей совершенствования цитологического метода исследования является применение морфометрии, что позволяет получать объективные количественные параметры. Например, при обработке на компьютере выделены наиболее информативные морфометрические признаки, относящиеся к параметрам ядра с использованием основных диагностических морфометрических признаков: площадь, периметр, оптической плотности, коэффициент поляризации ядер, числа ядрышек, их площади и периметра. Разработаны объективные морфометрические признаки различных степеней дисплазии при дисгормонально-гиперпластических процессах молочной железы, шейки матки, что уменьшило долю субъективизма в определении различных степеней дисплазии.

Развиваются новые методы микроскопии: фазово-контрастная, флюоресцентная, конфокальная и т.д. Создание компьютерных систем обучения, развитие метода телеконсультации также предъявляют новые требования и, несомненно, будут способствовать развитию и совершенствованию цитологического метода диагностики.

Волченко Надежда Николаевна

д.м.н., профессор, руководитель отделения
онкоцитологии МНИОИ им.П.А.Герцена

Сравнение цитологических и гистопатологических данных и роль иммунных красителей в диагностике опухолей мягких тканей

J Cytol. 2012 апрель-июнь; 29 (2): 125–130.

Шахам Бег

Отделение патологии, J.N. Медицинский колледж, Мусульманский университет Алигарха, Алигарх, Уттар-Прадеш, Индия

Шайста М. Васенвала

Кафедра патологии, J.N. Медицинский колледж, Мусульманский университет Алигарха, Алигарх, Уттар-Прадеш, Индия

Назима Хайдер

Кафедра патологии, J.N. Медицинский колледж, Мусульманский университет Алигарха, Алигарх, Уттар-Прадеш, Индия

S Shamshad Ahmad

Кафедра патологии, J.N. Медицинский колледж, Мусульманский университет Алигарха, Алигарх, Уттар-Прадеш, Индия

Вина Махешвари

Кафедра патологии, J.N. Медицинский колледж, Мусульманский университет Алигарха, Алигарх, Уттар-Прадеш, Индия

MA Khan

¹ Отделение хирургии, J.N. Медицинский колледж, Мусульманский университет Алигарха, Алигарх, Уттар-Прадеш, Индия

Кафедра патологии, J.Медицинский колледж Н., Мусульманский университет Алигарха, Алигарх, Уттар-Прадеш, Индия

¹ Отделение хирургии, J.N. Медицинский колледж, Мусульманский университет Алигарха, Алигарх, Уттар-Прадеш, Индия

Адрес для переписки: Проф. Шайста М. Васенвала, кафедра патологии, Медицинский колледж Джавахарлала Неру, AMU, Алигарх, Уттар-Прадеш — 202002, Индия. Электронная почта: moc.liamffider@vmyhs

Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями Creative Commons Attribution-Noncommercial-Share Alike 3.0 Unported, что разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии правильного цитирования оригинальной работы.

Эта статья цитируется в других статьях в PMC.

Abstract

Предпосылки:

Тонкоигольная аспирационная цитология (FNAC) использовалась как полезный метод для начальной диагностики опухолей мягких тканей (STT), а также для выявления рецидивов и метастатических случаев.

Цель:

Мы провели это исследование опухолей мягких тканей, чтобы определить эффективность FNAC и завершить гистологический диагноз с помощью иммуноокрашивания.

Материалы и методы:

Настоящее исследование проведено на 126 пациентах с опухолями мягких тканей. FNAC и гистопатология были выполнены во всех случаях.

Результаты:

Сто пять случаев (83,3%) были диагностированы как доброкачественные и 21 случай (16,7%) как злокачественные. На FNAC опухоли были разделены на шесть цитоморфологических категорий: липоматозные, веретено-клеточные, круглоклеточные, миксоидные, плеоморфные и сосудистые опухоли. Семнадцать случаев были безрезультатными при цитологическом исследовании. В пяти случаях тип злокачественного новообразования был изменен при гистологическом исследовании.Было три ложноположительных и два ложноотрицательных случая, что дало положительную прогностическую ценность 97,2% с точки зрения злокачественности, чувствительность 98,1% и специфичность 96,7%.

Выводы:

FNAC играет определенную роль в формировании первоначального диагноза STT, в то время как гистопатология с помощью иммуномаркеров обеспечивает окончательный диагноз.

Ключевые слова: Тонкоигольная аспирационная цитология, иммуноокрашивание, опухоли мягких тканей

Введение

Опухоли мягких тканей (STT) не очень распространены.Соотношение доброкачественных и злокачественных STT составляет 100: 1. В Соединенных Штатах саркомы диагностируются как 0,8% инвазивных злокачественных новообразований в год и являются причиной 2% смертей от рака [1]. Саркомы составляют 7-15% детских злокачественных новообразований на первом году жизни [2]. Заболеваемость STT трудно оценить, потому что не все доброкачественные STT проходят биопсию. Клетки происхождения различны, поэтому диагностика STT временами затруднена. Аспирационная цитология с тонкой иглой (FNAC) использовалась как полезный метод для первоначальной диагностики STT, а также для выявления рецидивирующих и метастатических случаев.[3] Классификация STT рассматривается как категориальная система, которая имеет возможные прогностические возможности. [4–6] Мы провели это исследование на опухолях мягких тканей, чтобы определить эффективность FNAC и завершить гистологический диагноз с помощью иммуноокрашивания.

Материалы и методы

Настоящее исследование проводилось на 126 пациентах с опухолями мягких тканей в течение 18 месяцев. Во всех случаях проводились FNAC и гистопатологическое исследование STT. FNAC контролировался ультразвуком в четырех случаях с опухолью в брюшной полости.Мазки окрашивали мазками Папаниколау (Пап) и гематоксилином и эозином (H и E) [7]. Парафиновые срезы хирургически резецированных образцов окрашивали H и E, ретикулином (Reti), ван Гизоном (VG), периодической кислотой Шиффа (PAS) и гематоксилином фосфорновольфрамовой кислоты (PTAH). [8] Иммуногистохимия (ИГХ) на парафиновых срезах проведена в 23 случаях. Иммуноокрашивания включали виментин (Vim), десмин (Des), миозин (Myo), S100, цитокератин (CK), синаптофизин (Syn), CD34 и общий антиген лейкоцитов (LCA).[8]

Результаты

Сто двадцать шесть случаев STT были классифицированы согласно цитологическому и гистологическому диагнозу. По гистологии 105 случаев (83,3%) были диагностированы как доброкачественные и 21 случай (16,7%) как злокачественные.

Относительная частота STT составила 0,26 / 1000 / год. Большая часть STT, то есть 115 случаев (91,2%), были распределены между 1-м и 5-м десятилетиями []. Из 126 случаев 81 случай (64,3%) приходился на мужчин и 45 случаев (35,7%) на женщин с соотношением M: F 1,8: 1. Доброкачественный STT произошел в 65 (61.9%) мужчин и 40 (38,1%) женщин с соотношением M: F 1,6: 1. Злокачественные STT наблюдались у 15 (71,4%) мужчин и 6 (28,6%) женщин, что дало соотношение M: F 2,5: 1. Таким образом, злокачественные СТТ чаще встречались у мужчин.

Таблица 1

Распределение случаев STT по возрасту по десятилетиям

Максимальное количество доброкачественных STT, т.е. 43 случая (40,9%), наблюдалось в конечностях, за которыми следовали голова и шея, 37 случаев (35,3%) []. Большинство из них были липомы и гемангиомы. Злокачественные новообразования чаще встречались в нижних конечностях — девять случаев (42.8%) и брюшной полости — семь случаев (33,3%). Наиболее частыми злокачественными опухолями нижних конечностей были липосаркомы и фибросаркомы, а в брюшной полости — лейомиосаркомы. Два случая STT с участием нескольких участков были по одному случаю фибромы и нейрофибромы. Размер доброкачественных и злокачественных STT варьировался от 0,3 до 20 см и 2-15 см, соответственно, без большой разницы в размерах.

Таблица 2

Распределение случаев STT по сайту

По мазкам FNAC 104 случая (82.5%) были доброкачественными и 22 случая (17,5%) злокачественными.

Среди шести цитоморфологических категорий было 42 случая (33,3%) липоматозных опухолей, 34 случая (27,0%) веретеноклеточных опухолей, 6 случаев (4,7%) круглоклеточных опухолей, 5 случаев (4,0%) миксоидных опухолей. опухоли, 1 случай (0,79%) плеоморфной опухоли и 21 случай (16,7%) сосудистых опухолей [].

Таблица 3

Сравнение цитологического и гистопатологического диагноза STT

Семнадцать случаев (13,4%), которые не дали результатов при цитологическом исследовании, оказались доброкачественными в 15 случаях, как липома (8 случаев), фиброма (1 случай), шваннома (3 случая), гемангиома (3 случая) и злокачественная в 2 случаях как лейомиосаркома (1 случай) и плеоморфная липосаркома (1 случай) по гистологии [].

Таблица 4

Гистопатологическая диагностика опухолей мягких тканей (n = 126)

При цитологической диагностике [] из 42 липоматозных опухолей 40 были диагностированы как доброкачественные и 2 как злокачественные. Восемь случаев, которые не дали окончательных результатов при цитологии, оказались липомой при гистологии, в то время как 1 неубедительный случай был зарегистрирован как плеоморфная липосаркома (S100 +) при гистологии. Один случай хорошо дифференцированной атипичной липоматозной опухоли был ошибочно зарегистрирован как доброкачественная липоматозная опухоль при цитологии из-за отсутствия липобластов.Таким образом, при окончательном гистологическом диагнозе было 47 доброкачественных и 4 злокачественных липоматозных опухоли [].

Плеоморфная липосаркома (a) Мультивакуолизированные липоциты, большие гиперхромные ядра, с отступом от цитоплазматических вакуолей (FNAC, H и E, × 400) (b) Клетки цветков и злокачественные липоциты (Histo., H и E, × 400)

Следующей по величине категорией по цитологии были веретено-клеточные опухоли из 34 (24 доброкачественных и 10 злокачественных) случаев. По гистологии было зарегистрировано 43 случая (32 доброкачественных и 11 злокачественных), которые далее подразделены на опухоли фибробластов [] и миофибробластов (11 случаев), фиброгистиоцитарные опухоли (10 случаев), опухоли периферических нервов [] (13 случаев), опухоли. гладкой мускулатуры (6 случаев) и синовиальной саркомы (3 случая).Из этих 43 случаев 5 случаев, не дающих результатов по цитологии, были диагностированы гистологически как шваннома (3 случая), фиброма (1 случай) и 1 случай лейомиосаркомы (reti, VG, Vim +). Изменение цитологического диагноза при биопсии включало 1 случай злокачественной фиброзной гистиоцитомы (MFH) в доброкачественную фиброзную гистиоцитому (BFH). Один случай синовиальной саркомы был диагностирован как доброкачественная веретеноклеточная опухоль из-за наличия веретенообразных клеток и крови в мазках. При гистологии он показал инфильтрирующие края, структуру гемангиоперицитомы и злокачественных веретеновидных клеток с митозом [].Мы обнаружили, что наиболее частыми злокачественными STT были опухоли веретенообразных клеток (11 случаев).

Фибросаркома (a) Высокая клеточность, злокачественные клетки, образующие структуру костей сельди (Hist., H и E, × 400) (b) клеточный мазок, пучки злокачественных веретенообразных клеток (FNAC, H и E, × 400) (c) Vim + (d) VG +

Schwannoma (a) Неплотно расположенные веретенообразные везикулярные ядра с заостренными концами, фибриллярная строма (FNAC, H и E, × 400) (b) Палисадные ядра веретена, тельца верокая (Histo., H и E) , × 200)

Синовиальная саркома (a) Клеточный мазок, округлые до ядер веретена, геморрагический фон (FNAC, H и E, × 400) (b) Щелевидные сосудистые пространства, окруженные клетками с толстой ядерной мембраной и высокой скоростью митоза ( Histo., H и E, × 400) (c) Vim + (d) CD 34 +

Все шесть случаев круглоклеточных опухолей (РКИ) были диагностированы как злокачественные при цитологии. По гистологии это были саркома Юинга / PNET (3 случая), которые были PAS +, Syn +, S100 +, LCA –ve [], детская рабдомиосаркома (1 случай), которая была PAS + и миозин +. Два случая РКИ с однородными круглыми ядрами были диагностированы как доброкачественные новообразования при гистологии, как гломус-опухоль и параганглиома, по 1 случаю.

Ewing’s / PNET (a) Клеточный мазок, рыхлые агрегаты круглых клеток, несколько розеток, мелкозернистый хроматин, минимальная цитоплазма (FNAC, H и E, × 400) (b) Syn + (c) LCA — ve

Из пяти (четыре доброкачественных и 1 злокачественная) миксоидных опухолей по цитологии, четыре случая, в которых был обнаружен миксоидный материал с веретеновыми клетками, были нейрофибромами по гистологическому исследованию.Одним из случаев, когда цитология показала большое количество миксоидного материала со злокачественными веретеновидными клетками, была миксофибросаркома на гистологическом исследовании.

Единственный случай, в котором при цитологическом исследовании был поставлен диагноз плеоморфной опухоли, по гистологии оказался эпителиоидной саркомой (Vim +, CK +, Des –ve, PTAH –ve) [].

Эпителиоидная саркома (a) Причудливая большая плеоморфная клетка. (FNAC, H и E, × 400) (b) Плоские клетки, переходящие в клетки веретена, злокачественные ядра (Histo., H и E, × 400) (c) Группа плоских клеток с индивидуальной сетью ретикулина (Reti, × 400) (d) CK + (e) Vim +

Из 25 сосудистых опухолей по гистологии было 20 случаев гемангиомы и 1 случай лимфангиомы, диагностированных в основном на основании истории болезни и обследования, поскольку FNAC показал только кровь и лимфу, соответственно, с несколькими эндотелиальные клетки в редких случаях.Три случая гемангиомы оказались безрезультатными при цитологическом исследовании. Диагноз гломус-опухоли как круглоклеточной опухоли (1 случай) при цитологическом исследовании скорректирован по гистологии.

