Анализ на гистологию — консультации и диагностика заболеваний, качественное лечение в Израильских клиниках

Получить консультацию

Анализ на гистологию — сверхточный метод досконального изучения тканей на предмет наличия опасных и доброкачественных новообразований, патологий, особенностей строения и развития клеток. Данное исследование отличается повышенной точностью результатов и максимальной информативностью, поэтому на основе анализов ставят наиболее верные диагнозы и разрабатываются схемы высокоэффективного лечения.

Расшифровка анализа на гистологию

Каким образом проводится анализ на гистологию?

Современный анализ на гистологию включает несколько этапов:

1. Взятие у пациента образца. Образцы для анализа на гистологию бывают различные (всё зависит от органа, нуждающегося в исследовании). Это могут быть мазочки, отпечатки, плёнки, сверхтонкие срезы.
2. Полученный фрагмент ткани фиксируют в специальном химсоставе.
3. Образец окрашивают гематоксилином или эозином, чтобы улучшить контрастность структуры ткани.
4. Исследование образчиков под электронным или другим сверхмощным микроскопом для выявления наличия скопления болезнетворных клеток и опасных образований.

Что показывает анализ гистологии?

Гистологические исследования довольно дорогостоящие, но анализ гистологии на 100 % оправдывает себя в таких случаях:

• Когда необходимо подтвердить или опровергнуть наличие раковых образований.
• Когда нужно выявить причины неудачных беременностей или бесплодия у женщин.
• Для полного изучения состояния органов женской половой системы.
• Когда в органах прогрессирует воспалительных процесс, но причину сложно установить.
• После полостных операций.

Как долго готовятся анализы на гистологию?

Результат гистологических исследований и анализов на гистологию может быть известен уже через 5–10 дней, однако это усредненные сроки, и каждый медцентр предлагает индивидуальное время предоставления результатов анализа гистологии. Если клиника не обладает собственной лабораторией, тогда сроки увеличиваются на 2–4 дня (время на отправку и доставку образцов).

Также у пациентов есть возможность провести экспресс-анализ гистологии в течение нескольких часов. Это делается в случае, когда во время полостной операции у хирурга появляются обоснованные подозрения на наличие онкологических клеток в тканях.

Анализ на гистологию: расшифровка

В заключении (расшифровке анализа гистологии) указываются все результаты проведённого анализа на гистологию, однако правильно расшифровать медтермины способны только специалисты. Обратившись к врачу, пациент может получить полную информацию о состоянии здоровья, а в случае обнаружения опасных заболеваний — квалифицированную помощь.

Сколько стоит расшифровка анализа гистологии?

Конечно, цена расшифровки гистологического анализа зависит от клиники, в который вы его проводите. Если вы хотите получить качественное второе мнение онколога, то необходимо забрать блоки с гистологическим материалом и принести либо отправить в другую клинику. Если повторное заключение и расшифровка анализа на гистологию проводят без гистологического материала — значит это не «второе мнение» и не «ревизия гистологии», а подтверждение диагноза одного врача, другим врачом.

Когда речь заходит о такой важной сфере медицины как онкология, расшифровка анализа на гистологию может значительно улучшить ход лечения, а иногда даже спасти жизнь пациенту.

Наша компания BK Medical Logistic предлагает полную ревизию и расшифровку анализа гистологии после специального исследования в израильской клинике, специализированной именно на онкологии и онкологических заболеваниях, с высокотехнологичными лабораториями и компетентными врачами, известными во всем мире.

Цена расшифровки анализа на гистологию может варьироваться, но в среднем это 550-650 долларов США.

Как проводиться повторный анализ на гистологию?

На данный момент, только наша компания может доставить гистологический материал из Украины или России в Израиль на медицинскую экспертизу. Мы используем специальные холодильники и упаковки для того, чтобы результаты анализа на гистологию добрались до клиники в Израиле в целости и сохранности.

После того, как блоки доставлены в Израиль, анализы на гистологию проходят повторную проверку и изучение в лаборатории, после чего, врачом готовится специальное заключение с результатами и расшифровкой гистологии.

Как обратиться по поводу повторного анализа на гистологию?

Даже если вы просто хотите задать интересующие вас вопросы и получить информацию о ревизии анализов на гистологию, вы можете обратиться к нам по телефону, указанному вверху сайта. ЗВОНКИ И КОНСУЛЬТАЦИЯ ПО ЭТОМУ НОМЕРУ — БЕСПЛАТНЫ!

Для жителей каких стран мы можем организовать повторный анализ гистологии?

Компания BK Medical Logistic предоставляет свои услуги в сфере медицинской логистики, ревизии и расшифровке анализа на гистологию в Украине, России, Беларуси и Казахстане.

Гистология

Для диагностики заболеваний используют разные методы исследований. Понять природу новообразования, достоверно отличить здоровые клетки от патологических может гистология. Этот метод диагностики используют на базе клиники «Имидж Лаб» для онкоцитология в гинекологии, эндокринологии, дерматовенерологии, маммологии и других разделах медицины.

Гистология — вид исследования клеток биоматериала, отобранных в ходе биопсии. Многие пациенты путают эти два понятия. Гистология — это исследование, биопсия — процесс забора биоматериала.

Показания для гистологии

1. Определения природы новообразования (злокачественная или доброкачественная опухоль).
2. Выявление причин бесплодия.
3. Мониторинг состояния слизистой при хронических воспалительных процессах в ЖКТ, мочеполовой системе и других органах.

Преимущества метода — точное определение наличия патологических клеток. Для этого часто отбирают пробу на границе здоровых и пораженных тканей органа.

Как проходит процедура

Биоматериал забирают в ходе биопсии. Диагносты  клиники «Имидж Лаб» используют различные способы:

• инцизионной — в ходе оперативного вмешательства забирается вся удаленная опухоль;
• щипково — с помощью эндоскопических щипцов откусывается часть новообразования;
• пункционно — толстая игла делает прокол и отбирает клетки из опухоли. Применяют для забора проб из печени и предстательной железы;
• аспирационно — специальная трубка отсасывает частичку полипа. Применяют при заборе проб из щитовидной железы, миоматозных новообразований;
• эксцизионно — удаленную опухоль, пораженный и соседние органы со следами прорастания рака отправляют на исследование;
• трепан-биопсия — взятие проб из костной ткани;
• кюрежат — соскабливание слизистых или эпидермиса;
• мазок — забор клеток слизистой оболочки специальной щеточкой.

Чтобы минимизировать риски для пациента биопсию проводят под контролем УЗИ, цифрового рентгена  или С-дуги рентген аппарата. Для снятия болевых ощущений применяют местную анестезию или делают общий наркоз. Процедура занимает от пары минут до часа. Пациент не нуждается в госпитализации после биопсии.

Как проводят гистологию?

Препарат фиксируют веществом, блокирующим действие ферментов и разрушение тканей. Заливают дальше парафином для уплотнения. Специальный прибор нарезает полученные ткани на ломтики по 8 мм толщиной. Дальше окрашивают. Потом исследуют все образцы под микроскопом. Обычно результаты готовы за 7-10 дней. Для гистологии костей требуется не менее 14 дней.

В критических случаях проводят экспресс-диагностику. Например, если в ходе операции обнаружили опухоль. Тогда биопрепарат изымается, замораживается, нарезается специальным прибором и немедленно исследуется. Экспресс-гистология занимает до 1 часа. Поэтому важно, чтобы клиника имела собственную лабораторию, делающую анализы в ускоренном режиме. Подобная база есть в «Имидж Лаб». Это позволяет комплексно подходить к решению задач и оперативно начинать терапию пациента.

Результаты и расшифровка анализа на гистологию

Клиент на руки получает письменное заключение. На бланке указаны ФИО больного, дата и место забора проб, тип тканей, которые отбирались.

Расшифровать его самостоятельно сложно. Поэтому доктора  клиники «Имидж Лаб» и диагносты на приеме расскажут о дальнейших планах лечения и разработают курс терапии.

Именно гистология служит инструментом сверхранней диагностики онкологии и существенно увеличивает шансы на полное выздоровление от рака.

Сдать анализ на гистологию биопсийного материала и материала, полученного при хирургических вмешательствах

Метод определения
Микроскопия

Исследуемый материал
Смотрите в описании

Доступен выезд на дом

Взятие биоматериала оплачивается отдельно.

Проводятся исследования любого материала, отчуждённого у пациентов с различными патологическими процессами: бронхобиопсии, гастробиопсии, колонобиопсии, биопсии ЛОР-органов и другие биопсии различных органов и тканей, взятые инвазивными и эндоскопическими методами.

Также исследуется операционный материал, органы и ткани, удалённые при различных операциях по поводу онкологических заболеваний, специфических и неспецифических, воспалительных и не воспалительных процессах. При этом даётся гистологический диагноз с оценкой уровня дифференцировки или степени злокачественности опухоли, степени распространённости патологического процесса или клинической стадии, состояние краёв резекции, фоновых изменений.

При диагностических биопсиях даётся микроскопическое описание и нозологическое заключение. В ясных и банальных случаях микроскопическое описание не даётся или ограничивается минимально, заключение ограничивается гистологическим диагнозом.

Гистологический диагноз может быть описательным в тех случаях, когда морфологические изменения не специфичны и не свидетельствуют в пользу какого-либо заболевания или когда недостаточно представляется клиницистами клиническая картина конкретного пациента.

Гистологическое заключение даётся в соответствии с последними гистологическими классификациями ВОЗ и медицинской номенклатурой принятой у нас в стране.

Для качественного исследования необходимо правильно оформлять направление на гистологическое исследование:

• заполнять все указанные в направлении пункты с точным указанием места локализации взятого материала, его связь с окружающими тканями, обязательно указывать основные клинические проявления и давность процесса;




• иссечение кусочков из органов для диагностической биопсии следует проводить исключительно острым инструментом, избегать сжатия пинцетом или зажимом с целью предупреждения разминания и деформации тканей. Не рекомендуется получение биопсийного материла электроинструментами, так как происходит деформация гистологических тканей и диагноз возможно поставить только в предположительной форме;




• объект, взятый для гистологического исследования, помещают в заранее приготовленную ёмкость с фиксирующей жидкостью 10% формалин; 10% формалин наливают в чистую посуду, так, чтобы формалина было не менее чем в 10 раз больше объёма фиксируемого объекта, после чего посуду закрывают герметической крышкой или пробкой. Нельзя применять формалин более высокой концентрации или формалин с вышедшим сроком годности — с белым осадком, нельзя помещать мелкий диагностический материал в посуду из тёмного малопрозрачного стекла с узким горлышком;




• в случаях, когда диагностический материал содержит примесь большого количества крови (соскобы со слизистых оболочек женских половых органов), следует, до помещения в фиксирующую жидкость, освободиться от крови, путём промывки соскобов в ванночке с теплым физиологическим раствором, поместив их в марлевый мешочек, либо промыть тёплой водой под краном, а затем, промокнув излишки промывной жидкости, поместить в фиксатор. При этом соскоб не должен содержать кровь, которая пагубно влияет на обработку материала, уменьшает количество представительного диагностического материала и снижает полноценность гистологического исследования;




• посуда с диагностическим или операционным материалом обязательно маркируется: пишется фамилия, инициалы и возраст пациента, присваивается номер. Маркировка не должна проводиться на крышке, закрывающей посуду;




• фрагменты ткани или органа, полученные при биопсии с диагностической целью, запрещается делить на части и посылать в разные патологоанатомические лаборатории;




• материал для патогистологического исследования должен быть достаточно представительным, а кусочки, после специальной обработки и окраски, сохранять информацию для диагноза или диагностического описания;




• материал в виде слизи, экссудата или крови, а также очень мелкий материал (менее 1 мм) не считается полноценным объектом гистологического исследования.

WMT — клиника высоких технологий, город Краснодар

«Каждый этап гистологического анализа можно назвать ювелирной работой»

Лабораторная диагностика – важнейший этап для постановки точного диагноза, особенно когда речь идет об онкологии. Мы решили подробнее узнать о том, как врачи проводят исследование материалов в лаборатории и поговорили с врачом клинической лабораторной диагностики нашей клиники Еленой Валерьевной Колосовой.

Елена Валерьевна, при подозрении на онкологию врач направляет биоматериалы пациента на гистологическое исследование. Расскажите, что это такое?

Гистологическое исследование – это последняя инстанция в лабораторной диагностике, которая позволяет поставить окончательный точный диагноз. Гистологическим материалом могут быть отдельные органы, части, ткани, органокомплексы. На первый взгляд определить, какой характер имеет новообразование невозможно, и на помощь доктору приходит анализ взятого материала у пациента.

Что можно узнать из полученного биоматериала?

Можно узнать, это «зло» или «добро». Если это «зло», дополнительно можно определить тип опухоли. Особенно это важно, если рак уже обнаружен, так как новообразования по своим проявлениям могут иметь и доброкачественное течение, и агрессивное. Чтобы точно определить тип опухоли, проводится иммуногистохимия – завершающий цикл исследования, который позволяет поставить однозначно достоверный диагноз.

Какое количество материала необходимо для исследования?

Любое. Это может быть кусочек, новообразование, полип, обнаруженный при колоноскопии. Иногда материал берется прямо во время операции, когда врач четко понимает, что удаляет злокачественное образование. Например, при раке молочной железы, раке шейки матки.

Сколько времени занимает получение результата?

Если речь идет о гистологическом исследовании — от 5 до 7 дней. Если это иммуногистохимия — до 10-12 дней.

Как врач клинической лаборатории обрабатывает полученный материал?

Врач-гистолог, получая часть органа, исследует его макроскопически. Это целое производство. Каждый этап гистологического анализа – очень скрупулезный, это даже можно назвать ювелирной работой. Врач-гистолог всегда работает в команде с фельдшером-гистологом. Они как нитка с иголкой – друг без друга не могут.
Фельдшер-гистолог подготавливает материал для последующего анализа. Он делает тончайшие срезы, проработку, фиксацию, окрашивание и другие манипуляции, чтобы предоставить готовый материал доктору.
Обработка материала проводится на уникальном столе с видеофиксацией. Обычно эта технология доступна только для государственных мед.учреждений, но в WMT мы можем в полной мере использовать возможности собственного стола.

В чем Ваш конёк в гинекологической практике?

Я достаточно скромный человек, чтобы сказать, что я лучшая при выполнении какой-то операции (улыбается). Меня привлекает лапароскопическая хирургия, и основное внимание я уделяю органосохраняющим операциям. На самом деле, проще всего удалить орган. Нет органа – нет проблем. Но даже так проблемы могут сохраняться, поэтому если есть возможность сохранить орган и его функции, я стараюсь это сделать.
К тому же, в большинстве случаев пациенты до последнего настроены на такие методы лечения, особенно в молодом репродуктивном возрасте. Когда после выполнения оперативного вмешательства ты даешь пациентке надежду материнства, она беременеет и, у нее рождается здоровый малыш, тогда ты получаешь полное моральное удовлетворение от работы.

В чем уникальность этого стола?

Прежде всего, ручное вмешательство сводится к минимуму. Каждый этап обработки автоматизирован. Второй момент – видеофиксация. Благодаря записи на видеокамеру пациент может отследить весь этап от начала поступления материала в лабораторию до получения окончательного результата, то есть убедиться в достоверности исследования.

Возможно ли отправить результаты исследования в другой город?

У нас есть специальный прибор Pannoramic Scan, он оцифровывает полученные результаты гистологического исследования. Фотографии поступают на сервер и доступны для любого доктора в любой точке России и мира в случае, если мы предоставляем доступ. Как это было раньше: есть результат, но врачи рекомендуют отвезти его к другим специалистам, зачастую в Москву, Санкт-Петербург или за рубеж для подтверждения. Конечно, это очень затратно. А благодаря технологии Pannoramic Scan мы экономим и время пациента, и средства, что немаловажно.

Как эксперт по лабораторной диагностике, что можете пожелать нашим читателям?

Пожелать можно только одного – здоровья. Если возникнет необходимость в нашей помощи, мы ее предоставим на самом высоком уровне. И все равно хочется пожелать, чтобы такой необходимости все-таки было меньше.

Вернуться назад

№AN523ГИЭ, Гистологическое исследование кожи (приготовление препарата (до 6 блоков) + описательная часть) : показатели, норма

Дермато́з (с др. -греч. δέρμα означает «кожа») — это общее название различных неопухолевых заболеваний кожи. Термином обозначают кожные поражения, которые характеризуются определёнными клиническими проявлениями и причинами появления. Могут быть как врождёнными, так и приобретёнными.