На основе FNAC можно было правильно диагностировать 104 случая (истинно положительных), из которых 87 были доброкачественными, а 17 — злокачественными. Было зарегистрировано три ложноположительных случая, которые были доброкачественными и были диагностированы как злокачественные, и два ложноотрицательных случая, которые были диагностированы как доброкачественные при цитологическом исследовании, и 17 неубедительных случаев были диагностированы правильно при гистологическом исследовании.Пять случаев злокачественного новообразования были диагностированы как другое злокачественное новообразование при цитологии [Таблицы и].

Таблица 5

Дискордантный диагноз (N = 2 + 3 + 5 = 10)

Гистопатологическое подтверждение доброкачественной и злокачественной STT дало положительную прогностическую ценность 97,2% с точки зрения злокачественности, чувствительности 98,1% и специфичности 96,7%.

Обсуждение

Применение FNAC привело к достаточно точной диагностике различных типов опухолей мягких тканей в различных частях тела.Сложная неоднородность — сложный фактор в диагностике STT.

Это исследование проводилось на 126 пациентах с опухолями мягких тканей. Сто пять случаев (83,3%) были доброкачественными и 21 (16,7%) злокачественными. Для постановки окончательного диагноза в 23 случаях была проведена ИГХ. Результаты сопоставимы с отчетами других авторов. Bezabih [9] обнаружил 82,8% случаев (516/623) как доброкачественные и 17,2% (107/623) как злокачественные. Dey и др. . [10] обнаружили 83,7% (1135/1356) случаев доброкачественных и 16 случаев.3% (221/1356) случаев злокачественного СТТ.

Большинство случаев STT в нашем исследовании были распределены между 1-м и 5-м десятилетиями, 115 случаев (91,2%). Девяносто шесть случаев (91,4%) доброкачественной STT и 19 случаев (90,4%) злокачественной STT также наблюдались в том же диапазоне. Nagira и др. . [11] в своем исследовании 279 случаев STT сообщили о среднем возрасте 48 лет, в то время как Bezabih [9] обнаружил, что наиболее распространенной возрастной группой для доброкачественных опухолей являются 4-е и 5-е десятилетия, а для злокачественных опухолей — 1-е. и 2-е десятилетия.

Мы зарегистрировали максимальное количество STT в конечностях, 53 случая (42.1%). Другие авторы, такие как Bezabih [9] и Nagira и др. [11], также обнаружили, что нижняя конечность является наиболее частым местом STT, за которым следует верхняя конечность.

Как и в нашем исследовании, Bezabih [9] также сообщил о липоме (70,5%) как о наиболее частом доброкачественном STT и веретено-клеточной опухоли как о наиболее частом злокачественном STT (63,6%). Bennert и др. [12] в своем исследовании 117 пациентов обнаружили липому (69%) как наиболее частую доброкачественную STT и MFH (27%) как наиболее частую злокачественную STT, за которой следует липосаркома (13.5%) при биопсии стержневой иглой. Nagira и др. . [11] сообщили о наиболее частом доброкачественном STT в виде веретенообразных клеток (31,5%), за которым следует липоматозная опухоль (14,6%), в то время как наиболее частым злокачественным STT в их исследовании были плеоморфные клетки (35%), за которыми следовали раунды. клеточная опухоль (19,3%).

Цитологические данные аспирационных мазков вместе с клинико-рентгенологическими данными помогают в постановке диагноза. Обе цитологические детали, включая типы клеток, липоматозные, веретенообразные, круглые или плеоморфные, и фоновый материал, такой как липоматозные, миксоидные или метахроматические фрагменты стромы, являются индикаторами типа STT на FNAC.Мы использовали аналогичный подход при выделении подтипов STT по цитологии. [3,9–12]

В нашем исследовании семнадцать случаев были признаны неубедительными по FNAC. Было 10 несогласованных случаев. Один случай хорошо дифференцированной липосаркомы был диагностирован как доброкачественное липоматозное поражение, поскольку было аспирировано только несколько пенистых клеток, напоминающих зрелые липоциты. Один случай синовиальной саркомы был отмечен как доброкачественная веретеновидная опухоль из-за присутствия в мазке всего нескольких веретеновидных клеток и крови. Опухоль при гистопатологии показала инфильтрирующие края и образец гемангиоперицитомы с щелевидными сосудистыми пространствами, выстланными эндотелием, равномерно распределенными по слоям клеток.Клетки были пухлыми до веретена с гиперхроматическими круглыми ядрами. Митоз составил 5/10 HPF. Опухоль была CD 34+ и Vim +. С другой стороны, один случай BFH был ошибочно обозначен как MFH из-за большого размера опухоли 10 см и, по-видимому, гиперхроматических веретенообразных клеток в расположении колеса тележки. При гистологическом исследовании опухоль ограничена, ядра доброкачественные, митоз не выявлен. Некроза или миксоидных изменений не было. Таким образом, ему был поставлен диагноз BFH. Опухоль Glomus и параганглиома были помечены как злокачественные круглоклеточные опухоли в мазках FNAC, поскольку они выглядели как скопления круглых темных ядер в мазках, свидетельствующих о злокачественности.При гистологии гломус-опухоль показала хорошо очерченную опухоль размером 1,5 см с хорошо разграниченными гнездами однородных круглых ядер с минимальной цитоплазмой (CD 34 +), разделенными фиброзными перегородками. Параганглиома показала расположение клеточного шара из опухолевых клеток (Syn +), разделенных тонкими васкуляризованными перегородками и неинфильтрирующими краями опухоли.

В пяти случаях злокачественного новообразования при цитологическом исследовании был изменен на другой тип злокачественного новообразования при гистопатологическом исследовании. Четыре из них были круглоклеточными опухолями, для окончательной диагностики которых требовались иммуномаркеры.Они включали инфантильную рабдомиосаркому (PAS +, Myo +) (1 случай) и PNET (PAS +, Syn +, S100 +) (3 случая). Один случай эпителиоидной саркомы был помечен цитологическим исследованием как плеоморфная саркома, поскольку мазок показал плеоморфные клетки и отсутствие плоских эпителиальных и веретенообразных клеток. Гистопатология показала, что плоские эпителиальные клетки меняются на клетки веретена, злокачественные ядра с ядрышками и повышенный и атипичный митоз. Сеть ретикулина могла быть продемонстрирована вокруг каждой клетки без образования каких-либо органоидов. Ячейки были Vim + и CK +.

Иммуномаркеры использовались в 23 случаях, что помогло подтвердить диагноз, особенно при круглоклеточных и веретеноклеточных опухолях.

В нашем исследовании было 3 случая FP, 2 случая FN и 17 неубедительных случаев на FNAC, что дало положительную прогностическую ценность 97,2% с точки зрения злокачественности, чувствительность 98,1% и специфичность 96,7%. Исследование 517 аспиратов STT, проведенное Акерманом и др. . [13] выявило 2,9% ложноположительных результатов, последующие исследования Wakely и др. , [14] и Килпатрик и др. [15] дали единичный случай ложной отрицательности и нулевой ложной положительности.Это контрастировало с исследованием Нагира и др. [11], которые выявили более высокие показатели ложноположительности и ложноотрицательности со специфичностью 92% и чувствительностью 97%. Wakely et al , [14] сообщили о 100% чувствительности и 97% специфичности диагностики STT с помощью FNAC. Layfield и др. , [16] достигли 95% чувствительности и специфичности при работе с этими поражениями.

Таким образом, мы заключаем, что FNAC играет определенную роль в формировании первоначального диагноза STT, в то время как гистопатология с помощью иммуномаркеров обеспечивает окончательный диагноз, ведущий к эффективному лечению с учетом поведения опухоли.

Сноски

Источник поддержки: Нет

Конфликт интересов: Не объявлен.

Список литературы

1. Розенберг А.Е. Опухоли костей, суставов и мягких тканей. В: Кумар В., Аббас А.К., Фаусто Н., редакторы. Патологические основы болезни Роббинса и Котрана. 7-е изд. Нью-Дели: Сондерс, Эльзевир; 2004. с. 1316. [Google Scholar] 2. Орбах Д., Рей А., Оберлин А., де Толедо Дж. Санчес, Терьер-Лакомб М.Дж., ван Унник А. и др. Саркома мягких тканей или злокачественные мезенхимальные опухоли на первом году жизни: опыт Международного общества детской онкологии (SIOP), Комитета по злокачественным мезенхимальным опухолям.J Clin Oncol. 2005; 23: 4363–71. [PubMed] [Google Scholar] 3. Rekhi B, Gorad BD, Kakade AC, Chinoy R. Сфера применения FNAC в диагностике опухолей мягких тканей — исследование, проведенное специализированным центром по лечению рака в Индии. CytoJournal. 2007; 4:20. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 4. Coindre JM. Классификация сарком мягких тканей: обзор и обновление. Arch Pathol Lab Med. 2006; 130: 1448–53. [PubMed] [Google Scholar] 5. Палмер Х.Э., Мукунядзи П., Калберт В., Томас-младший. Подгруппирование и классификация сарком мягких тканей с помощью тонкоигольной аспирационной цитологии: исследование гистопатологической корреляции.Diagn Cytopathol. 2001; 24: 307–16. [PubMed] [Google Scholar] 6. Дженсон О.М., Хог Дж., Остгаард С.Е., Нордентофт А.М., Снеппен О. Гистопатологическая классификация опухолей мягких тканей: прогностическое значение в проспективном исследовании 278 последовательных случаев. J Pathol. 1991; 163: 19–24. [PubMed] [Google Scholar] 7. Тюки CE. В кн .: Диагностическая цитология и ее гистопатологические основы. 5-е изд. Косс С., Косс Л.Г., Метамед М.Р., редакторы. Нью-Йорк: Липпинкотт; 2005. С. 1569–634. [Google Scholar] 8. Бэнкрофт Дж., Андерсон Г. В: Теория и практика гистологических методов.5-е изд. Бэнкрофт Дж. Д., Гэмбл М., редакторы. Филадельфия: Черчил Ливингстон; 2003. С. 85–108. [Google Scholar] 9. Безабих М. Цитологическая диагностика опухолей мягких тканей. Патолог. 2007: 368–76. С: 28. [PubMed] [Google Scholar] 10. Дей П., Маллик МК, Гупта С.К., Васишта РК. Роль тонкоигольной аспирационной цитологии в диагностике опухолей мягких тканей и опухолевидных поражений. Diagn Cytopathol. 1996; 15: 23–32. [Google Scholar] 11. Нагира К., Ямамото Т., Акисуе Т., Маруи Т., Хитора Т., Накатани Т. и др. Надежность тонкоигольной аспирационной биопсии в первичной диагностике поражения мягких тканей.Diagn Cytopathol. 2002. 27: 354–61. [PubMed] [Google Scholar] 12. Беннерт К.В., Абдул Карим Ф.В. Аспирация тонкой иглой по сравнению с биопсией с помощью стержневой иглы опухолей мягких тканей. Сравнение. Acta Cytol. 1994; 38: 381–4. [PubMed] [Google Scholar] 13. Акерман М, Ридхольм А, Перссон БМ. Аспирационная цитология опухолей мягких тканей. 10-летний опыт работы в онко-ортопедическом центре. Цитопатология. 2007; 18: 234–40. [PubMed] [Google Scholar] 14. Wakely PE, Kneisl JS. Цитопатология аспирационной аспирации мягких тканей. Рак. 2000; 90: 292–8.[PubMed] [Google Scholar] 15. Килпатрик С.Е., Гейзингер КР. Саркомы мягких тканей: полезность и ограничения тонкоигольной аспирационной биопсии. Am J Clin Pathol. 1998. 110: 50–68. [PubMed] [Google Scholar] 16. Лейфилд Л.Дж., Андерс К.Х., Глазго Б.Дж., Мира Дж.М. Тонкоигольная аспирация первичных опухолей мягких тканей. Arch Pathol Lab Med. 1986; 110: 420–4. [PubMed] [Google Scholar]

Сравнение цитологических и гистопатологических данных и роли иммуноокрашивания в диагностике опухолей мягких тканей

J Cytol.2012 апрель-июнь; 29 (2): 125–130.

Шахам Бег

Отделение патологии, J.N. Медицинский колледж, Мусульманский университет Алигарха, Алигарх, Уттар-Прадеш, Индия

Шайста М. Васенвала

Кафедра патологии, J.N. Медицинский колледж, Мусульманский университет Алигарха, Алигарх, Уттар-Прадеш, Индия

Назима Хайдер

Кафедра патологии, J.N. Медицинский колледж, Мусульманский университет Алигарха, Алигарх, Уттар-Прадеш, Индия

S Shamshad Ahmad

Кафедра патологии, J.N. Медицинский колледж, Мусульманский университет Алигарха, Алигарх, Уттар-Прадеш, Индия

Вина Махешвари

Кафедра патологии, J.N. Медицинский колледж, Мусульманский университет Алигарха, Алигарх, Уттар-Прадеш, Индия

MA Khan

¹ Отделение хирургии, J.N. Медицинский колледж, Мусульманский университет Алигарха, Алигарх, Уттар-Прадеш, Индия

Кафедра патологии, J.N. Медицинский колледж, Мусульманский университет Алигарха, Алигарх, Уттар-Прадеш, Индия

¹ Отделение хирургии, J.N. Медицинский колледж, Мусульманский университет Алигарх, Алигарх, Уттар-Прадеш, Индия

Адрес для переписки: Проф. Шайста М. Васенвала, кафедра патологии, Медицинский колледж Джавахарлала Неру, AMU, Алигарх, Уттар-Прадеш — 202002, Индия. Электронная почта: moc.liamffider@vmyhs

Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями Creative Commons Attribution-Noncommercial-Share Alike 3.0 Unported, что разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии наличия оригинала. работа правильно процитирована.

Эта статья цитируется в других статьях в PMC.