1. Общие рекомендации
2. Показания и противопоказания
3. Преаналитика

Гистологическое исследование является одним из важных методов в диагностике дерматологических заболеваний. Оно может быть очень полезным в случаях:

• Заболеваний, для которых гистология на сегодняшний день является единственным надежным методом установления диагноза (фолликулярная дисплазия, себаденит, иммуноопосредованные заболевания и многие другие)
• Заболеваний, которые не отвечают на лечение без видимых на то причин
• Заболеваний, которые проявляются атипичной клиникой
• Заболеваний, для которых другие диагностические методы (цитология, трихоскопия, микологический посев) не дали ожидаемого результата

Исследование считается одним из сложных специализированных разделов патоморфологической диагностики. В силу своей специфики дерматогистопатологическое исследование проводится только патоморфологом, прошедшим профильное послевузовское обучение по данной теме и работающим в тесной связи с дерматологами-клиницистами.

Важно знать, что в дерматогистологии чаще, чем в онкологической гистологии, диагноз нельзя сформулировать однозначно, и ответ будет представлять собой именно морфологическую характеристику процесса с перечнем дифференциальных диагнозов и рекомендаций для уточняющих тестов в комментарии. Это особенность данного исследования, а не показатель неуверенности врача-гистолога. Тем не менее, при правильной технике отбора материала и подробном заполнении сопроводительных данных, гистология позволяет если не поставить единственный и окончательный диагноз, то значительно сузить список дифференциальных диагнозов, что существенно экономит время и деньги по сравнению с эмпирическим подбором лечения по эффекту.

Для дерматогистопатологического исследования подробное и полное заполнение сопроводительной информации играет даже бОльшую роль, чем в гистологии опухолевых заболеваний. Так, внимание следует обратить на:

• Породу и окрас. У собак и, в меньшей степени, кошек, есть очень значительные расхождения в нормальном строении кожи и волос, и некоторые находки в гистологии являются патологией для одних пород и нормой для других. Кроме того, некоторые заболевания кожи имеют выраженные породные предрасположенности.
• Ранее проводимое лечение и то, насколько давно оно было отменено (если отменялось): так, стероиды очень сильно изменяют состав воспалительных клеток вплоть до полного исчезновения важных для постановки диагноза изменений. С другой стороны, если в биопсии обнаружено большое количество бактерий, а антибиотики не были отменены, возможно, потребуется пересмотреть выбор препарата/дозировки/пути введения.
• Распределение поражений и наличие симметричности – ОЧЕНЬ важны. Во многих случаях эта информация позволяет значительно сузить список дифференциальных диагнозов.

Для дерматогистопатологического исследования отправляют кусочки кожи, отобранных техникой биопсии. Биопсия кожи — это хирургическая манипуляция, во время которой вырезают определенный участок кожного покрова. В основном используют 2 биопсийные методики:

• Панч-биопсия (от англ. punch – дырокол, компостер) – метод взятия патологического материала с помощью специального трубчатого скальпеля – панча. Этот метод позволяет получить цилиндрический образец ткани заданной высоты и диаметра.
• Эксцизионная биопсия — полное иссечение очага поражения и примыкающего к нему здорового участка кожи.

Для панч-биопсии в большинстве случаев отдается предпочтение инструменту диаметром 6 мм, но в некоторых сложных локализациях (области век, носового зеркальца, подушечек пальцев у маленьких собак и кошек) может быть целесообразным использование инструмента диаметром 4 мм.

Эксцизионная биопсия применяется в участках кожи, позволяющих адекватное закрытие кожного дефекта, для:

• Крупных очаговых поражений (узелки, обширные язвы и т.п.)
• В некоторых случаях – для везикулярных и пустулезных заболеваний (панч при вращении может разрывать их и делать материал недиагностичным)
• При подозрении на заболевание подкожной клетчатки (панникулит и т.п. – панч может не обеспечить достаточную глубину образца).

Выбор оптимального места для биопсии при обширных поражениях сложен и часто требует консультации с опытным дерматологом и дерматопатологом, но чаще всего оптимальными являются:

• В случае пустулезных заболеваний – интактные (не разорвавшиеся) недавно появившиеся везикулы и пустулы
• В случае обширных алопеций или гипотрихоза – участки с наиболее выраженной утратой волос; для некоторых алопеций оптимально также участок с сохраненной шерстью для сравнения

Часто точность гистологического исследования хронических воспалительных дерматозов зависит от стадии заболевания, во время которой была взята биопсия. Одни и те же дерматозы в острой, подострой и хронической стадиях могут иметь совершенно различные гистологические проявления. Кроме того, при заболеваниях, сопровождающихся полиморфизмом клинических элементов, часто решающую роль играет и то, с какого участка поражения был взят биопсийный материал. Следует избегать центра язвенных поражений, а также участков с известной историей длительного самотравмирования и разлизывания – вторичное бактериальное воспаление может маскировать собой первичный процесс.

Вне зависимости от выбранного метода следует соблюдать следующие рекомендации:

• После извлечения фрагменты кожи следует как можно быстрее поместить в 10% забуференный формалин в отношении не менее 1:10 (образец : формалин), не допуская высыхания, воздействия антисептических средств и других агрессивных веществ
• При подготовке операционного поля нужно избегать протирания поверхности пораженного узла антисептиками – это может привести к отрыву корочек, нарушению целостности пустул, везикул и т.п., а также утрате диагностически значимых микроорганизмов.
• Не использовать панч-биоптаты для изготовления мазков-отпечатков на цитологию – это приводит к тяжелым артефактам при дальнейшем гистологическом исследовании (при необходимости цитологического исследования лучше использовать материал с границ раны после биопсии или провести еще одну биопсию рядом).

Для одного дерматогистологического исследования допускается от 1 до 6 фрагментов, в том числе из разных локализаций (напр., «спина, живот, губа, веко, подушечка лапы»), без дополнительной оплаты за эти локализации. Желательно для образцов из разных локализаций использовать разные контейнеры, чтобы можно было легко определить их при поступлении материала в лабораторию.

За несколько дней до процедуры биопсии следует приостановить курс антикоагулянтов из-за повышенного риска кровотечения, а также стероидных и нестероидных противовоспалительных средств, так как они могут исказить результат за счет «смазанности» морфологических проявлений патологии. В день взятия образца не следует наносить на поверхность исследуемого участка кожи лекарственные средства местного применения.

Сроки исполнения: 14 дней.

Материал для исследования: биоптаты кожи.

Метод исследования: световая микроскопия.

Показания: гистологическое исследование с целью постановки диагноза.

Противопоказания: патология свертываемости крови; острый воспалительный процесс в месте забора ткани; гнойничковое поражение; острое инфекционное общее заболевание; индивидуальная реакция на местные анестетики.

Метод отбора: провести процедуру биопсии одним из вышеперечисленных способов.

Преаналитика: Биоптаты поместить в контейнер (гистопот), заполненный соответствующим объемом забуференного 10% раствора формалина. Соотношение биоматериал: формалин должно быть не менее 1:10. Подписать контейнер – вид, кличка животного, фамилия владельца, анатомическая локализация. Заполнить все графы направительного бланка с ОБЕИХ сторон! Приложить описание и/или фото патологического процесса, результаты лабораторных исследований. Температурный режим транспортировки в лабораторию +2°С…+8°С (синий пакет). Не замораживать!

Форма выдачи результата: бланк с макро- и микроописанием структуры ткани, а также с описанием процесса, происходившего в тканях in vivo, предположительным диагнозом и рекомендациями по лечению.