Abstract

Предпосылки:

Тонкоигольная аспирационная цитология (FNAC) использовалась как полезный метод для начальной диагностики опухолей мягких тканей (STT), а также для выявления рецидивов и метастатических случаев.

Цель:

Мы провели это исследование опухолей мягких тканей, чтобы определить эффективность FNAC и завершить гистологический диагноз с помощью иммуноокрашивания.

Материалы и методы:

Настоящее исследование проведено на 126 пациентах с опухолями мягких тканей.FNAC и гистопатология были выполнены во всех случаях.

Результаты:

Сто пять случаев (83,3%) были диагностированы как доброкачественные и 21 случай (16,7%) как злокачественные. На FNAC опухоли были разделены на шесть цитоморфологических категорий: липоматозные, веретено-клеточные, круглоклеточные, миксоидные, плеоморфные и сосудистые опухоли. Семнадцать случаев были безрезультатными при цитологическом исследовании. В пяти случаях тип злокачественного новообразования был изменен при гистологическом исследовании. Было три ложноположительных и два ложноотрицательных случая, что дало положительную прогностическую ценность 97.2% с точки зрения злокачественности, чувствительность 98,1% и специфичность 96,7%.

Выводы:

FNAC играет определенную роль в формировании первоначального диагноза STT, в то время как гистопатология с помощью иммуномаркеров обеспечивает окончательный диагноз.

Ключевые слова: Тонкоигольная аспирационная цитология, иммуноокрашивание, опухоли мягких тканей

Введение

Опухоли мягких тканей (STT) не очень распространены. Соотношение доброкачественных и злокачественных STT составляет 100: 1. В США саркомы диагностируются как 0.8% инвазивных злокачественных новообразований в год и являются причиной 2% смертей от рака. [1] Саркомы составляют 7-15% детских злокачественных новообразований на первом году жизни [2]. Заболеваемость STT трудно оценить, потому что не все доброкачественные STT проходят биопсию. Клетки происхождения различны, поэтому диагностика STT временами затруднена. Аспирационная цитология с тонкой иглой (FNAC) использовалась как полезный метод для первоначальной диагностики STT, а также для выявления рецидивирующих и метастатических случаев [3]. Оценка STT рассматривается как категориальная система с возможными прогностическими возможностями.[4–6] Мы провели это исследование опухолей мягких тканей, чтобы выяснить эффективность FNAC и завершить гистологический диагноз с помощью иммуноокрашивания.

Материалы и методы

Настоящее исследование проводилось на 126 пациентах с опухолями мягких тканей в течение 18 месяцев. Во всех случаях проводились FNAC и гистопатологическое исследование STT. FNAC контролировался ультразвуком в четырех случаях с опухолью в брюшной полости. Мазки окрашивали красителями Папаниколау (Пап) и гематоксилином и эозином (H и E).[7] Парафиновые срезы хирургически удаленных образцов окрашивали H и E, ретикулином (Reti), ван Гизоном (VG), периодической кислотой Шиффа (PAS) и гематоксилином фосфорновольфрамовой кислоты (PTAH). [8] Иммуногистохимия (ИГХ) на парафиновых срезах проведена в 23 случаях. Иммуноокрашивания включали виментин (Vim), десмин (Des), миозин (Myo), S100, цитокератин (CK), синаптофизин (Syn), CD34 и общий антиген лейкоцитов (LCA) [8].

Результаты

Сто двадцать шесть случаев STT были классифицированы согласно цитологическому и гистологическому диагнозу.По гистологии 105 случаев (83,3%) были диагностированы как доброкачественные и 21 случай (16,7%) как злокачественные.

Относительная частота STT составила 0,26 / 1000 / год. Большая часть STT, то есть 115 случаев (91,2%), были распределены между 1-м и 5-м десятилетиями []. Из 126 случаев 81 случай (64,3%) приходился на мужчин и 45 случаев (35,7%) на женщин с соотношением M: F 1,8: 1. Доброкачественная STT возникла у 65 (61,9%) мужчин и 40 (38,1%) женщин с соотношением M: F 1,6: 1. Злокачественные СТТ наблюдались у 15 (71,4%) мужчин и у 6 (28.6%) самок с соотношением M: F 2,5: 1. Таким образом, злокачественные СТТ чаще встречались у мужчин.

Таблица 1

Распределение случаев STT по возрасту по десятилетиям

Максимальное количество доброкачественных STT, т.е. 43 случая (40,9%), наблюдалось в конечностях, за которыми следовали голова и шея, 37 случаев (35,3%) []. Большинство из них были липомы и гемангиомы. Злокачественные новообразования чаще встречались в нижних конечностях в девяти случаях (42,8%) и брюшной полости в семи случаях (33,3%). Наиболее частыми злокачественными опухолями нижних конечностей были липосаркомы и фибросаркомы, а в брюшной полости — лейомиосаркомы.Два случая STT с участием нескольких участков были по одному случаю фибромы и нейрофибромы. Размер доброкачественных и злокачественных STT варьировался от 0,3 до 20 см и 2-15 см, соответственно, без большой разницы в размерах.

Таблица 2

Распределение случаев STT по сайту

По мазкам FNAC 104 случая (82,5%) были доброкачественными и 22 случая (17,5%) злокачественными.

Среди шести цитоморфологических категорий было 42 случая (33,3%) липоматозных опухолей, 34 случая (27.0%) веретеноклеточных опухолей, 6 случаев (4,7%) круглоклеточных опухолей, 5 случаев (4,0%) миксоидных опухолей, 1 случай (0,79%) плеоморфной опухоли и 21 случай (16,7%) сосудистых опухолей [] .

Таблица 3

Сравнение цитологического и гистопатологического диагноза STT

Семнадцать случаев (13,4%), которые не дали результатов при цитологическом исследовании, оказались доброкачественными в 15 случаях, как липома (8 случаев), фиброма (1 случай), шваннома (3 случая), гемангиома (3 случая) и злокачественная в 2 случаях как лейомиосаркома (1 случай) и плеоморфная липосаркома (1 случай) по гистологии [].

Таблица 4

Гистопатологическая диагностика опухолей мягких тканей (n = 126)

При цитологической диагностике [] из 42 липоматозных опухолей 40 были диагностированы как доброкачественные и 2 как злокачественные. Восемь случаев, которые не дали окончательных результатов при цитологии, оказались липомой при гистологии, в то время как 1 неубедительный случай был зарегистрирован как плеоморфная липосаркома (S100 +) при гистологии. Один случай хорошо дифференцированной атипичной липоматозной опухоли был ошибочно зарегистрирован как доброкачественная липоматозная опухоль при цитологии из-за отсутствия липобластов.Таким образом, при окончательном гистологическом диагнозе было 47 доброкачественных и 4 злокачественных липоматозных опухоли [].

Плеоморфная липосаркома (a) Мультивакуолизированные липоциты, большие гиперхромные ядра, с отступом от цитоплазматических вакуолей (FNAC, H и E, × 400) (b) Клетки цветков и злокачественные липоциты (Histo., H и E, × 400)

Следующей по величине категорией по цитологии были веретено-клеточные опухоли из 34 (24 доброкачественных и 10 злокачественных) случаев. По гистологии было зарегистрировано 43 случая (32 доброкачественных и 11 злокачественных), которые далее подразделены на опухоли фибробластов [] и миофибробластов (11 случаев), фиброгистиоцитарные опухоли (10 случаев), опухоли периферических нервов [] (13 случаев), опухоли. гладкой мускулатуры (6 случаев) и синовиальной саркомы (3 случая).Из этих 43 случаев 5 случаев, не дающих результатов по цитологии, были диагностированы гистологически как шваннома (3 случая), фиброма (1 случай) и 1 случай лейомиосаркомы (reti, VG, Vim +). Изменение цитологического диагноза при биопсии включало 1 случай злокачественной фиброзной гистиоцитомы (MFH) в доброкачественную фиброзную гистиоцитому (BFH). Один случай синовиальной саркомы был диагностирован как доброкачественная веретеноклеточная опухоль из-за наличия веретенообразных клеток и крови в мазках. При гистологии он показал инфильтрирующие края, структуру гемангиоперицитомы и злокачественных веретеновидных клеток с митозом [].Мы обнаружили, что наиболее частыми злокачественными STT были опухоли веретенообразных клеток (11 случаев).

Фибросаркома (a) Высокая клеточность, злокачественные клетки, образующие структуру костей сельди (Hist., H и E, × 400) (b) клеточный мазок, пучки злокачественных веретенообразных клеток (FNAC, H и E, × 400) (c) Vim + (d) VG +

Schwannoma (a) Неплотно расположенные веретенообразные везикулярные ядра с заостренными концами, фибриллярная строма (FNAC, H и E, × 400) (b) Палисадные ядра веретена, тельца верокая (Histo., H и E) , × 200)

Синовиальная саркома (a) Клеточный мазок, округлые до ядер веретена, геморрагический фон (FNAC, H и E, × 400) (b) Щелевидные сосудистые пространства, окруженные клетками с толстой ядерной мембраной и высокой скоростью митоза ( Histo., H и E, × 400) (c) Vim + (d) CD 34 +

Все шесть случаев круглоклеточных опухолей (РКИ) были диагностированы как злокачественные при цитологии. По гистологии это были саркома Юинга / PNET (3 случая), которые были PAS +, Syn +, S100 +, LCA –ve [], детская рабдомиосаркома (1 случай), которая была PAS + и миозин +. Два случая РКИ с однородными круглыми ядрами были диагностированы как доброкачественные новообразования при гистологии, как гломус-опухоль и параганглиома, по 1 случаю.

Ewing’s / PNET (a) Клеточный мазок, рыхлые агрегаты круглых клеток, несколько розеток, мелкозернистый хроматин, минимальная цитоплазма (FNAC, H и E, × 400) (b) Syn + (c) LCA — ve

Из пяти (четыре доброкачественных и 1 злокачественная) миксоидных опухолей по цитологии, четыре случая, в которых был обнаружен миксоидный материал с веретеновыми клетками, были нейрофибромами по гистологическому исследованию.Одним из случаев, когда цитология показала большое количество миксоидного материала со злокачественными веретеновидными клетками, была миксофибросаркома на гистологическом исследовании.

Единственный случай, в котором при цитологическом исследовании был поставлен диагноз плеоморфной опухоли, по гистологии оказался эпителиоидной саркомой (Vim +, CK +, Des –ve, PTAH –ve) [].

Эпителиоидная саркома (a) Причудливая большая плеоморфная клетка. (FNAC, H и E, × 400) (b) Плоские клетки, переходящие в клетки веретена, злокачественные ядра (Histo., H и E, × 400) (c) Группа плоских клеток с индивидуальной сетью ретикулина (Reti, × 400) (d) CK + (e) Vim +

Из 25 сосудистых опухолей по гистологии было 20 случаев гемангиомы и 1 случай лимфангиомы, диагностированных в основном на основании истории болезни и обследования, поскольку FNAC показал только кровь и лимфу, соответственно, с несколькими эндотелиальные клетки в редких случаях.Три случая гемангиомы оказались безрезультатными при цитологическом исследовании. Диагноз гломус-опухоли как круглоклеточной опухоли (1 случай) при цитологическом исследовании скорректирован по гистологии.

На основе FNAC можно было правильно диагностировать 104 случая (истинно положительных), из которых 87 были доброкачественными, а 17 — злокачественными. Было зарегистрировано три ложноположительных случая, которые были доброкачественными и были диагностированы как злокачественные, и два ложноотрицательных случая, которые были диагностированы как доброкачественные при цитологическом исследовании, и 17 неубедительных случаев были диагностированы правильно при гистологическом исследовании.Пять случаев злокачественного новообразования были диагностированы как другое злокачественное новообразование при цитологии [Таблицы и].

Таблица 5

Дискордантный диагноз (N = 2 + 3 + 5 = 10)

Гистопатологическое подтверждение доброкачественной и злокачественной STT дало положительную прогностическую ценность 97,2% с точки зрения злокачественности, чувствительности 98,1% и специфичности 96,7%.

Обсуждение

Применение FNAC привело к достаточно точной диагностике различных типов опухолей мягких тканей в различных частях тела.Сложная неоднородность — сложный фактор в диагностике STT.

Это исследование проводилось на 126 пациентах с опухолями мягких тканей. Сто пять случаев (83,3%) были доброкачественными и 21 (16,7%) злокачественными. Для постановки окончательного диагноза в 23 случаях была проведена ИГХ. Результаты сопоставимы с отчетами других авторов. Bezabih [9] обнаружил 82,8% случаев (516/623) как доброкачественные и 17,2% (107/623) как злокачественные. Dey и др. . [10] обнаружили 83,7% (1135/1356) случаев доброкачественных и 16 случаев.3% (221/1356) случаев злокачественного СТТ.

Большинство случаев STT в нашем исследовании были распределены между 1-м и 5-м десятилетиями, 115 случаев (91,2%). Девяносто шесть случаев (91,4%) доброкачественной STT и 19 случаев (90,4%) злокачественной STT также наблюдались в том же диапазоне. Nagira и др. . [11] в своем исследовании 279 случаев STT сообщили о среднем возрасте 48 лет, в то время как Bezabih [9] обнаружил, что наиболее распространенной возрастной группой для доброкачественных опухолей являются 4-е и 5-е десятилетия, а для злокачественных опухолей — 1-е. и 2-е десятилетия.

Мы зарегистрировали максимальное количество STT в конечностях, 53 случая (42.1%). Другие авторы, такие как Bezabih [9] и Nagira и др. [11], также обнаружили, что нижняя конечность является наиболее частым местом STT, за которым следует верхняя конечность.

Как и в нашем исследовании, Bezabih [9] также сообщил о липоме (70,5%) как о наиболее частом доброкачественном STT и веретено-клеточной опухоли как о наиболее частом злокачественном STT (63,6%). Bennert и др. [12] в своем исследовании 117 пациентов обнаружили липому (69%) как наиболее частую доброкачественную STT и MFH (27%) как наиболее частую злокачественную STT, за которой следует липосаркома (13.5%) при биопсии стержневой иглой. Nagira и др. . [11] сообщили о наиболее частом доброкачественном STT в виде веретенообразных клеток (31,5%), за которым следует липоматозная опухоль (14,6%), в то время как наиболее частым злокачественным STT в их исследовании были плеоморфные клетки (35%), за которыми следовали раунды. клеточная опухоль (19,3%).

Цитологические данные аспирационных мазков вместе с клинико-рентгенологическими данными помогают в постановке диагноза. Обе цитологические детали, включая типы клеток, липоматозные, веретенообразные, круглые или плеоморфные, и фоновый материал, такой как липоматозные, миксоидные или метахроматические фрагменты стромы, являются индикаторами типа STT на FNAC.Мы использовали аналогичный подход при выделении подтипов STT по цитологии. [3,9–12]

В нашем исследовании семнадцать случаев были признаны неубедительными по FNAC. Было 10 несогласованных случаев. Один случай хорошо дифференцированной липосаркомы был диагностирован как доброкачественное липоматозное поражение, поскольку было аспирировано только несколько пенистых клеток, напоминающих зрелые липоциты. Один случай синовиальной саркомы был отмечен как доброкачественная веретеновидная опухоль из-за присутствия в мазке всего нескольких веретеновидных клеток и крови. Опухоль при гистопатологии показала инфильтрирующие края и образец гемангиоперицитомы с щелевидными сосудистыми пространствами, выстланными эндотелием, равномерно распределенными по слоям клеток.Клетки были пухлыми до веретена с гиперхроматическими круглыми ядрами. Митоз составил 5/10 HPF. Опухоль была CD 34+ и Vim +. С другой стороны, один случай BFH был ошибочно обозначен как MFH из-за большого размера опухоли 10 см и, по-видимому, гиперхроматических веретенообразных клеток в расположении колеса тележки. При гистологическом исследовании опухоль ограничена, ядра доброкачественные, митоз не выявлен. Некроза или миксоидных изменений не было. Таким образом, ему был поставлен диагноз BFH. Опухоль Glomus и параганглиома были помечены как злокачественные круглоклеточные опухоли в мазках FNAC, поскольку они выглядели как скопления круглых темных ядер в мазках, свидетельствующих о злокачественности.При гистологии гломус-опухоль показала хорошо очерченную опухоль размером 1,5 см с хорошо разграниченными гнездами однородных круглых ядер с минимальной цитоплазмой (CD 34 +), разделенными фиброзными перегородками. Параганглиома показала расположение клеточного шара из опухолевых клеток (Syn +), разделенных тонкими васкуляризованными перегородками и неинфильтрирующими краями опухоли.

В пяти случаях злокачественного новообразования при цитологическом исследовании был изменен на другой тип злокачественного новообразования при гистопатологическом исследовании. Четыре из них были круглоклеточными опухолями, для окончательной диагностики которых требовались иммуномаркеры.Они включали инфантильную рабдомиосаркому (PAS +, Myo +) (1 случай) и PNET (PAS +, Syn +, S100 +) (3 случая). Один случай эпителиоидной саркомы был помечен цитологическим исследованием как плеоморфная саркома, поскольку мазок показал плеоморфные клетки и отсутствие плоских эпителиальных и веретенообразных клеток. Гистопатология показала, что плоские эпителиальные клетки меняются на клетки веретена, злокачественные ядра с ядрышками и повышенный и атипичный митоз. Сеть ретикулина могла быть продемонстрирована вокруг каждой клетки без образования каких-либо органоидов. Ячейки были Vim + и CK +.

Иммуномаркеры использовались в 23 случаях, что помогло подтвердить диагноз, особенно при круглоклеточных и веретеноклеточных опухолях.

В нашем исследовании было 3 случая FP, 2 случая FN и 17 неубедительных случаев на FNAC, что дало положительную прогностическую ценность 97,2% с точки зрения злокачественности, чувствительность 98,1% и специфичность 96,7%. Исследование 517 аспиратов STT, проведенное Акерманом и др. . [13] выявило 2,9% ложноположительных результатов, последующие исследования Wakely и др. , [14] и Килпатрик и др. [15] дали единичный случай ложной отрицательности и нулевой ложной положительности.Это контрастировало с исследованием Нагира и др. [11], которые выявили более высокие показатели ложноположительности и ложноотрицательности со специфичностью 92% и чувствительностью 97%. Wakely et al , [14] сообщили о 100% чувствительности и 97% специфичности диагностики STT с помощью FNAC. Layfield и др. , [16] достигли 95% чувствительности и специфичности при работе с этими поражениями.

Таким образом, мы заключаем, что FNAC играет определенную роль в формировании первоначального диагноза STT, в то время как гистопатология с помощью иммуномаркеров обеспечивает окончательный диагноз, ведущий к эффективному лечению с учетом поведения опухоли.

Сноски

Источник поддержки: Нет

Конфликт интересов: Не объявлен.

Список литературы

1. Розенберг А.Е. Опухоли костей, суставов и мягких тканей. В: Кумар В., Аббас А.К., Фаусто Н., редакторы. Патологические основы болезни Роббинса и Котрана. 7-е изд. Нью-Дели: Сондерс, Эльзевир; 2004. с. 1316. [Google Scholar] 2. Орбах Д., Рей А., Оберлин А., де Толедо Дж. Санчес, Терьер-Лакомб М.Дж., ван Унник А. и др. Саркома мягких тканей или злокачественные мезенхимальные опухоли на первом году жизни: опыт Международного общества детской онкологии (SIOP), Комитета по злокачественным мезенхимальным опухолям.J Clin Oncol. 2005; 23: 4363–71. [PubMed] [Google Scholar] 3. Rekhi B, Gorad BD, Kakade AC, Chinoy R. Сфера применения FNAC в диагностике опухолей мягких тканей — исследование, проведенное специализированным центром по лечению рака в Индии. CytoJournal. 2007; 4:20. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 4. Coindre JM. Классификация сарком мягких тканей: обзор и обновление. Arch Pathol Lab Med. 2006; 130: 1448–53. [PubMed] [Google Scholar] 5. Палмер Х.Э., Мукунядзи П., Калберт В., Томас-младший. Подгруппирование и классификация сарком мягких тканей с помощью тонкоигольной аспирационной цитологии: исследование гистопатологической корреляции.Diagn Cytopathol. 2001; 24: 307–16. [PubMed] [Google Scholar] 6. Дженсон О.М., Хог Дж., Остгаард С.Е., Нордентофт А.М., Снеппен О. Гистопатологическая классификация опухолей мягких тканей: прогностическое значение в проспективном исследовании 278 последовательных случаев. J Pathol. 1991; 163: 19–24. [PubMed] [Google Scholar] 7. Тюки CE. В кн .: Диагностическая цитология и ее гистопатологические основы. 5-е изд. Косс С., Косс Л.Г., Метамед М.Р., редакторы. Нью-Йорк: Липпинкотт; 2005. С. 1569–634. [Google Scholar] 8. Бэнкрофт Дж., Андерсон Г. В: Теория и практика гистологических методов.5-е изд. Бэнкрофт Дж. Д., Гэмбл М., редакторы. Филадельфия: Черчил Ливингстон; 2003. С. 85–108. [Google Scholar] 9. Безабих М. Цитологическая диагностика опухолей мягких тканей. Патолог. 2007: 368–76. С: 28. [PubMed] [Google Scholar] 10. Дей П., Маллик МК, Гупта С.К., Васишта РК. Роль тонкоигольной аспирационной цитологии в диагностике опухолей мягких тканей и опухолевидных поражений. Diagn Cytopathol. 1996; 15: 23–32. [Google Scholar] 11. Нагира К., Ямамото Т., Акисуе Т., Маруи Т., Хитора Т., Накатани Т. и др. Надежность тонкоигольной аспирационной биопсии в первичной диагностике поражения мягких тканей.Diagn Cytopathol. 2002. 27: 354–61. [PubMed] [Google Scholar] 12. Беннерт К.В., Абдул Карим Ф.В. Аспирация тонкой иглой по сравнению с биопсией с помощью стержневой иглы опухолей мягких тканей. Сравнение. Acta Cytol. 1994; 38: 381–4. [PubMed] [Google Scholar] 13. Акерман М, Ридхольм А, Перссон БМ. Аспирационная цитология опухолей мягких тканей. 10-летний опыт работы в онко-ортопедическом центре. Цитопатология. 2007; 18: 234–40. [PubMed] [Google Scholar] 14. Wakely PE, Kneisl JS. Цитопатология аспирационной аспирации мягких тканей. Рак. 2000; 90: 292–8.[PubMed] [Google Scholar] 15. Килпатрик С.Е., Гейзингер КР. Саркомы мягких тканей: полезность и ограничения тонкоигольной аспирационной биопсии. Am J Clin Pathol. 1998. 110: 50–68. [PubMed] [Google Scholar] 16. Лейфилд Л.Дж., Андерс К.Х., Глазго Б.Дж., Мира Дж.М. Тонкоигольная аспирация первичных опухолей мягких тканей. Arch Pathol Lab Med. 1986; 110: 420–4. [PubMed] [Google Scholar]

Сравнение цитологических и гистологических исследований в разных частях матки лошади — исследование in vitro

Эндометрит представляет собой серьезную проблему при содержании кобыл.Гистологическое присутствие полиморфноядерных нейтрофилов (PMN) в компактном слое эндометрия принято в качестве эталона для диагностики эндометрита у кобыл. Целью этого исследования было определить распределение PMN в разных местах отбора проб матки с помощью цитологических исследований и сравнить его с количеством PMN в биоптатах эндометрия в соответствующем месте. Цитологические образцы и образцы эндометрия были получены из 37 маток в течение 2 ± 1 часа после убоя через небольшие разрезы из пяти различных заранее определенных мест каждой матки.Цитологические образцы мазали на предметные стекла, окрашивали и классифицировали как отрицательные (<2% PMN) или положительные (≥2% PMN) на эндометрит. Гистологически количество PMN было подсчитано в трех полях с высоким увеличением опытным патологом и классифицировано как положительное для этого типа эндометрита, если ≥5 PMN произошло в трех полях с высоким увеличением (увеличение × 40). Биопсии были также оценены на предмет лимфоплазматического клеточного эндометрита, перигландулярного фиброза (эндометроза) и ангиосклероза.Распространенность положительных цитологических и гистологических образцов составила 14,6% и 17,8% соответственно. Было обнаружено удовлетворительное согласие между двумя диагностическими методами (k = 0,29; P <0,01). Количество PMN различалось в разных местах отбора проб, что приводило к положительным и отрицательным местоположениям в матке с положительной оценкой, как в матке с цитологически положительной оценкой (8/10), так и в матке с гистологически положительной оценкой (13/14). Не было обнаружено значительных различий в количестве PMN в разных местах, ни цитологических (P = 0.78) или гистологическое (P = 0,79) исследование. Кроме того, не наблюдалось значительных различий в оценке эндометроза (P = 0,96) и ангиосклероза (P = 0,67) в пределах локализации. В заключение, количество PMN при цитологическом исследовании эндометрия показало справедливое согласие с наличием PMN в компактном слое при гистологическом исследовании в том же месте взятия пробы. Хотя при использовании обоих методов (цитологии и гистологии) были обнаружены вариации в количестве PMN, статистически значимых различий в разных местах не обнаружено (P = 0.78; P = 0,79), подразумевая, что решение о взятии более одной пробы следует критически рассмотреть. Необходимы дополнительные исследования для определения количества точек отбора проб, необходимых для получения достоверных результатов исследования.

Цитологическое исследование | SEER Training

Изучение клеток, их происхождения, структуры, функции и патологии называется цитологией. Клетки постоянно отслаиваются (отслаиваются) от тканей, выстилающих полости и полые органы тела.Эти отслоившиеся клетки могут плавать в жидкости и слизистых оболочках или проходить через эти полости. Эти клетки можно исследовать под микроскопом, чтобы определить их происхождение и определить, являются ли они злокачественными. Термин эксфолиативная цитология относится к «микроскопическому исследованию клеток, содержащихся в жидкостях организма».

Три полости тела: плевра (окружающая легкие), брюшина (окружающая кишечный тракт) и перикард (окружающая сердце) могут быть проверены на наличие жидкости.Нормальные жидкости в полостях тела ограничены незначительным смазочным слоем, который невозможно всасывать. Следовательно, жидкость в любой полости тела, которую можно аспирировать, указывает на патологический процесс, обычно злокачественный и метастатический. Считается, что образование злокачественного асцита (жидкость в брюшной полости), например, вызывается колониями раковых клеток, которые повреждают капилляры и лимфатические сосуды, что приводит к утечке раковых клеток и плазмы непосредственно в брюшную полость.

В таблице ниже перечислены источники некоторых образцов, которые исследованы гистологически, а некоторые — цитологически. В качестве дополнительного руководства, гистология — это исследование тканей , а цитология — это исследование клеток .

Гистологическое исследование

• Биологический материал
• Секция замороженной
• Биопсия / аспирация костного мозга (ткань)
• Оперативный образец
• Вскрытие

Цитологическое исследование

• Мокрота
• Секреция груди
• Желудочная жидкость
• Жидкость брюшной полости
• Плевральная жидкость
• Аспирация костного мозга (клетки)
• Бронхиальная чистка
• Промывание бронхов
• Секрет простаты
• Спинномозговая жидкость
• Мочевой осадок
• Мазки из шейки матки и влагалища
• Промывание трахеи

Подраздел Темы

Сравнение результатов цитологического или гистологического диагноза злокачественной мезотелиомы

Это исследование демонстрирует, что случаи с цитологическим диагнозом эпителиоидного ММ имеют аналогичный результат выживания по сравнению с пациентами с гистологическим диагнозом эпителиоидного ММ.Кроме того, существует последовательное и четкое разделение кривых выживаемости (цитологически или гистологически диагностированных) эпителиоидных ММ от гистологически диагностированных двухфазных ММ, что указывает на то, что в этой популяции, по-видимому, нет клинически значимых различий между цитологически и гистологически диагностированными эпителиоидными ММ.