KDL. Гистологические исследования. Анализы и цены

Алергология. ImmunoCAP. Индивидуальные аллергены, IgE

Аллергокомпоненты ImmunoCAP

Аллергокомпоненты деревьев

Аллергокомпоненты животных и птиц

Аллергокомпоненты плесени

Аллергокомпоненты трав

Пищевые аллергокомпоненты

Аллергология. ImmunoCAP. Комплексные исследования IgE (результат по каждому аллергену)

Аллергология. ImmunoCAP. Панели аллергенов IgE, скрининг (результат СУММАРНЫЙ)

Аллергология. ImmunoCAP. Фадиатоп

Аллергология. Immulite. Индивидуальные аллергены

Аллергены гельминтов, IgE

Аллергены грибов (кандида и плесневых), IgE

Аллергены деревьев, IgE

Аллергены животных и птиц, IgE

Аллергены клещей домашней пыли, IgE

Аллергены лекарств и химических веществ, IgE

Аллергены насекомых, IgE

Аллергены пыли, IgE

Аллергены ткани, IgE

Аллергены трав, IgE

Бактериальные аллегены (стафилококк), IgE

Пищевые аллергены, IgE

Пищевые аллергены, IgG

Аллергология. Immulite. Комплексы аллергенов, IgE (результат по каждому аллргену)

Аллергология. Immulite. Панели аллергенов, скрининг (результат СУММАРНЫЙ)

Аллергены деревьев, IgE (панель)

Аллергены животных и птиц, IgE (панель)

Аллергены трав, IgE (панель)

Ингаляционные аллергены, IgE (панель)

Пищевые аллергены, IgE (панель)

Аллергология. Immulite. Панели пищевых аллергенов IgG (результат СУММАРНЫЙ)

Аллергология. ImmunoCAP. Индивидуальные аллергены, IgE

Аллергены деревьев, IgE

Аллергены животных и птиц, IgE

Аллергены пыли, IgE

Аллергены трав, IgE

Пищевые аллергены, IgE

Аллергология. RIDA. Комплексы аллергенов, IgE

Аллергология. RIDA. Комплексы аллергенов, IgE (результат по каждому аллргену)

Аллергология. Местные анестетики, IgE

Биохимические исследования крови

Диагностика анемий

Липидный обмен

Обмен белков

Обмен пигментов

Обмен углеводов

Специфические белки

Ферменты

Электролиты и микроэлементы

Биохимические исследования мочи

Разовая порция мочи

Суточная порция мочи

Витамины, аминокислоты, жирные кислоты

Гематология

Гемостаз (коагулограмма)

Генетические исследования

HLA-типирование

Исследование генетических полиморфизмов методом пиросеквенирования

Исследование генетических полиморфизмов методом ПЦР

Молекулярно-генетический анализ мужского бесплодия

Гистологические исследования

Гистологические исследования лаборатории UNIM

Гормоны биологических жидкостей

Гормоны гипофиза и гипофизарно-адреналовой системы

Гормоны крови

Гормоны гипофиза и гипофизарно-адреналовой системы

Маркеры остеопороза

Пренатальная диагностика

Ренин-альдостероновая система

Тесты репродукции

Функция органов пищеварения

Функция щитовидной железы

Гормоны мочи

Диагностика методом ПЦР

COVID-19

Андрофлор, иследование биоценоза (муж)

Вирус герпеса VI типа

Вирус Варицелла-Зостер (ветряной оспы)

Вирус герпеса VI типа

Вирус простого герпеса I, II типа

Вирус Эпштейна-Барр

Вирусы группы герпеса

Возбудитель туберкулеза

ВПЧ (вирус папилломы человека)

Грибы рода кандида

Листерии

Парвовирус

Респираторные инфекции

Стрептококки (вкл. S.agalactie)

Токсоплазма

Урогенитальные инфекции, ИППП

Урогенитальные инфекции, комплексные исследования

Урогенитальные инфекции, условные патогены

Фемофлор, исследование биоценоза (жен)

Флороценоз, иследование биоценоза (жен)

Цитомегаловирус

Диагностика методом ПЦР, кал

Кишечные инфекции

Диагностика методом ПЦР, клещ

Клещевые инфекции

Диагностика методом ПЦР, кровь.

Вирус Варицелла-Зостер (ветряной оспы)

Вирус герпеса VI типа

Вирус простого герпеса I, II типа

Вирус Эпштейна-Барр

ВИЧ

Возбудитель туберкулеза

Гепатит D

Гепатит G

Гепатит А

Гепатит В

Гепатит С

Листерии

Парвовирус

Токсоплазма

Цитомегаловирус

Жидкостная цитология

Изосерология

Иммуногистохимические исследования

Иммунологические исследования

Иммунограмма (клеточный иммунитет)

Интерфероновый статус, базовое исследование

Интерфероновый статус, чувствительность к препаратам

Оценка гуморального иммунитета

Специальные иммунологические исследования

Исследование абортуса

Исследование мочевого камня

Исследование парапротеинов. Скрининг и иммунофиксация

Исследования слюны

Исследования слюны

Комплексные исследования

Лекарственный мониторинг

Маркеры аутоиммунных заболеваний

Антифосфолипидный синдром (АФС)

Аутоиммунные заболевания легких и сердца

Аутоиммунные неврологические заболевания

Аутоиммунные поражения ЖКТ и целиакия

Аутоиммунные поражения печени

Аутоиммунные поражения почек и васкулиты

Аутоиммунные эндокринопатии и бесплодие

Диагностика артритов

Пузырные дерматозы

Системные ревматические заболевания

Эли-тесты

Микробиологические исследования (посевы)

Посев крови на стерильность

Посев на гемофильную палочку

Посев на грибы (Candida)

Посев на грибы (возбудители микозов кожи и ногтей)

Посев на дифтерию

Посев на микоплазмы и уреаплазмы

Посев на пиогенный стрептококк

Посев на стафилококк

Посевы кала

Посевы мочи

Посевы на микрофлору (конъюнктива)

Посевы на микрофлору (отделяемое)

Посевы на микрофлору (урогенитальный тракт женщины)

Посевы на микрофлору (урогенитальный тракт мужчины)

Посевы на микрофлору ЛОР-органы)

Ускоренные посевы с расширенной антибиотикограммой

Неинвазивная диагностика болезней печени

Программы неинвазивной диагностики болезней печени

Неинвазивный пренатальный ДНК-тест (НИПТ)

Неинвазивный пренатальный тест (пол/резус плода)

Общеклинические исследования

Исследование назального секрета

Исследование секрета простаты

Исследования кала

Исследования мочи

Исследования эякулята

Микроскопическое исследование биологических жидкостей

Микроскопия на наличие патогенных грибов и паразитов

Микроскопия отделяемого урогенитального тракта

Онкогематология

Иммунофенотипирование при лимфопролиферативных заболеваниях

Миелограмма

Молекулярная диагностика миелопролиферативных заболеваний

Цитохимические исследования клеток крови и костного мозга

Онкогенетика

Онкомаркеры

Пищевая непереносимость, IgG4

Полногеномные исследования и панели наследственных заболеваний

Пренатальный скрининг

Серологические маркеры инфекций

Аденовирус

Бруцеллез

Вирус HTLV

Вирус Варицелла-Зостер (ветряной оспы)

Вирус герпеса VI типа

Вирус Коксаки

Вирус кори

Вирус краснухи

Вирус эпидемического паротита

Вирус Эпштейна-Барр

Вирусы простого герпеса I и II типа

ВИЧ

Гепатит D

Гепатит А

Гепатит В

Гепатит Е

Гепатит С

Грибковые инфекции

Дифтерия

Кишечные инфекции

Клещевые инфекции

Коклюш и паракоклюш

Коронавирус

Менингококк

Паразитарные инвазии

Парвовирус

Респираторные инфекции

Сифилис

Столбняк

Токсоплазма

Туберкулез

Урогенитальные инфекции

Хеликобактер

Цитомегаловирус

Специализированные лабораторные исследования.

Дыхательный тест

Микробиоценоз по Осипову

Тяжелые металлы и микроэлементы

Тяжелые металлы и микроэлементы в волосах

Тяжелые металлы и микроэлементы в крови

Тяжелые металлы и микроэлементы в моче

Услуги

Выезд на дом

ЭКГ

Установление родства

Химико-токсикологические исследования

Хромосомный микроматричный анализ

Цитогенетические исследования

Цитологические исследования

Чекап

Гистологическое исследование биопсийного материала

шагов к обработке тканей для гистопатологии: Leica Biosystems

1. Получение свежего образца

Образцы свежих тканей будут поступать из разных источников. Следует отметить, что они очень легко могут быть повреждены при удалении от пациента или подопытного животного. Важно, чтобы с ними обращались осторожно и как можно скорее после вскрытия правильно зафиксировали. В идеале фиксация должна производиться на месте удаления, например в операционной, или, если это невозможно, сразу после транспортировки в лабораторию.