В текущих международных руководствах упоминаются исторические опасения относительно использования цитологии как средства диагностики ММ, и широко признано, что этот метод бесполезен для диагностики опухолей, содержащих саркоматоиды.Накапливаются доказательства того, что цитологический диагноз ММ, подкрепленный дополнительными методами, такими как иммуногистохимия, столь же надежен, как и гистопатологический диагноз (Rakha et al, 2010). Было высказано опасение, что цитологически установленный диагноз ММ может ошибочно классифицировать двухфазный ММ как эпителиоидный, потому что клетки саркоматоидного компонента не попадают в плевральное пространство, что приводит к ошибочной классификации. Используя выживаемость в качестве суррогата для различной гистологии ММ, текущее исследование не поддерживает эту ошибочную классификацию.Напротив, результаты этого исследования демонстрируют, что случаи с диагнозом эпителиоидного ММ с использованием только цитологии не имеют существенной разницы в общей выживаемости по сравнению со случаями с гистологически диагностированным эпителиоидным ММ, и, что важно, существует статистически значимое разделение результатов выживания, когда по сравнению с двухфазным или саркоматоидным ММ.

После получения соответствующей истории болезни и визуализации диагностическая аспирация в большинстве случаев широко применяется в качестве первого инвазивного исследования необъяснимого плеврального или перитонеального выпота.Во многих случаях это позволяет провести цитологический анализ и диагностировать злокачественный плевральный / перитонеальный выпот. Важность этого текущего исследования заключается в том, что при наличии соответствующего цитопатологического опыта и техники диагноз эпителиоидной ММ может быть поставлен с уверенностью, потенциально без необходимости проведения дальнейших инвазивных биопсий с использованием метода визуализации или торакоскопических методов. Предыдущий аудит практики в нашем учреждении показал, что в среднем отчет цитологии был доступен за 29 дней до последующей тканевой диагностики случаев ММ (Segal et al, 2013).Таким образом, цитологический анализ имеет очевидные преимущества для пациентов и медицинских ресурсов. Клиницисты могут надежно информировать пациентов о диагнозе и прогнозе, зная, что нет клинически значимой разницы между общей выживаемостью при использовании любого из диагностических методов.

Цитология выпота является малоинвазивной и недорогой, что является еще одним важным фактором в этой популяции, учитывая ограниченную продолжительность жизни. Цитологический диагноз ММ должен соответствовать одному из следующих критериев: бесспорные злокачественные клетки по цитоморфологическим критериям, которые демонстрируют мезотелиальный фенотип, подтвержденный дополнительными исследованиями; или цитоморфологические признаки, которые не являются однозначно злокачественными, но с дополнительными методами, подтверждающими злокачественность и мезотелиальный фенотип (Hjerpe et al, 2015).Диагноз мезотелиомы в образцах выпота ставится с использованием комбинации морфологических признаков и иммуногистохимии. Основное изменение, произошедшее за последние 20 лет, — это доступность в настоящее время надежных иммуногистохимических мезотелиальных маркеров, таких как кальретинин, CK5 / 6, D240, мезотелин и WT1, а также более специфических железистых маркеров, например, TTF1 (легкие), PAX8 (гинекологический тракт, почки, щитовидная железа). Эти иммуногистохимические маркеры облегчили различие между аденокарциномой и мезотелиомой, и это привело к резкому сокращению использования ЭМ для подтверждения фенотипа опухоли, тогда как раньше ЭМ была рутинной частью диагностики, теперь она почти никогда не проводится.Дополнительные тесты для различения доброкачественных и злокачественных мезотелиальных клеток, включая иммуногистохимию BAP1 и FISH для p16 (CDKN2A), стали доступны совсем недавно; эти последние тесты не использовались широко во время текущего исследования (Hwang et al, 2016).

Поскольку эпителиоидный подтип ММ является наиболее распространенным, результаты настоящего исследования имеют важное значение для большинства случаев ММ. Важно отметить, что некоторые случаи эпителиоидной ММ не могут быть диагностированы с помощью цитологии и требуют биопсии ткани для постановки диагноза, но также и то, что биопсия ткани сама по себе не всегда может точно определить подтип ММ (Bueno et al, 2004), поэтому обе группы в этом исследование может содержать несколько двухфазных случаев.

Рак — это заболевание, подлежащее регистрации в штате Вашингтон, что подтверждает, что систематическая ошибка отбора маловероятна, поскольку уведомляются обо всех случаях рака со всего штата. Все диагнозы ММ были подтверждены экспертом-патологом с целью дальнейшего изучения случая с целью дифференциации на подтипы ММ, если это необходимо. Когорта ММ с диагностированным только цитологическим исследованием была старше (средний возраст 67,6 против 70,2 года), что, вероятно, отражает различную клиническую практику для пожилого населения, отдавая предпочтение менее инвазивному подходу. Регрессия Кокса показала, что возраст, мужской пол и перитонеальная ММ имели статистически значимую связь с выживаемостью, но не было значимого эффекта от различных диагностических подходов.Среди заболевших преобладали мужчины, которые подвергались воздействию асбеста на работе, что характерно для этого заболевания во всем мире. Хотя почти четверть заболевших были бывшими рабочими или жителями Виттенума (с сильным воздействием исключительно крокидолита), нет никаких доказательств того, что воздействие различных типов волокон асбеста приводит к различным клиническим исходам (Franklin et al, 2016). Таким образом, эти данные могут быть обобщены на другие группы населения во всем мире, подвергающиеся воздействию асбеста.

При стратификации по десятилетию постановки диагноза средняя выживаемость со временем увеличивалась с тенденцией к значимости (1970–1980 гг. 7.6 месяцев, IQR 2,9–18,9 по сравнению с 2000–2012 гг. 11,8 месяцев, IQR 6,0–20,3; P = 0,083; Фигура 2). Комбинированный системный пеметрексед / цисплатин — единственная терапия, которая, как было доказано, улучшает общую выживаемость при ММ, и она доступна в нашем учреждении с начала 2006 г. (Vogelzang et al, 2003). Следовательно, продемонстрированная тенденция к увеличению медианы выживаемости, вероятно, представляет собой систематическую ошибку заблаговременности из-за улучшения диагностических знаний, подходов и повышения осведомленности врачей о ММ, как описано ранее (Musk et al, 2011).Существует относительно немного исследований, изучающих чувствительность диагностики мезотелиомы с помощью цитологического исследования выпота. Исторически часто указывается чувствительность около 30% (Renshaw et al, 1997a), однако опытные лаборатории в районах с высокой заболеваемостью могут достичь чувствительности более 70% (Segal et al, 2013), а другие более поздние исследования документально подтверждают чувствительность 50–60% (Rakha et al, 2010; Pinelli et al, 2012). Недавнее добавление новых иммуногистохимических красителей (BAP1) и исследований FISH (CDKN2A / p16) дает большие надежды на повышение чувствительности диагностики мезотелиомы в образцах выпота во всех лабораториях (Walts et al, 2016).

Есть ряд потенциальных ограничений этого исследования, которые следует учитывать при интерпретации данных. Возможно, что в штате недостаточно представлены все истинные случаи ММ из-за пропущенного диагноза или неправильной классификации как вторичный рак плевры; однако маловероятно, что это пропорционально отражает многие случаи. Поскольку группа цитологического исследования была старше на момент постановки диагноза, возможно, они были более нездоровы и не могли пройти более инвазивные методы диагностики.Также вероятно, что некоторые цитологически диагностированные случаи эпителиоидной ММ были на самом деле двухфазными, однако это в равной степени верно и для образцов гистологической биопсии (Bueno et al, 2004). Из-за дизайна этого исследования нет возможности оценить точность, чувствительность или специфичность любого из средств диагностического подхода; в WAMR нет записи о том, изменился ли подтип случая после экспертной оценки или подтверждения при вскрытии.

Это исследование не демонстрирует, что эпителиоидный ММ, диагностированный только цитологически, биологически совпадает с гистологически диагностированным эпителиоидным ММ.Однако это демонстрирует отсутствие разницы в клинически значимых результатах для пациентов, использующих эти два разных диагностических метода. Хотя нет данных по лечению или стадированию заболевания, эти параметры вряд ли будут сильно влиять на результаты, помимо типа клеток, который широко признан одной из наиболее влиятельных переменных. В настоящее время нет доказательств того, что будет какая-либо разница в ответе на химиотерапию между этими группами.Признано, что в эпоху персонализированной медицины с генетическим или иммунологическим тестированием образцов опухоли бывают случаи, когда может потребоваться более крупный образец (биопсийного) материала. Точно так же, если пациент рассматривается для исследования хирургических подходов, существует также признанная необходимость в множественных биопсиях как гемиторака, так и средостения (Alvarez et al, 2009). Когда диагноз мезотелиомы ставится на основе образца выпота, это почти всегда высококлеточный образец; в случаях, когда значительное количество клеток не попадает в жидкость, обычно требуется биопсия для диагностики.В этих образцах клеточной жидкости собираются клетки, отколовшиеся от больших участков плевры, а не очень ограниченный отбор образцов тонкой сердцевины (с визуализацией) или небольших биоптатов, полученных при плевроскопии. Таким образом, количество клеток, доступных в клеточных блоках, приготовленных из образцов жидкости, обычно намного больше, чем в биопсийном материале.

В этой большой когорте это исследование демонстрирует, что характеристики выживаемости только цитологических и гистологически диагностированных эпителиоидных ММ не различаются.В опытной лаборатории цитологический диагноз эпителиоидной ММ является клинически приемлемым и не связан с клинически значимым другим исходом по сравнению с гистологически диагностированными случаями. Следовательно, диагноз ММ цитологическим исследованием выпота может быть достаточным для клинического ведения без необходимости дальнейшего инвазивного тестирования.

Границы | Цитологический и гистопатологический спектр гистоплазмоза: 15-летний опыт работы во Французской Гвиане

Введение

H.capsulatum — это диморфный сапрофитный гриб, который существует в мицелиальной форме в почве при умеренной температуре, в идеале во влажной среде. Как почвенный гриб, он хорошо приспособлен к патогенности для человека, поскольку ему не нужно взаимодействовать с млекопитающим-хозяином в рамках своего жизненного цикла. В тканях и после вдыхания конидий, переносимых по воздуху, H. capsulatum остается в состоянии бластоспор и не производит филаментов и обычно находится внутри клетки (Woods et al., 2001). Морфологически H.capsulatum — небольшие дрожжи сферической или яйцевидной формы размером от 2 до 6 мкм (Silverman et al., 1955). Он характеризуется своей способностью совершать диморфный переход от сусла к дрожжам, проникать в макрофаги хозяина (также называемые гистиоцитами в тканях) и выживать внутриклеточно. Он также способен размножаться во время активной инфекции и сохраняться во время клинически неявной инфекции, а также имеет способность к реактивации (Woods et al., 2001).

Гистоплазмоз был впервые описан Сэмюэлем Тейлором Дарлингом при исследовании вскрытий двух человек из Карибского бассейна и одного азиатского человека, живущих и работающих в Панаме, у которых развился диссеминированный гистоплазмоз (Дарлинг, 1906).С тех пор гистоплазмоз приписывают H. capsulatum . До недавнего времени в соответствии с различными клиническими и эпидемиологическими профилями классификация включала Histoplasma capsulatum var. capsulatum ( H. capsulatum ), вызывающий классический гистоплазмоз, Histoplasma capsulatum var. duboisii ( H. duboisii ), вызывающий африканский гистоплазмоз, и H. capsulatum var. farciminosum , вызывающий лимфангит у лошадей в Старом Свете.Понимание филогенетических исследований теперь заменило это классическое название и показало, что причинные патогены гистоплазмоза включают различные регионально специфичные криптические виды, классификация, которая постепенно становится более подробной по мере роста выборки изолятов из разных частей мира (Teixeira et al., 2016; Sepúlveda et al., 2017; Damasceno et al., 2019). Африканский гистоплазмоз локализуется преимущественно в кожной и подкожной клетчатке (Cockshott and Lucas, 1964). Его развитие идет медленно, прогноз благоприятный, а распространение на внутренние органы остается исключительным (Zida et al., 2015).

Для американского гистоплазмоза разные генотипы могут быть связаны с различиями в клиническом фенотипе, при этом южноамериканские генетические линии более дерматропны и приводят к острым легочным заболеваниям, тогда как североамериканские штаммы могут быть связаны с более хроническими легочными заболеваниями. Однако эти различия могут быть смешаны с различиями в доступе к медицинской помощи, и все еще необходимы дальнейшие исследования, чтобы разобраться в том, что связано с различиями в генетике Histoplasma и траекториях оказания помощи пациентам (Couppie et al., 2006; Morote et al., 2020; Родригес и др., 2020).

Тяжесть заболевания после вдыхания H. capsulatum варьируется в зависимости от интенсивности воздействия и иммунитета хозяина. Это может привести к бессимптомным инфекциям или легкому заболеванию легких при воздействии низкой интенсивности у иммунокомпетентных лиц, тогда как сильное воздействие может привести к тяжелым легочным инфекциям. У пациентов с основным заболеванием легких может развиться хроническая легочная инфекция с постепенной потерей легочной функции и, при отсутствии лечения, с частой смертью.У пациентов с ослабленным иммунитетом инфекция прогрессивно распространяется на другие органы, что приводит к неспецифическим синдромам. Таким образом, у одного и того же пациента могут быть задействованы различные органы, такие как легкие, желудочно-кишечный тракт, печень или лимфатические узлы. Пациенты с ослабленным иммунитетом, инфицированные Histoplasma , в 10-15 раз чаще развивают диссеминированную форму заболевания, которая неизменно приводит к летальному исходу, если не лечить. Следовательно, у ВИЧ-инфицированных пациентов с диссеминированным гистоплазмозом обычно количество CD4 ниже 200 на мм ³ и в основном ниже 50 на мм ³ .За последние четыре десятилетия пандемия синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИД) и рост числа пациентов с фармакологическим иммунодефицитом привели к увеличению популяции пациентов, предрасположенных к прогрессирующему диссеминированному гистоплазмозу, и высокому числу смертельных исходов в результате контекст, в котором диагностика затруднена, а противогрибковое лечение часто отсутствует или поздно (Панамериканская организация здравоохранения, 2020).

Гистоплазмоз, таким образом, стал основной оппортунистической инфекцией у пациентов с запущенной ВИЧ-инфекцией в эндемичных регионах, где он часто оценивался как наиболее распространенная СПИД-определяющая инфекция и причина смерти пациентов с количеством клеток CD4 <200 клеток / мм ³ (Nacher et al., 2011; Nacher et al., 2020).

Французская Гвиана сочетает в себе благоприятную среду для роста грибов с высокой распространенностью ВИЧ-инфекции (Nacher et al., 2018a). Эпидемиологическая статистика показывает, что частота диссеминированного гистоплазмоза у пациентов с ВИЧ достигает 1,5 на 100 человеко-лет в целом и более 10 на 100 человеко-лет у пациентов с числом CD4 ниже 50 / мм ³ (Nacher et al. , 2011; Nacher et al., 2014). В Южной Америке гистоплазмоз является распространенным диагнозом, который часто рассматривается врачами, сталкивающимися с ВИЧ-пациентами с симптомами инфекционного заболевания, легочными или пищеварительными симптомами (Couppié et al., 2019).

До появления эпидемии СПИДа данные о гистоплазмозе были получены из образцов животных (Emmons and Ashburn, 1948) или путем включения образцов аутопсии, иногда через несколько десятилетий после первоначального диагноза (Queiroz and Siqueira, 1975).

Для обнаружения инфекции Histoplasma использовались различные методы. Контрольными методами являются цитологическое и гистологическое исследование и посев грибов с чувствительностью 65 и 80% соответственно у пациентов с ослабленным иммунитетом (Wheat, 2003; Wheat, 2006; Nacher et al., 2018б). Другие распространенные процедуры включают обнаружение ДНК с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) и серологическое обнаружение в плазме. Однако чувствительность методов обнаружения гистоплазмоза, описанных в литературе, сильно различается и может отличаться географически, в зависимости от опыта и лабораторных методов, используемых в каждом центре (Wheat, 2003; Tobon et al., 2005; Huber et al., 2008; Mata-Essayag et al., 2008). Кроме того, значимость различных тестов может варьироваться в зависимости от извлеченных органов или иммунного статуса пациента (Tobon et al., 2005; Weydert et al., 2007). Интересно, что обнаружение антигена H. capsulatum в сыворотке или моче показало более высокую чувствительность, оцениваемую на уровне 90% для американских штаммов. Однако доступ к этому методу ограничен и доступен только в некоторых североамериканских лабораториях. Из-за пробелов в диагностике в большинстве стран большинство исследований, отражающих патологические данные гистоплазмоза, обычно представлены в форме отчетов о случаях. Некоторые когорты с большим числом пациентов были собраны в Соединенных Штатах в ходе последовательных эпидемий в восточно-центральных регионах, касающихся в основном иммунокомпетентных пациентов (Cano and Hajjeh, 2001).В то же время заболеваемость неуклонно растет в некоторых частях Южной Америки, где доступ к медицинской помощи может быть более трудным. В то время как посев грибов, определение антигена или ПЦР часто недоступны, цитологические и гистологические методы обычно используются в большинстве больниц эндемичных стран и могут представлять собой ценную диагностическую альтернативу. В этом обзоре мы сообщаем об опыте отделения патологии Госпитального центра Кайенны Андре Роземона во Французской Гвиане с точки зрения микроскопической диагностики H.capsulatum гистоплазмоз более 15 лет (2005 и 2020 гг.) проводился на цитологических и гистологических образцах.

Методы

Мы проанализировали образцы от живых пациентов с диагнозом гистоплазмоз с января 2005 г. по июнь 2020 г. в Госпитальном центре Кайенны Андре Роземона в отделении патологии (Кайенна, Французская Гвиана). Критериями включения было подтвержденное наличие гистоплазмоза H. capsulatum при цитологическом и / или гистологическом анализе.Все образцы были исследованы опытным патологом для подтверждения первоначального диагноза путем поиска организмов H. capsulatum , таких как типичные круглые внутриклеточные дрожжи 2–6 мкм с бутонами. Все образцы твердых тканей фиксировали в 10% забуференном формалине, заливали парафином, делали срезы толщиной 4 мкм и окрашивали стандартным окрашиванием гематоксилин-эозин-сафраном (HES), а также серебряным метенамином Gomori-Grocott (Gomori-Grocott) и / или Окрашивание периодической кислотой по Шиффу (PAS). Дрожжи H.capsulatum обычно окрашены в красно-фиолетовый цвет и окружены светлым ореолом при окрашивании PAS и окрашены в коричнево-черный цвет при окрашивании по Гомори-Грокотту.

Гистопатологические поражения соответствуют реакциям хозяина против H. capsulatum и его иммунному статусу и подразделяются на 4 категории: (i) туберкулоидная форма, (ii) анергическая форма, (iii) смешанная форма и (iv) форма последствий.

Туберкулоидная форма обычно соответствует низкой инокуляции и эффективному тканевому ответу хозяина.Ткань показывает воспалительный инфильтрат, богатый активированными макрофагами и лимфоцитами, в основном Т-хелперного фенотипа CD4 +, прогрессивно рекрутируемого in vivo . Также могут наблюдаться гранулемы с эпителиоидными клетками с гигантскими клетками или без них. Эволюция этой формы по аналогии с туберкулезом — казеозный некроз. Здесь гистоплазмы обычно немногочисленны и расположены в цитоплазме гистиоцитов (внутриклеточно).

Анергическая форма наблюдается у пациентов с ВИЧ и не вызывает реакции тканей.Местные макрофаги остаются неактивными. Типичный вид — это обилие внутриклеточных и внеклеточных дрожжей.

Смешанная форма представляет собой промежуточную форму между туберкулоидной формой и анергической формой. Наконец, в форме последствий преобладает рубцовый фиброз, а воспаление носит умеренный характер. В этой форме можно найти редкие дрожжи, которые могут соответствовать случаю рецидива или возможной реактивации.

Этические и нормативные аспекты

ВИЧ-инфицированных пациентов были включены в базу данных французских больниц по ВИЧ (FHDH).База данных включает большинство пациентов, наблюдаемых во Французской Гвиане, и почти все случаи СПИДа. Пациенты в FHDH дали информированное согласие на использование своих анонимных данных и на публикацию анонимных результатов. Этот сбор данных был одобрен Национальной Комиссией по информатике и свободе (CNIL) с 1992 года, и эта когорта привела к множеству международных публикаций. Для ВИЧ-отрицательных пациентов в лабораториях и палатах были размещены плакаты и буклеты на разных языках, чтобы проинформировать пациентов о том, что их анонимные результаты могут быть использованы во вспомогательных исследованиях и что они имеют право отказаться без какого-либо влияния на доступ и качество медицинской помощи. .

Результаты

Двести два цитологических и гистологических образца (от 162 пациентов) гистоплазмоза H. capsulatum были диагностированы в нашем отделении в период с января 2005 года по июнь 2020 года. 202 образца включали 153 (75,7%) гистопатологических фиксированных формалином и залитые парафином ткани (биопсийные или хирургические образцы) и 49 (24,3%) цитологический анализ всех органов. 134 пациента (82,7%) были ВИЧ-положительными, 15 пациентов (9,3%) получали лечение иммунодепрессантами (длительное лечение стероидами, анти-TNF и химиотерапия) и 13 пациентов (8%) были иммунокомпетентными без известного иммунодефицита. статус на момент диагностики.В случаях ВИЧ количество CD4 + клеток на момент цитологического или гистопатологического диагноза колебалось от 0 до 668 мм ³ . В таблице 1 обобщены гистопатологические данные 153 H. capsulatum положительных тканей, а в таблице 2 приведены 49 цитологических методов, использованных для обнаружения H. capsulatum .

Таблица 1 В этой таблице обобщены гистопатологические данные 153 H. capsulatum положительных тканей.

Таблица 2 В этой таблице приведены 49 цитологических методов, используемых для обнаружения H.capsulatum в нашей серии.

Легочный гистоплазмоз

Мы диагностировали легочный гистоплазмоз в 26/202 (12,8%) образцах, состоящих из 24 биоптатов БАЛ и 2 биопсий бронхов. В двух биопсиях бронхов участвовали два пациента с ВИЧ с CD4 на 124 и 30 мм. ³ . В обоих образцах была обнаружена туберкулоидная форма, связанная с внутриклеточной H. capsulatum (PAS + и / или Gomori-Grocott +).

24 жидкости БАЛ касались 23 пациентов с ослабленным иммунитетом и одного пациента с иммунодефицитом.Среди 23 пациентов с ослабленным иммунитетом и БАЛ было 22 пациента с ВИЧ и один пациент после трансплантации почки, получавший иммунодепрессанты, у которых был БАЛ, потому что он страдал от лихорадки и диффузных легочных микроузлов.

Клеточная формула всех 24 патологических БАЛ состояла в основном из макрофагов с процентным содержанием клеточности от 55 до 85% (в норме> 80%). На втором месте оказались нейтрофилы с клеточностью от 2 до 30% (в норме <5%), за ними следуют лимфоциты с клеточностью от 8 до 18% (в норме <10%).Присутствие плазматических клеток и эозинофилов было случайным. На рисунке 1 показан случай легочного гистоплазмоза, диагностированного с помощью БАЛ.

Рис. 1 H. capsulatum — это небольшие сферические или яйцевидные дрожжи размером от 2 до 6 мкм, характеризующиеся своей способностью совершать диморфный переход, чтобы проникать в макрофаги хозяина, выживать внутриклеточно и размножаться во время активной инфекции. (A) Легочный гистоплазмоз: цитология БАЛ показывает макрофаги с многочисленными внутриклеточными H.capsulatum (окраска Гомори-Грокотта x400). (B) Диссеминированный гистоплазмоз: внеклеточный H. capsulatum из мазка крови (окраска по Гомори-Грокотту x1500).

Мы регулярно проводили окрашивание по Цилю-Нильсену и иммунохимическое исследование с антителом против Pneumocystis jiroveci на биопсиях БАЛ и бронхов пациентов с ВИЧ для выявления коинфекции туберкулеза и пневмоцистоза соответственно. Гистоплазмоз был связан с наличием Mycobacterium tuberculosis в одном и том же цитологическом образце в двух случаях, Pneumocystis jiroveci в одном случае и кандидоза в двух случаях.

Гистоплазмоз костного мозга

Поражение костного мозга гистоплазмозом диагностировано в 14 (2%) образцах (8 аспирационных и 6 биопсийных). Это часто было связано с цитопенией (анемией, нейтропенией и тромбоцитопенией), а иногда и с панцитопенией. Туберкулоидная форма без некроза присутствовала в 4 из 6 биоптатов костного мозга. Две оставшиеся биопсии выявили анергическую форму в одном случае и промежуточную форму во втором. На рисунке 1 показан случай диссеминированного гистоплазмоза, диагностированного по мазку крови.

Гистоплазмоз лимфатических узлов

Микроскопический анализ подтвердил поражение лимфатических узлов H. capsulatum в 42 образцах (31 гистология и 11 цитология). 11 гистологических образцов состояли из 2 биопсий и 9 хирургических образцов лимфатических узлов. Гистопатологический анализ 31 лимфатического узла показал различный гистологический вид. Наиболее часто встречалась туберкулоидная форма (24/31, 77,4%). Интересно, что гистологический вариант, полностью имитирующий туберкулез с эпителиоидными гранулемами, многоядерными гигантскими клетками и казеозным некрозом, был обнаружен в 10 из 24 туберкулоидных форм, за ним следует менее типичный гранулематозный вариант, в котором гигантские клетки и некроз отсутствовали в 8 случаях, а затем — негранулематозное гистиоцитарное воспаление сформировалось в 6 случаях (рис. 2).Остальные 7 лимфатических узлов показали неспецифический фолликулярный или синусальный гистиоцитарный гиперпластический лимфаденит.

Рисунок 2 Туберкулоидный тип гистоплазмоза. (A) Туберкулоидная гранулема лимфатического узла идеально имитирует туберкулез с эпителиоидными клетками, многоядерными гигантскими клетками и казеозным некрозом (окраска HES x200). (B) Несколько внутриклеточных H. capsulatum (черная стрелка) в периферических слоях туберкулоидной гранулемы лимфатического узла (окраска Гомори-Грокотта x 400) с пятном фокусировки (красная стрелка x1000). (C) Биопсия жабр показывает менее типичную гранулему с макрофагами, некоторые эпителиоидные клетки и несколько многоядерных гигантских клеток и кальцификатов без некроза (окраска HES x400). (D) Умеренное количество внутриклеточных H. capsulatum (две черные стрелки) из той же жаберной биопсии (окраска по Гомори-Грокотту x 600) с пятном фокусировки (две красные стрелки x1000).

При поражении лимфатических узлов (цитологические и гистологические образцы) было обнаружено H. capsulatum с помощью специального окрашивания Gomori-Grocott и PAS +, которое обычно выполнялось у пациентов с ВИЧ.

Окрашивание по Цилю-Нильсену позволило диагностировать коинфекцию гистоплазмоз-туберкулез в 3 случаях. Один случай гистоплазмоза лимфатических узлов был связан с Т-клеточной лимфомой у пациента с инфекцией HTLV-1.