2. Фиксация

Образец помещают в жидкое фиксирующее средство (фиксатор), такое как раствор формальдегида (формалин). Он будет медленно проникать в ткань, вызывая химические и физические изменения, которые укрепляют и сохраняют ткань, а также защищают ее от последующих этапов обработки. ² Существует ограниченное количество реагентов, которые можно использовать для фиксации, поскольку они должны обладать особыми свойствами, которые делают их пригодными для этой цели.Например, компоненты ткани должны сохранять некоторую химическую активность, чтобы впоследствии можно было применить определенные методы окрашивания. ³ Формалин, обычно в виде раствора с фосфатным буфером, является наиболее популярным фиксатором для сохранения тканей, которые будут обрабатываться для изготовления парафиновых срезов. В идеале образцы должны оставаться в фиксаторе достаточно долго, чтобы фиксатор проник во все части ткани, а затем в течение дополнительного периода, чтобы позволить химическим реакциям фиксации достичь равновесия (время фиксации).Обычно это означает, что образец должен фиксироваться в течение от 6 до 24 часов. Большинство лабораторий используют ступень для фиксации в качестве первой станции в своем процессоре.

После фиксации может потребоваться дальнейшее рассечение образцов для выбора подходящих участков для исследования. Образцы, которые должны быть обработаны, будут помещены в кассеты с соответствующей маркировкой (небольшие перфорированные корзины), чтобы отделить их от других образцов. Продолжительность графика обработки, используемого для обработки образцов, будет зависеть от типа и размеров самых больших и самых маленьких образцов, конкретного используемого процессора, выбранных растворителей, температуры растворителя и других факторов.Следующий пример основан на шестичасовом графике, подходящем для использования на быстром процессоре ткани Leica Peloris ™.

3. Обезвоживание

Поскольку расплавленный парафин является гидрофобным (не смешивается с водой), большую часть воды из образца необходимо удалить, прежде чем он может быть пропитан воском. Этот процесс обычно выполняется путем погружения образцов в серию растворов этанола (спирта) с возрастающей концентрацией до получения чистого безводного спирта.Этанол смешивается с водой во всех пропорциях, поэтому вода в образце постепенно заменяется спиртом. Серия увеличивающихся концентраций используется, чтобы избежать чрезмерного искажения ткани.

Типичная последовательность дегидратации образцов толщиной не более 4 мм:

1. 70% этанол 15 мин
2. 90% этанол 15 мин
3. 100% этанол 15 мин
4. 100% этанол 15 мин
5. 100% этанол 30 мин.
6. 100% этанол 45 мин.

На этом этапе все, кроме крошечного остатка прочно связанной (молекулярной) воды, должны были быть удалены из образца.

4. Клиринг

К сожалению, хотя ткань теперь практически не содержит воды, мы все еще не можем пропитать ее воском, потому что воск и этанол в значительной степени не смешиваются. Следовательно, мы должны использовать промежуточный растворитель, который полностью смешивается как с этанолом, так и с парафином. Этот растворитель вытеснит этанол в ткани, а затем он, в свою очередь, будет вытеснен расплавленным парафином. Этот этап процесса называется «очисткой», а используемый реагент — «очищающим агентом».Термин «клиринг» был выбран потому, что многие (но не все) очищающие агенты придают оптическую прозрачность или прозрачность ткани из-за их относительно высокого показателя преломления. Другая важная роль очищающего агента заключается в удалении значительного количества жира из ткани, который в противном случае представляет собой барьер для инфильтрации воска.

Популярным очищающим агентом является ксилол, и для полного вытеснения этанола требуется несколько изменений.

Типичная последовательность очистки образцов толщиной не более 4 мм:

1. ксилол 20 мин
2. ксилол 20 мин
3. ксилол 45 мин

5.Восковая инфильтрация

Теперь ткань может быть инфильтрована подходящим гистологическим воском. Хотя многие различные реагенты были оценены и использовались для этой цели на протяжении многих лет, гистологические воски на основе парафина являются наиболее популярными. Типичный воск является жидким при 60 ° C и может проникать в ткань при этой температуре, а затем ему дают остыть до 20 ° C, где он затвердевает до консистенции, позволяющей равномерно разрезать срезы. Эти воски представляют собой смеси очищенного парафина и различных добавок, которые могут включать смолы, такие как стирол или полиэтилен.Следует принимать во внимание, что эти восковые композиции обладают очень особыми физическими свойствами, которые позволяют тканям, пропитанным воском, быть разрезанными по толщине до, по крайней мере, 2 мкм, с образованием лент, когда разрезы разрезаются на микротоме, и для сохранения достаточной эластичности. полностью расплющить во время флотации на теплой водяной бане.

Типичная последовательность инфильтрации для образцов толщиной не более 4 мм будет следующей:

1. воск 30 мин
2. воск 30 мин
3. воск 45 мин

6.Встраивание или блокировка

Теперь, когда образец полностью пропитан воском, из него нужно сформировать «блок», который можно закрепить в микротоме для разрезания срезов. Этот этап выполняется с использованием «центра заливки», где форма заполняется расплавленным воском и в нее помещается образец. Образец очень тщательно ориентируют в форме, потому что его размещение будет определять «плоскость сечения», что является важным фактором как в диагностической, так и в исследовательской гистологии.Кассета помещается на форму сверху, доливается воском, и все это помещается на холодную тарелку для застывания. Когда это будет завершено, блок с прикрепленной к нему кассетой можно вынуть из формы, и он будет готов к микротомии. Следует отметить, что при правильной обработке тканей восковые блоки, содержащие образцы тканей, очень стабильны и представляют собой важный источник архивного материала.

Подготовка слайдов для гистологии: 5 простых шагов

Если вы занимаетесь биологическими исследованиями, скорее всего, на каком-то этапе вы отправили образцы тканей в гистологическую лабораторию.Каким-то образом они волшебным образом создали для вас прекрасные слайды, каждая из которых содержит тонкие срезы ваших образцов, готовые для микроскопической оценки.

Вы когда-нибудь задумывались, как техник-гистолог готовит этот гистологический препарат? Читайте о пяти важных этапах изготовления гистологических препаратов.

Пять этапов подготовки гистологических слайдов

1. Тканевая фиксация

Подготовка слайдов начинается с фиксации образца ткани. Это важный этап подготовки ткани, и его цель — предотвратить автолиз и гниение тканей.Для достижения наилучших результатов образцы ваших биологических тканей следует сразу же после сбора поместить в фиксатор.

Хотя существует много типов фиксаторов, большинство образцов фиксируют в 10% нейтральном забуференном формалине. Оптимальное соотношение объема формалина к образцу должно быть не менее 10: 1 (например, 10 мл формалина на 1 см ³ ткани). Это позволит большинству тканей адекватно зафиксироваться в течение 24-48 часов. Емкости с формалином должны быть закрытыми, герметичными и правильно маркированными.

2. Перенос образцов в кассеты

После фиксации образцы обрезаются с помощью скальпеля, чтобы они могли поместиться в кассету для тканей с соответствующей маркировкой. Образцы не должны быть настолько большими, чтобы заполнять кассету — их обрезают так, чтобы не касаться краев. Кроме того, они не должны быть слишком толстыми (в идеале они должны быть менее 4 мм), в противном случае они рискуют получить «вафли» при закрытии крышки кассеты. Заполненные кассеты для тканей затем хранят в формалине до начала обработки.

3. Обработка тканей

Обработка тканей на тонкие микроскопические срезы обычно производится с помощью парафинового блока, как показано ниже:

1. Обезвоживание , при котором образец погружается в спирт с возрастающей концентрацией для удаления воды и формалина из ткани.
2. Очистка , в которой органический растворитель, такой как ксилол, используется для удаления спирта и пропитывания парафином.
3. Заливка , где образцы пропитаны заливочным агентом — обычно парафином.Ткань окружается большим блоком расплавленного парафина, образуя то, что теперь называется «блоком». Когда блок затвердевает, он обеспечивает опорную матрицу, позволяющую разрезать очень тонкие срезы.

4. Разделение на разделы

Теперь образец ткани готов к разрезанию на части, которые можно поместить на предметное стекло.

1. Воск удаляется с поверхности блока, чтобы обнажить ткань.
2. Блоки охлаждаются на охлаждаемой тарелке или лотке для льда в течение 10 минут перед разделением.
3. Микротом используется для срезания очень тонких срезов ткани с блока в виде ленты.

Микротом можно предварительно настроить на резку различной толщины, но большинство тканей разрезаются примерно на 5 мкм. Вы можете узнать о других способах разрезания тканей здесь.