Пищеварительный гистоплазмоз

По нашему опыту, пищеварительный тракт оказался наиболее пораженным гистоплазмозом органом. Семьдесят восемь из 202 положительных образцов (38,5%) относились к пищеварительному тракту (73 биопсии и 5 хирургических образцов). Наиболее частыми эндоскопическими находками были множественные язвы слизистой оболочки пищеварительного тракта (56/78 случаев, 71.7%). Три из пяти хирургических образцов были связаны с перфорацией теменной поверхности, а в двух случаях — с псевдотуморальной фиброзно-воспалительной окклюзией кишечника.

Ободочная кишка была органом, наиболее пораженным гистоплазмозом (53/78 случаев, 70%), за которым следовала тонкая кишка (14/78 случаев, 18%). Реже поражались другие участки: пищевод (3/78 случаев, 3,8%), желудок (4/78 случаев, 5,2%), прямая кишка (2/78 случаев, 2,5%) и анальная область (2/78 случаев, 2,5%). Сопутствующие колики и поражение кишечника наблюдались в 6 случаях, и только в 1 случае колики и поражение пищевода.

Количество микроорганизмов было выше при гистоплазмозе пищеварительной системы, чем в других органах, с максимумом для биопсии толстой кишки (количество H. capsulatum на поле светового микроскопа при увеличении × 400). Кроме того, в этих образцах гистоплазмы наблюдались в цитоплазме гистиоцитов или свободно в строме. Во всех положительных образцах наблюдали воспаление лимфоцитов и гистиоцитов от умеренной до выраженной интенсивности. Тем не менее, туберкулоидная эпителиоидная гранулематозная форма присутствовала в 16/78 (20,5%) образцах, включая 14 образцов толстой кишки и 2 образца тонкой кишки.Наличие многоядерных гигантских клеток наблюдалось только в 3 из 16 случаев. H. capsulatum дрожжи присутствовали в основном в периферических слоях рядом с гранулемой. В верхних отделах желудочно-кишечного тракта гранулем не обнаружено. Кроме того, наблюдались смешанные воспалительные инфильтраты, содержащие плазматические клетки, нейтрофилы и эозинофилы. На рисунке 3 показана анергическая форма гистоплазмоза толстой кишки.

Рисунок 3 Анергический тип гистоплазмоза. (A) Биопсия толстой кишки показывает промежуточный умеренный и полиморфный воспалительный инфильтрат, включая лимфоциты, плазматические клетки и некоторые макрофаги (окраска HES x200). (B) Многочисленные внутриклеточные и внеклеточные H. capsulatum из одной и той же биопсии (окраска Гомори-Грокотта x600, с пятном фокусировки x1500).

Гистоплазмоз печени

За последние 15 лет в нашем отделении было диагностировано одиннадцать случаев гистоплазмоза печени. Все одиннадцать пациентов были ВИЧ-инфицированными, у них была лихорадка, холестаз и изменилось общее состояние. При гистологическом исследовании ткань печени была местом умеренных или выраженных лимфогистиоцитарных воспалительных инфильтратов и / или эпителиоидных гранулем без некроза (туберкулоидная форма) в 9 из 11 случаев.Два оставшихся случая соответствовали довольно анергической форме. Синусоидальная гиперплазия клеток Купфера также наблюдалась в 5 случаях. H. capsulatum были внутриклеточными и иногда наблюдались в просвете синусоиды в обоих случаях анергической формы.

Кожно-слизистый гистоплазмоз

Гистологический анализ выявил присутствие микроорганизмов H. capsulatum в 16 биоптатах слизистых и кожных покровов (12 биопсий кожи, 3 биопсии слизистой оболочки полости рта и 1 биопсия слизистой оболочки половых органов).Интересно, что туберкулоидная форма, связанная с эпителиоидными гранулемами и многоядерными гигантскими клетками, была наиболее частой формой (9/15, 60%). Некроз постоянно отсутствовал. Промежуточная форма наблюдалась в 6 случаях (40%). На рисунке 4 показаны промежуточные и последующие случаи кожного гистоплазмоза.

Рисунок 4 Кожный гистоплазмоз (промежуточный и секвальный типы). (A) Биопсия язвенной кожи показывает выраженный полиморфный дерматит, включая нейтрофилы, лимфоциты, плазматические клетки, эозинофилы и небольшое количество макрофагов (окраска HES x200). (B) Присутствие умеренного количества внутриклеточных и внеклеточных H. capsulatum в дерме из той же биопсии (окраска Гомори-Грокотта x600, с пятном фокусировки x1000). (C) Биопсия кожи показывает особенно фиброзную дерму без значительной воспалительной инфильтрации у пациента с ВИЧ (окраска HES x100). Окрашивание по Гомори-Грокотту показывает очень редкую H. capsulatum (черная стрелка) в дерме (окраска Гомори-Грокотта x600, с пятном фокусировки и красной стрелкой x1000).

Различные локализации гистоплазмоза были диагностированы отделением патологии за последние 15 лет, включая спинномозговую жидкость, которая соответствует поражению центральной нервной системы (1 случай), перитонеальная жидкость (3 случая), цитология поражения предстательной железы (1 случай) и Мазок периферической крови у пациента с диссеминированным гистоплазмозом. В нашей серии было обнаружено семь биоптатов гистоплазмоза ЛОР-органов (3 гортани, 1 полость, 1 носовая ямка, 1 миндалина и 1 язык). Мы также диагностировали два синовиальных гистоплазмоза, один из которых стал предметом недавнего отчета (Gaume et al., 2017).

Обсуждение

В отделении патологии Госпитального центра Кайенны Андре Роземона во Французской Гвиане последовательные пациенты с диагнозом гистоплазмоз почти всегда имели иммунодефицит, в основном из-за поздней стадии ВИЧ-инфекции. Появление гистоплазмоза у пациентов, страдающих онкологическими заболеваниями или принимающих иммунодепрессанты, также подчеркивает, что эту инфекцию следует систематически подозревать в эндемичных районах, и это подозрение должно привести к специальным исследованиям для ее выявления.

В этом обзоре более 15 лет работы в главной больнице Французской Гвианы мы сообщили о цитопатологических и гистопатологических аспектах гистоплазмоза, диагностированных с помощью световой микроскопии. Насколько нам известно, это самая большая серия патологических образцов с диагнозом гистоплазмоз. Частота различных типов выборок могла отражать местные организационные особенности. Следовательно, первые клиницисты должны проявлять инициативу, чтобы получить образцы тканей для грибковой культуры или патологии.После взятия пробы ее следует разделить и погрузить в формалин при патологии, тогда как при культивировании грибов этого делать нельзя. Эти аспекты нетривиальны, они требуют осведомленности и особой организации, которая позволяет пациентам и врачам пользоваться как минимум двумя дополнительными диагностическими методами. Во Французской Гвиане врачи, и особенно гастроэнтерологи, всегда предлагали выполнить эндоскопию для изучения диарейных заболеваний, вызванных ВИЧ, тем самым выявляя значительное количество случаев гистоплазмоза, что, по-видимому, объясняет большое количество случаев заболевания желудочно-кишечным трактом.

Мы описали патологические находки в популяции с иммунодефицитом, иммунное состояние которой может иметь специфические особенности.

Мы обнаружили, что Histoplasma может быть обнаружена внутри и под слизистой оболочкой желудочно-кишечного тракта у пациентов с множественными эндоскопическими язвами. Язвы были связаны с большим количеством дрожжевых грибков H. capsulatum и лихорадкой. В язвах дрожжи часто присутствовали вне макрофагов или даже были связаны в небольшие цепочки, что является вероятным признаком интенсивной репликации грибов и / или некроза тканей.

Туберкулоидная форма была наиболее распространенной гистологической формой, обнаруживаемой во всех органах. Эта гранулематозная форма встречается как у иммунокомпетентных, так и у пациентов с ослабленным иммунитетом. Тем не менее, типичный туберкулоидный вид, связанный как с хорошо сформированными эпителиоидными гранулемами, так и с многоядерными гигантскими клетками с казеозным некрозом или без него, встречался не так часто, что уже подчеркивалось в предыдущих исследованиях, проведенных только на пищеварительном и печеночном гистоплазмозе (Lamps et al., 2000). Гранулемы тесно связаны с высокой грибковой нагрузкой, что легко позволяет поставить диагноз. Однако низкие грибковые нагрузки с <1 дрожжей H. capsulatum на микроскопическое поле × 400, без какого-либо реального воспалительного инфильтрата, не являются редкостью и должны быть диагностированы с помощью окрашивания по Гомори-Грокотту, масляной линзы с большим увеличением (× 1000). ), чтобы избежать путаницы с другими грибковыми дрожжами.

В этой серии мы сообщили о двух случаях гистоплазмоза, диагностированных после окклюзии толстой и тонкой кишки хроническими фиброзно-воспалительными массами псевдотуморального вида.Учитывая разнообразие грибковой нагрузки и воспаления на предметных стеклах, патологи должны иметь опыт идентификации этих дрожжей. В целом редкость фиброза и преобладание туберкулоидных форм предполагает, что развитие инфекций обычно может быть подострым (от 1 до 3 месяцев), поскольку фиброзные поражения обычно связаны с хроническими инфекциями (6 месяцев). Редкость фиброза, по-видимому, также является следствием подавления иммунитета, которое уменьшает воспаление. Это согласуется с наблюдениями за сезонностью, согласно которым значительная часть случаев гистоплазмоза приходилась на случаев инфицирования de novo (Hanf et al., 2010).

Диагностика гистоплазмоза не всегда проста. Большинство данных было получено по эпидемиям среди преимущественно иммунокомпетентных североамериканских популяций с поражением легких. Пациенты в Южной Америке и в нашей серии исследований во Французской Гвиане в основном имели ослабленный иммунитет. Хотя посев является наиболее убедительным доказательством инфекции, он может быть медленным, несмотря на недавние улучшения в питательных средах, и требует наличия лабораторий уровня BSL 3. Кроме того, используемые в настоящее время антитела основаны на H.capsulatum из США, что может быть недостаточно точным для штаммов Амазонки. Исследования показали замечательный полиморфизм штаммов H. capsulatum в Бразилии, при этом генетические различия с американскими штаммами приводят к возможным различиям в клинических и лабораторных результатах (Karimi et al., 2002; Zancopé-Oliveira et al., 2005).

Американское исследование 16 пациентов с ослабленным иммунитетом показало, что гистология является наиболее полезной диагностической процедурой (Kaufman, 1992).Поскольку у большинства наших пациентов наблюдаются серьезные системные симптомы, требующие немедленной помощи, комбинация нескольких лабораторных методов, таких как прямое исследование с окрашиванием MGG, посев на агаре с декстрозой Сабуро, исследование патологических образцов (цитология и гистология), окрашенных PAS или Gomori- Grocott, PCR, Histoplasma антиген (галактоманнановый антиген) или серологическое исследование кажется необходимым. Информация об эффективности гистопатологических исследований при диагностике гистоплазмоза скудна.Цифры, содержащиеся в литературе, относятся в основном к результатам, полученным в основном из образцов легких во время эпидемии в Индиане, и подтверждают чувствительность около 60% у пациентов с ослабленным иммунитетом (Wheat, 2006). Напротив, результаты, полученные в эндемичной популяции Южной Америки, показывают замечательную начальную чувствительность у 158 пациентов, включая 27 пациентов с ослабленным иммунитетом (Mata-Essayag et al., 2008). Этот результат подчеркивает потребность в патологоанатомах, имеющих опыт диагностики инфекционных агентов.

Предыдущие исследования, основанные на результатах вскрытия, подтверждают, что поражение желудочно-кишечного тракта было обычным явлением при диссеминированном гистоплазмозе (Silverman et al., 1955; Queiroz and Siqueira, 1975; Goodwin et al., 1980). Однако в более ранних исследованиях с участием в основном иммунокомпетентных пациентов он вызывал симптомы только у нескольких пациентов (3–12%) (Suh et al., 2001), что, вероятно, объясняет, почему образцы из желудочно-кишечного тракта редко используются для диагностики гистоплазмоза в повседневной практике. неэндемичные районы.

Гистоплазменная инфекция обычно поражает желудочно-кишечный тракт. В случае подозрения на гистоплазмоз у пациентов, сообщающих о диарее или других пищеварительных симптомах, в нашем институте часто проводились эндоскопия верхних отделов тракта и илеоколоноскопия. В то время как образцы из верхних отделов желудочно-кишечного тракта, взятые одновременно с постановкой диагноза, часто давали отрицательные результаты, подвздошная кишка и толстая кишка были частыми очагами инфекции. Гистопатология предоставила ценную информацию и оказалась очень чувствительной, вероятно, из-за большого количества обнаруженных там дрожжей.Гистологическое исследование пищеварительного гистоплазмоза может обеспечить быструю диагностику и избежать ложного отрицания из-за возможных заражающих грибковых организмов, таких как дрожжи Candida , которые в культуральном бульоне растут быстрее, чем гистоплазмоз.

Аналогичным образом цитологические и гистопатологические исследования показали высокую чувствительность при гистоплазмозе легких. По нашему опыту, цитологическое исследование жидкости БАЛ позволяет диагностировать гистоплазмоз легких и выявляет H.capsulatum микроорганизмов в макрофагах при окрашивании PAS и / или по Гомори-Грокотту.

В нашей серии туберкулоидная форма была наиболее частой гистопатологической находкой при биопсии гистоплазмоза печени (9 из 11 образцов, 81,8%). Эти данные интересны, потому что, в отличие от большинства ранее опубликованных случаев, эта серия включала образцы ткани печени живых госпитализированных пациентов, а не образцы вскрытия.

Аспирация костного мозга оказалась очень эффективной в диагностике H.capsulatum , и легко обнаружил положительные дрожжи Gomori-Grocott.

Наконец, при поиске H. capsulatum нельзя пренебрегать поиском других патогенов, особенно у пациентов с ослабленным иммунитетом. В нашей серии гистоплазмоз был связан с другими инфекционными заболеваниями, включая токсоплазмоз, цитомегаловирус , вирус Эпштейна-Барра , пневмоцистис , генитальный герпес, лейшманиоз, сифилис, болезнь Шагаса, местный или системный, анкилостомоз, лихорадку денге. , и криптококкоз.Обнаружение системных бактериальных инфекций, таких как Salmonella , Pseudomonas и Klebsiella , также было обычным явлением во время госпитализации.