После разрезания тканевые ленты осторожно переносят в теплую водяную баню. Здесь им позволяют плавать на поверхности, а затем их можно зачерпнуть на горку, помещенную под уровень воды.Заряженные слайды лучше всего подходят для этого процесса — они улучшают адгезию ткани к стеклу и помогают снизить вероятность смывания срезов с слайда во время окрашивания.

Предметные стекла

должны быть четко промаркированы, а затем дать им высохнуть в вертикальном положении при 37 ^o C в течение нескольких часов, чтобы аккуратно расплавить излишки парафинового воска, оставив срез ткани нетронутым.

5. Окрашивание

Большинство клеток прозрачны и в неокрашенном виде кажутся почти бесцветными. Поэтому гистохимические пятна (обычно гематоксилин и эозин) используются для обеспечения контраста срезов ткани, делая структуры ткани более заметными и более простыми для оценки.После окрашивания поверх образца ткани на предметном стекле устанавливают покровное стекло с использованием клея оптического качества, чтобы защитить образец.

Препарат для гистологического слайда в упаковке

Итак, как видите, подготовка слайдов для гистологии — это несложно — это довольно замысловатое произведение искусства! Хотя вы, возможно, захотите узнать, как это сделать, чтобы сократить расходы в лаборатории, я бы посоветовал вам дважды подумать над этим и вместо этого отправить образцы в гистологическую лабораторию для этой цели, особенно если оценка ткани является важной частью. вашего исследования.Вы сэкономите много времени и стресса, оставив эту работу опытному технику-гистологу, и ваши слайды будет намного легче оценивать.

Хотя гистология отлично подходит для визуализации целых тканей с низким разрешением, она ограничивает, если вы хотите исследовать субклеточные структуры, например, при изучении изменений в опухолях головного мозга. В этом случае требуется более подробный и мощный метод, такой как электронная микроскопия рака мозга.

Если гистология имеет достаточное разрешение для ваших нужд, вы предпочитаете делать свои собственные слайды или отправлять ткани в гистологическую лабораторию для обработки? Оставьте комментарий ниже.

Дополнительная литература

Если вы нашли эту статью полезной, возможно, вы захотите ознакомиться с некоторыми из наших статей по теме ниже:

Первоначально опубликовано 4 апреля 2012 г. Проверено и обновлено 19 ноября 2020 г.

Вам это помогло? Тогда поделитесь, пожалуйста, со своей сетью.

Что такое гистология: Руководство по гистологии

Изготовление гистологических срезов для светового микроскопа.

Методы

Для световой микроскопии можно использовать три метода: парафин
техника , замороженные секции и полутонкие
разделы .

Парафиновая техника является наиболее часто используемой. Как только разделы
подготовлены, они обычно окрашиваются, чтобы помочь различить компоненты
ткани. Неокрашенный, трудно разобрать много деталей, потому что
оптическая плотность различных компонентов ткани очень похожа.

Срезы для электронного микроскопа подготавливаются аналогично
к тому для полутонких секций.

Что такое парафиновая техника?

В этой технике ткани фиксируются и заливаются воском.
Это делает ткань твердой, и из нее намного легче вырезать срезы. В
Затем срезы окрашивают и исследуют с помощью светового микроскопа.

1. Установка:

Квадратные тканевые блоки (около 1 см в каждом измерении) или целые органы,
фиксируются химической фиксацией:

Добавленное химическое вещество связывает и перекрестно связывает некоторые белки и денатурирует
другие белки путем обезвоживания.Это укрепляет ткани и инактивирует
ферменты, которые в противном случае могли бы разрушить ткань. Фиксация также убивает бактерии
и т. д. Он также может усилить окрашивание тканей.

Чаще всего используется фиксатор — 4% -ный водный раствор формальдегида,
при нейтральном pH.

2. Обезвоживание и очистка:

Чтобы разрезать срезы, ткань должна быть залита парафином, но не воском.
не растворяется в воде или спирте.Однако он растворим в парафине.
растворитель под названием «ксилол». Следовательно, вода в тканях должна быть
заменен на ксилол. Для этого сначала необходимо обезвожить ткань,
путем постепенной замены воды в образце спиртом. Это достигается
пропуская ткань через этиловый спирт с возрастающей концентрацией
(от 0 до 100%). Наконец, как только вода будет заменена 100% спиртом,
спирт заменяется ксилолом, который смешивается со спиртом.Этот
заключительный шаг называется «клиринг».

3. Вложение:

Салфетку помещают в теплый парафин, и расплавленный воск заполняет
пространства, в которых раньше была вода. После остывания ткань затвердевает,
и может использоваться для нарезки ломтиками (секциями).

4. Разделение:

Ткань обрезается и устанавливается на режущее устройство, называемое микротомом.
(показано на картинке). Вырезаются тонкие участки, которые можно окрасить и
установлен на предметном стекле микроскопа.

5. Окрашивание и монтаж:

К сожалению, большинство окрашивающих растворов являются водными, поэтому для окрашивания срезов необходимо
воск необходимо растворить и заменить водой (регидратация). Это
по существу шаг 2 в обратном порядке. Срезы пропускают через ксилол,
затем уменьшение крепости спирта (со 100% до 0%) и, наконец, воды.
После окрашивания срез снова обезвоживают и помещают в
ксилол.Затем его устанавливают на предметное стекло микроскопа в монтажной среде.
растворяется в ксилоле. Сверху помещается покровное стекло для защиты образца.
Испарение ксилола по краям покровного стекла сушит оправу.
средний и прочно приклеивает покровные стекла к предметному стеклу.

Есть ли другие способы изготовления секций для света?
микроскоп?

Иногда используются еще два способа:

Замороженные секции:

Ткани быстро замораживают в жидком азоте, а затем разрезают в холодильнике.
шкаф (криостат) с холодным ножом, затем окрашивали и наблюдали в
микроскоп.Эта процедура выполняется быстрее и позволяет сохранить некоторые детали тканей.
это может быть потеряно парафиновой техникой. Сечения 5-10 мкм
толстый.

Полуфабрикаты:

Иногда трудно рассмотреть детали в толстых сечениях. Чтобы обойти это,
секции могут быть залиты эпоксидной или акриловой смолой, что позволяет
разрезы (менее 2 мкм), которые нужно разрезать.

Что нужно знать о гистопатологии

Существует множество отраслей, которые входят в обширную область науки.Одним из таких быстрорастущих спектров является гистопатология . Этот раздел связан с изучением тканей. Есть много исследовательских организаций, лабораторий и компаний, которые занимаются наблюдениями и исследованиями в этой области.

Чтобы создать собственную гистопатологическую лабораторию, необходимо знать ряд вещей. Им необходимо иметь свои факты, поскольку это огромная и столь же сложная научная область. Услуги гистопатологии, которыми пользуются компании, в частности, включают изучение изображений гистопатологии, чтобы узнать причину заболевания и, соответственно, предоставить результаты.Чтобы объяснить это дальше, мы рассмотрим наиболее важные вещи, о которых компании должны знать, прежде чем приступить к изучению гистопатологии.

Что такое гистопатология?

Гистопатология — это процесс исследования тканей, чтобы узнать больше о заболевании и его первопричине. Ткани исследуют под микроскопом в гистопатологической лаборатории. Процесс предполагает проведение биопсии. Перед началом исследования ткань подготавливается, после чего обрабатывается и анализируется.Услуги гистопатологии предоставляются с учетом типа исследуемой ткани, а также типа проводимого исследования.

Почему важна гистопатология?

Эта область исследований чрезвычайно важна, поскольку позволяет гистопатологам понимать и обнаруживать заболевания. Гистопатология позволяет специалистам искать изменения в клетках, которые объясняют истинную причину болезни пациента. Патологи могут поставить диагноз, исследуя небольшой кусочек ткани различных органов.Гистопатология имеет жизненно важное значение, поскольку она расширяет и совершенствует варианты лечения.

Услуги, связанные с гистопатологией

Гистопатологическая лаборатория предлагает ряд услуг, которые включают исследование тканей и, в конечном итоге, обнаружение заболеваний. Полный спектр услуг, предлагаемых лабораториями, включает такие методы, как вскрытие, сложную гистологическую обработку, а также экспертную оценку патологами. Этим гистопатологическим услугам помогают узнать причину и предоставить соответствующие результаты.Другие предлагаемые дополнительные услуги:

• Специализированная гистохимическая окраска определенных клеточных компонентов
• Обработка пластика для изготовления тонких срезов в поддержку репродуктивной патологии и невропатологии
• Пластиковая заливка для микротомии твердых тканей и устройств и периферических нервов
• Обработка замороженных тканей и срезы

Роль Гистопатологи

Гистопатолог — это профессионал, работающий в области гистопатологии.Основная задача этих профессионалов — изучить гистопатологические изображения, полученные в результате обследования. Их роль также включает в себя написание отчетов по образцам, ознакомление с литературой, и многие из них также несут ответственность за преподавание и исследования. Они также посещают междисциплинарные встречи, чтобы обсудить свои выводы и исследования с другими врачами. Гистопатологи также работают напрямую с пациентами при проведении различных процедур. Их работа включает исследование клеток в мазках, аспиратах или биологических жидкостях.

Принимая во внимание все упомянутые моменты, компаниям необходимо понимать предысторию, процессы и факты о гистопатологии, прежде чем углубляться в эту область науки.

Обзор литературы и тематическое исследование

4.1 Исторические гистологические методы окрашивания в медицине и биологических исследованиях

История окрашивания показывает, что применение гистологических методов является относительно новой областью диагностики заболеваний (Rodrigues et al., 2009). Исторические методы окрашивания ранними патологами и хирургами были заимствованы у семнадцати ученых Левенгука, которые сыграли важную роль в гистологии, используя такие вещества, как марена, индиго и шафран для окрашивания тканей и используя рудиментарные микроскопы для их изучения (Titford, 2009). Эти категории ранних исследователей использовали микроанатомию для установления взаимосвязи между различиями в клетках, а также для определения нормальной структуры растительных клеток и животных (Bancroft & Layton, 2013).

Позже были разработаны новые методы для детального изучения клеточной структуры с использованием различных лабораторных химикатов для сохранения тканей в их естественной форме перед окрашиванием (Titford & Bowman, 2012). Джозеф фон Герлах считался пионером микроскопического окрашивания в 1858 году, когда он успешно применил аммиачный кармин для окрашивания клеток мозжечка (Costa, Brito, Gomes, & Caliari, 2010).

Первые гистологи использовали легко доступные химические вещества для подготовки тканей к микроскопическим исследованиям; Этими лабораторными химическими веществами для твердых клеточных тканей были дихромат калия, спирт и хлорид ртути (Iyiola & Avwioro, 2011).Эти фиксаторы и окрашивающие агенты были оригинальными, и через некоторое время были разработаны цветные окрашивающие агенты, которые все еще применимы в современных лабораторных методах окрашивания (Black, 2012). Примеры этих оригинальных цветных пятен, которые все еще используются, включают трихром, который используется при биопсии печени и почек, а также нитрат серебра, который используется в других организмах (Musumeci, 2014).

Большое развитие в области гистологических красителей произошло благодаря усовершенствованному технологическому развитию микроскопов и созданию в 1856 г. в Германии гистологических красителей (анилиновый краситель), которые производят множество новых гистологических красителей (Shostak, 2013).В то же время расширились исследования и знания, касающиеся анатомии и тканей человеческого тела, и эти знания были использованы для дальнейших исследований новых гистологических методов изучения пораженных тканей (Titford, 2009).

После девятнадцатого века многие медицинские центры нанимали врачей, патологов и хирургов для решения хирургических проблем (Titford & Bowman, 2012). Именно эта группа патологов разработала методы интраоперационного окрашивания замороженных срезов тканей, применив специальный метод окрашивания в гистопатологии.Именно в это время была разработана техника окрашивания парафиновой инфильтрацией (Шостак, 2013). Благодаря этому достижению были изучены доброкачественные и злокачественные опухоли, и бактерия была идентифицирована как возбудитель болезни в девятнадцатом веке (Godwin, 2011).

Метод окрашивания по Граму был назван в честь датского изобретателя Ганса Христиана Грама, который изобрел его как метод дифференциации видов бактерий в 1875 году (Anderson, 2011). Именно во время работы в городском морге со своими коллегами Грэм разработал технику окрашивания с целью определения типа бактериальной инфекции, а также как способ сделать видимыми бактерии на выбранных и окрашенных тканях легких во время исследования (Black, 2012 ).Хотя этот метод был признан непригодным для некоторых бактериальных организмов, он все еще используется сегодня и вполне конкурирует с современными молекулярными методами гистологии (Shostak, 2013).

4.2 Важные гистологические пятна, использованные в прошлом и настоящем

Кармин

Это широко используемое пятно в гистологии, используемое ранними ботаниками, такими как Джон Хилл, в их исследованиях в 1770-х годах (Jackson & Blythe, 2013). Краситель использовался для изучения микроскопических тканевых структур в форме раствора аммиака и до сих пор используется в гистологических исследованиях.В частности, краситель широко использовал Рудольф Вирхов (1821–1902) в микроскопических исследованиях; Вирхова считают «отцом патологии» (Musumeci, 2014).

Гематин и гематоксилин

Это вещества природного происхождения, которые использовались в истории гистопатологии (Titford, 2009). Пятно было разработано Вильгельмом фон Вальдейером в 1863 году и было получено из бревна, найденного в Центральной Америке. Гематоксилин является слабым красителем и используется с комбинацией других растворов в окисленной форме (Шостак, 2013).

В частности, краситель сочетается с протравой-окислителем для повышения его способности дифференцировать компоненты клетки; эти растворы называются гематоксилином. Универсальность красителя способствовала развитию различных методов гематоксилина (Titford & Bowman, 2012). Исторически гематоксилин превращался в ядерное пятно, которое имело более короткое время окрашивания и было устойчивым к кислым растворам; это сделало его пригодным для методов гистологического окрашивания, требующих нескольких этапов (Anderson, 2011).

Нитрат серебра

Нитрат серебра давно используется в исторических методах окрашивания и до сих пор используется в современной патологии. Первоначально ранние исследователи использовали нитрат серебра, чтобы улучшить видимость структуры ткани при ее изучении; это было сделано путем нанесения твердого нитрата серебра на ткань и последующего ее изучения (Titford & Bowman, 2012). Окрашивающее вещество было разработано для многих соединений, и при использовании нитрата серебра необходимы подтверждающие тесты (Shostak, 2013).Окрашивание нитратом серебра также снижается за счет аргентафиновых клеток, обнаруженных в эпителиальной выстилке легких, кишечника, меланина и других (Musumeci, 2014).

Однако были разработаны методы, позволяющие «адаптировать» эти ткани, чтобы избежать аргирофильных реакций при использовании нитрата серебра в процессе окрашивания (Titford, 2009). В частности, такие методы, как ретикулиновые методы Гомори и метод Грокотта-Гомори, были разработаны для оценки отсутствующих тканей и заболеваний в печени и прямой кишке (Nadworny, Wang, Tredget, & Robert, 2010).

Другие недавно разработанные процедуры окрашивания

Процедуры гематоксилина и эозина

Хотя исторически использовались, в окрашивании гематоксилином произошли большие лабораторные изменения; сегодня почти все образцы тканей обрабатываются гематоксилином и эозином (Bancroft & Layton, 2013). Кроме того, были разработаны различные методы гематоксилина, но все они следуют одному и тому же подходу к окрашиванию образцов ткани в гематоксилине, спирте и водопроводной или щелочной воде для удаления агентов аргентафина.Было обнаружено, что большинство гистопатологических процессов можно изучить с помощью процедур гематоксилина и эозина (Titford & Bowman, 2012). В той же строке метод быстр в исполнении, дешев и может быть изменен. Однако гематоксилин и эозин неэффективны, поскольку не все свойства вещества могут быть получены, и необходимо использовать специальные красители (Musumeci, 2014).

Романовские пятна — пятна Гимзы

Они были разработаны в 1891 году Дмитрием Романовским и популярны благодаря своей многоцветной окраске для выявления паразитов крови.Процедура Giemsa Stains используется до сих пор. Окрашивание значительно улучшилось, и его различные методы позволяют применять его при биопсиях залитых парафином, фиксированных формалином и костного мозга (Musumeci, 2014).