В целом, наши результаты показывают хорошую эффективность патологических анализов в популяции, в которой преобладали пациенты с ослабленным иммунитетом, благодаря большому количеству положительных цитологических и гистологических образцов, а также опыту, полученному группой патологов в ежедневном поиске Histoplasma микроорганизмов.Цитологический и / или гистопатологический анализ со средней продолжительностью 3 дня между сбором образца и получением результатов является относительно быстрым и надежным диагностическим инструментом для гистоплазмоза. В сочетании с другими лабораторными анализами патологический анализ с использованием специальных стандартных красок (PAS и Gomori-Grocott) особенно полезен и точен при желудочно-кишечном гистоплазмозе нижних отделов пищеварительного тракта и легких, а также в других местах гистоплазмоза, таких как печень, кости. костный мозг, лимфатические узлы и кожа.Учитывая разнообразие грибковой нагрузки и цитологические и гистологические данные анализируемых образцов, патолог должен иметь достаточный опыт, чтобы идентифицировать H. capsulatum и систематически рассматривать гистоплазмоз как дифференциальный диагноз у пациентов с ВИЧ. Клиницисты также должны знать о возможности гистоплазмоза и должны стремиться получить образцы тканей, обработанные должным образом, чтобы можно было провести как посев на грибок, так и цитопатологию. Следовательно, руководствуясь клинической картиной, эндоскопия пищеварительной системы, аспирация костного мозга и лимфатических узлов, а также биопсия были стандартными дополнительными исследованиями.Несмотря на то, что возникли большие надежды на расширение масштабов применения новых методов быстрой диагностики, клиницисты должны в полной мере использовать имеющиеся классические методы, которые могут помочь спасти жизни.

Заявление о доступности данных

Исходные материалы, представленные в исследовании, включены в статью / дополнительные материалы. Дальнейшие запросы можно направить соответствующему автору.

Вклад авторов

KD: дизайн исследования, анализ, первый набросок. МН: редактирование и окончательная редакция.ПК, DB, LE, FD, AA, RB, DL, MD: сбор данных и проверка анализа и рукописи. Все авторы внесли свой вклад в статью и одобрили представленную версию.

Конфликт интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось в отсутствие каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Ссылки

Кано М. В., Хаджех Р. А. (2001). Эпидемиология гистоплазмоза: обзор. Семин. Респираторная инфекция 16 (2), 109–118. doi: 10.1053 / srin.2001.24241

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Couppie P., Aznar C., Carme B., Nacher M. (2006). Американский гистоплазмоз в развивающихся странах с особым вниманием к пациентам с ВИЧ: диагностика, лечение и прогноз. Curr. Opin. Заразить. Дис. 19, 443–449. doi: 10.1097 / 01.qco.0000244049.15888.b9

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Couppié P., Герцег К., Борн-Ватрин М., Томас В., Бланше Д., Алсибай К. Д. и др. (2019). Широкий клинический спектр распространенного гистоплазмоза у ВИЧ-инфицированных пациентов: 30-летний опыт работы во Французской Гвиане. J. Fungi 5, 115. doi: 10.3390 / jof5040115

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Дамаскено Л. С., де Мело Тейшейра М., Баркер Б. М., Алмейда М. А., де Медейрос Мунис М., Пиццини К. В. и др. (2019). Новое клиническое и двойное инфицирование генотипами Histoplasma capsulatum у пациентов с ВИЧ из Северо-Востока, Бразилия. Sci. Отчет 9, 1–12. doi: 10.1038 / s41598-019-48111-6

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Дарлинг С. Т. (1906). Общая протозойная инфекция, вызывающая псевдотуберкулезные образования в легких и очаговые некрозы в печени, селезенке и лимфатических узлах. J. Am. Med. Доц. 46, 1283–1285. doi: 10.1001 / jama.1906.62510440037003

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Эммонс К. У., Эшберн Л. Л. (1948). Гистоплазмоз у диких крыс: возникновение и гистопатология. Представитель общественного здравоохранения (1896–1970) 63, 1416–1422. doi: 10.2307 / 4586744

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Gaume M., Marie-Hardy L., Larousserie F., Lavielle M., Roux C., Leclerc P., et al. (2017). Histoplasmose ostéo-articulaire à Histoplasma capsulatum. Med Maladies Infectieuses 47, 554–557. doi: 10.1016 / j.medmal.2017.05.009

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Гудвин Р. А. Младший, Шапиро Дж. Л., Турман Г. Х., Турман С.С., Деспрез Р. М. (1980). Диссеминированный гистоплазмоз: клинико-патологические корреляции. Медицина 59, 1–33. DOI: 10.1097 / 00005792-198001000-00001

PubMed Реферат | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ханф М., Аденис А., Куппи П., Карме Б., Начер М. (2010). ВИЧ-ассоциированный гистоплазмоз во Французской Гвиане: недавняя инфекция или реактивация? AIDS 24, 1777–1778. doi: 10.1097 / QAD.0b013e32833999c9

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хубер Ф., Nacher M., Aznar C., Pierre-Demar M., El Guedj M., Vaz T., et al. (2008). Связанная со СПИДом Histoplasma capsulatum var. capsulatum: 25-летний опыт Французской Гвианы. AIDS 22, 1047–1053. doi: 10.1097 / QAD.0b013e3282ffde67

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Карими К., Пшеничный Л. Дж., Коннолли П., Клауд Г., Хаджех Р., Пшеница Э. и др. (2002). Различия в гистоплазмозе у пациентов с синдромом приобретенного иммунодефицита в США и Бразилии. J. Infect. Дис. 186, 1655–1660. doi: 10.1086 / 345724

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лампы Л. В., Молина К. П., Уэст А. Б., Хаггитт Р. С., Скотт М. А. (2000). Патологический спектр гистоплазмоза желудочно-кишечного тракта и печени. Am. J. Clin. Патол. 113, 64–72. doi: 10.1309 / X0Y2-P3GY-TWE8-DM02

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Mata-Essayag S., Colella M. T., Roselló A., de Capriles C.Х., Ландаэта М. Э., де Салазар С. П. и др. (2008). Гистоплазмоз: исследование 158 случаев в Венесуэле 2000-2005 гг. Медицина 87, 193–202. doi: 10.1097 / MD.0b013e31817fa2a8

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Morote S., Nacher M., Blaizot R., Ntab B., Blanchet D., Drak Alsibai K., et al. (2020). Временные тенденции кожно-слизистого гистоплазмоза у людей, живущих с ВИЧ, во Французской Гвиане: ранняя диагностика устраняет дермотропизм южноамериканского штамма. PloS Negl. Троп. Дис. 14 (10), e0008663. doi: 10.1371 / journal.pntd.0008663

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Nacher M., Adenis A., Adriouch L., Dufour J., Papot E., Hanf M., et al. (2011). Что такое СПИД в Амазонии и Гвианах? Установление бремени диссеминированного гистоплазмоза. Am. J. Trop. Med. Hyg 84, 239–240. doi: 10.4269 / ajtmh.2011.10-0251

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Начер М., Аденис А., Бланше Д., Вантилке В., Демар М., Басурко С. и др. (2014). Факторы риска диссеминированного гистоплазмоза в когорте ВИЧ-инфицированных пациентов во Французской Гвиане. PloS Negl. Троп. Дис. 8, e2638. doi: 10.1371 / journal.pntd.0002638

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Nacher M., Adriouch L., Huber F., Vantilcke V., Djossou F., Elenga N., et al. (2018a). Моделирование эпидемии ВИЧ и непрерывной помощи во Французской Гвиане. PloS One 13, e0197990.doi: 10.1371 / journal.pone.0197990

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Nacher M., Blanchet D., Bongomin F., Chakrabarti A., Couppié P., Demar M., et al. (2018b). Тесты на обнаружение антигена Histoplasma capsulatum как важный диагностический инструмент для пациентов с продвинутой стадией ВИЧ-инфекции в странах с низким и средним уровнем доходов: систематический обзор исследований диагностической точности. PloS Negl. Троп. Дис. 12, e0006802. doi: 10.1371 / journal.pntd.0006802

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Начер М., Аденис А., Гуармит Б., Лукарелли А., Бланше Д., Демар М. и др. (2020). Что такое СПИД в Амазонии и Гвианах в эпоху 90-90-90 годов? PLoS One 15 (7), e0236368. doi: 10.1371 / journal.pone.0236368

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Кейруш А. К., Сикейра Л. А. (1975). Histoplasmose em material de autópsia. Rev. Patol Trop. 4, 107–114.

Google Scholar

Родригес А. М., Бил М. А., Хаген Ф., Фишер М.С., Делла Терра П. П., де Хуг С. и др. (2020). Глобальная эпидемиология новых видов Histoplasma в последние годы. Stud. Mycol . doi: 10.1016 / j.simyco.2020.02.001

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Сепульведа В. Э., Маркес Р., Туриссини Д. А., Гольдман В. Э., Матуте Д. Р. (2017). Последовательности генома выявляют загадочное видообразование в человеческом патогене Histoplasma capsulatum. МБио 8 (6), e01339-17. doi: 10.1128 / mBio.01339-17

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Тейшейра М.де М., Патане Дж. С. Л., Тейлор М. Л., Гомес Б. Л., Теодоро Р. К., де Хуг С. и др. (2016). Мировое филогенетическое распространение и динамика популяций рода Histoplasma. PloS Заброшенная тропа. Дис. 10, e0004732. doi: 10.1371 / journal.pntd.0004732

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Тобон А. М., Агудело К. А., Росеро Д. С., Очоа Дж. Э., Де Беду К., Сулуага А. и др. (2005). Диссеминированный гистоплазмоз: сравнительное исследование пациентов с синдромом приобретенного иммунодефицита и людей, инфицированных вирусом иммунодефицита человека. Am. J. Trop. Med. Hyg 73, 576–582. doi: 10.4269 / ajtmh.2005.73.576

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Вейдерт Дж. А., Ван Натта Т. Л., Де Янг Б. Р. (2007). Сравнение грибковой культуры и хирургического патологического исследования при обнаружении гистоплазмы в хирургически удаленных легочных гранулемах. Arch. Патол. Лаборатория. Med. 131, 780–783. DOI: 131 [780: COFCVS] 2.0.CO; 2

PubMed Аннотация | Google Scholar

Woods J.П., Хайнеке Э. Л., Люке Дж. У., Мальдонадо Э., Нг Дж. З., Реталлак Д. М. и др. (2001). Патогенез Histoplasma capsulatum. Семин. Респир. Заразить . 16 (2), 91–101. doi: 10.1053 / srin.2001.24239

PubMed Аннотация | Google Scholar

Занкопе-Оливейра Р. М., Мораис и Силва Таварес П., Медейрос Мунис М. (2005). Генетическое разнообразие штаммов Histoplasma capsulatum в Бразилии. FEMS Immunol. Med. Microbiol. 45, 443–449. DOI: 10.1016 / j.femsim.2005.05.018

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Zida A., Niamba P., Barro-Traoré F., Korsaga-Some N., Tapsoba P., Briegel J., et al. (2015). Диссеминированный гистоплазмоз, вызванный Histoplasma capsulatum var. duboisii у пациента, не инфицированного ВИЧ, в Буркина-Фасо: клинический случай. J. Mycol Med 25, 159–162. doi: 10.1016 / j.mycmed.2015.03.002

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Сравнение цитологических и гистологических исследований в разных частях матки лошади — исследование in vitro

https: // doi.org / 10.1016 / j.theriogenology.2013.02.007Получить права и содержание

Реферат

Эндометрит представляет собой серьезную проблему при содержании кобыл. Гистологическое присутствие полиморфноядерных нейтрофилов (PMN) в компактном слое эндометрия принято в качестве эталона для диагностики эндометрита у кобыл. Целью этого исследования было определить распределение PMN в разных местах отбора проб матки с помощью цитологических исследований и сравнить его с количеством PMN в биоптатах эндометрия в соответствующем месте.Цитологические образцы и образцы эндометрия были получены из 37 маток в течение 2 ± 1 часа после убоя через небольшие разрезы из пяти различных заранее определенных мест каждой матки. Цитологические образцы мазали на предметные стекла, окрашивали и классифицировали как отрицательные (<2% PMN) или положительные (≥2% PMN) на эндометрит. Гистологически количество PMN было подсчитано в трех полях с высоким увеличением опытным патологом и классифицировано как положительное для этого типа эндометрита, если ≥5 PMN произошло в трех полях с высоким увеличением (увеличение × 40).Биопсии были также оценены на предмет лимфоплазматического клеточного эндометрита, перигландулярного фиброза (эндометроза) и ангиосклероза. Распространенность положительных цитологических и гистологических образцов составила 14,6% и 17,8% соответственно. Было обнаружено удовлетворительное согласие между двумя диагностическими методами ( k = 0,29; P <0,01). Количество PMN различалось в разных местах отбора проб, что приводило к положительным и отрицательным местоположениям в матке с положительной оценкой, как в матке с цитологически положительной оценкой (8/10), так и в матке с гистологически положительной оценкой (13/14).Не было обнаружено значительных различий в количестве PMN в разных местах ни при цитологическом (P = 0,78), ни при гистологическом (P = 0,79) исследовании. Кроме того, не наблюдалось значительных различий в оценке эндометроза (P = 0,96) и ангиосклероза (P = 0,67) в пределах локализации.

В заключение, номера PMN при цитологическом исследовании эндометрия показали справедливое согласие с наличием PMN в компактном слое при гистологическом исследовании в том же месте отбора пробы.Хотя при использовании обоих методов (цитологии и гистологии) были обнаружены вариации в количестве PMN, статистически значимых различий в разных местах не обнаружено (P = 0,78; P = 0,79), что означает, что решение о взятии более одного образца должно быть принято.