Окрашивание по Граму

Метод окрашивания по Граму был назван в честь датского изобретателя Ганса Христиана Грама, который изобрел его как метод дифференциации видов бактерий в 1875 году (Musumeci, 2014). Грам разработал технику окрашивания с целью различения типа бактериальной инфекции, а также как способ сделать бактерии видимыми на выбранных и окрашенных тканях легких во время исследования (Shostak, 2013).Хотя этот метод был признан непригодным для некоторых бактериальных организмов, он все еще используется сегодня и вполне конкурирует с современными молекулярными методами гистологии (Rudijanto, 2007). Однако применение метода Грама в вопросах микробиологии окружающей среды безошибочно ограничено (Titford, 2009). Помимо этого, методы Грама оказались успешными при выполнении биопсии инфицированных частей и быстро дали результаты, особенно при значительных различиях в прогнозе и лечении.Этот метод часто используется в современной гистологии, особенно в парафиновых фиксаторах для срезов тканей (Titford & Bowman, 2012). В недавнем случае в Кувейте метод окрашивания по Граму оказался особенно эффективным при диагностике гонореи, дав 99,4% эффективных результатов (Iyiola & Avwioro, 2011). Этот метод все еще используется сегодня, особенно с парафиновыми срезами, и был модифицирован для соответствия различным веществам.

Трихромные пятна

Историческая оценка использования различных красителей в гистологии показывает, что большинство патологов привлекали окрашивания, которые давали многоцветные результаты на образцах тканей.Таким образом, из-за этой потребности возникли трихромные пятна (Шостак, 2013). Существуют различные множественные пятна, такие как синий-эозин, «трикислотное пятно» по Эрлиху (1888) и трихромное окрашивание Массона, популярное в современной гистологии. Окрашивание трихромом показывает, насколько сложными стали методы окрашивания в поисках эффективного и последовательного окрашивания, которое показало бы тонкие дифференцированные ткани (Musumeci, 2014).

4.3 Обзоры тематических исследований

Практические примеры 1

Это исследование было проведено с целью сравнения различных методов окрашивания и оценки их эффективности.Конкретная цель состояла в том, чтобы оценить, могут ли недавно разработанные методы окрашивания, методы окрашивания HpSS серебром Helicobacter pylori и модифицированные методы МакМаллена в идентификации организма H. pylori. Метод включал отбор тканевых срезов биоптатов желудка 63 пациентов с диагнозом диспепсия. Ткани срезов окрашивали четырьмя методами окрашивания. Во всех 63 случаях 30 секций дали положительный результат на Helicobacter pylori, в то время как 30 срезов дали отрицательный результат на все случаи инфекции pylori, а остальные были протестированы с использованием комбинации пяти гистологических тестов (Anderson, 2011).Результаты показали, что метод окрашивания между наблюдателями был лучшим для антител при 98%, за ним следовал метод Giemsa при 87%, затем HpSS при 85%. На уровне золотого стандарта было обнаружено, что метод окраски по Гимзе является лучшим, после которого следует метод Макмаллена (Rotimi, Cairns, Gray, Moayyedi, & Dixon, 2000). Выводы исследования состояли в том, что во всех случаях окрашивания была выявлена ​​инфекция H pylori ; однако модифицированная окраска Гимзы оказалась наиболее эффективной благодаря своей чувствительности, простоте использования, воспроизводимости и экономической эффективности.

Пример 2

Цель заключалась в том, чтобы исследовать разницу в емкости между различными красителями: гематоксилином и эозином, красителем толуидиновым синим, иммуноокрашиванием нейрон-специфической энолазой (NSE) и белком S 100. Эти красители применялись для оценки присутствия нейронов и тучных клеток в острых отростках. Образцы были собраны из клинически острых отростков, классифицированных как гистологически положительные и отрицательные. В ходе исследования все 50 срезов образцов аппендикса были подвергнуты гематоксилину и эозину, окрашиванию толуидиновым синим, иммуноокрашиванию нейрон-специфической енолазой (NSE) и белку S 100.Гематоксилин и эозин применяли в качестве рутинных красителей для общего исследования тканей, а краситель толуидиновым синим применяли для облегчения исследования тучных клеток. Кроме того, в качестве маркера использовали иммуноокрашивание нейрон-специфической енолазы (NSE), а также белок S 100.

Результаты показали, что при сравнении окрашивания гематоксилином и эозином с S 100 они? показали 100% точность идентификации денатурированных клеток слизистой оболочки. Однако сочетание этих различных методов окрашивания привело к дополнительному методу, более эффективному, чем традиционный метод окрашивания, для наблюдения изменений и структуры пораженных клеток, а также морфологической формы нервных волокон в воспаленных отростках (Russell & Gordon, 2009).Кроме того, использование нескольких методов окрашивания помогло подтвердить результаты более ранней диагностики окрашивания.

Гистологические методы

Для исследования тканей под микроскопом их необходимо сохранить (зафиксировать) и разрезать на срезы, достаточно тонкие, чтобы они были прозрачными. Кратко процесс фиксации описан в следующем разделе. По сути, это химический или физический метод уничтожения ткани с сохранением характерных особенностей формы и структуры.После фиксации блоки ткани необходимо разрезать на тонкие срезы. Один из способов — сделать прочный блок, заморозив свежую или фиксированную ткань. Другие методы включают обезвоживание в спирте и инфильтрацию парафином или другим подобным агентом — процесс, называемый заливкой. Срезы толщиной от 3 до 10 микрон (от 3 до 10 тысячных миллиметра) вырезаются стальными ножами, установленными в приборе, называемом микротомом, который имеет точную механическую подачу.

Для электронной микроскопии срезы значительно меньше одной десятитысячной миллиметра (0.1 микрон, мкм) толщиной. Это достигается путем заливки ткани в пластик, такой как Epon или аралдит (эпоксидные смолы), и резки на специальных ультрамикротомах, оснащенных тонкой механической или термической обработкой. Срезы нарезаются стеклянными или алмазными ножами и устанавливаются на сетку из медной сетки.

В некоторых случаях требуются серийные секции. Для этого метода несколько последовательных разделов готовятся в виде слайдов. Использование серийных срезов позволяет визуализировать трехмерную структуру ткани.Это особенно важно при определении того, является ли аномалия артефактом подготовки или патологическим процессом.

При работе со световым микроскопом трудно распознать различные компоненты клеток и тканей без дифференциального окрашивания. Пятна могут вступать в химическую или физическую реакцию, и возможны самые разные варианты. Метод окрашивания может быть изменен в соответствии с потребностями исследователя, чтобы выделить определенные ткани или органеллы.

Наконец, чтобы сохранить срез, сделанный из блока закрепленных тканей и окрашенный, его устанавливают на предметное стекло и покрывают тонким покровным стеклом с помощью прозрачного вещества, которое затвердевает и запечатывает препарат для получения он постоянный.Некоторые ткани окрашиваются, а затем устанавливаются. Чаще всего сначала на предметное стекло помещают ткань, а затем окрашивают. Монтажная среда, используемая для прикрепления покровного стекла, должна иметь показатель преломления, аналогичный показателям предметного стекла и покровного стекла, чтобы предотвратить искажение.

1. Фиксация
2. Вложение
3. Окрашивание
4. Методы окрашивания, использованные в этой лабораторной коллекции

Гистология — судмедэксперт округа Кайахога

Вы здесь:

Главная> Отделения> Гистология

Отделение гистологии Медицинской экспертизы округа Кайахога готовит окрашенные слайды образцов тканей, взятых у умерших во время вскрытия.Ежегодно готовится от 20 000 до 25 000 слайдов.

Гистология — это исследование тканей. Ткани — это группа клеток, которые выполняют определенную функцию. Клетки — это мельчайшая единица жизни и строительные блоки всего живого. Нормальные клетки имеют определенный характер и упорядоченно воспроизводятся. Структурные и функциональные изменения в клетках, тканях и органах могут привести к заболеванию или заболеванию, которое может вызвать мутации клеток или аномальный рост клеток (опухоли).

В обязанности гистотехнологов входит подготовка и окрашивание срезов тканей, которые патолог собирает во время вскрытия для микроскопического исследования.Эта область исследований — диагностический инструмент для патологов, помогающий определить причину смерти. Иногда причину смерти определяют только при микроскопическом исследовании тканей вскрытия. Следовательно, гистология играет решающую роль в диагностике пораженной ткани. Другие отрасли, использующие гистологию, — это здравоохранение и исследовательские лаборатории.

Патология — это исследование болезни. При применении судебной медицины ответственность судебного патологоанатома заключается в определении причины смерти умерших внезапно и неожиданно естественным путем или с применением насилия.В большинстве случаев причина смерти определяется путем осмотра и обследования внешнего тела и внутренних органов.