Zero 99 бусы: 101 отзыв на Янтарные бусы ZerO-99 для снижения симптомов прорезывания зубов от покупателей OZON
Детские янтарные бусы ZerO-99™
Детские янтарные бусы ZerO-99™ – эффективное решение при прорезывании зубов. Новинка от компании «Бейби-Трейд».
В семье, где есть маленький ребенок (от 3-4 месяцев до 2-х лет) обязательно оценят эту полезную вещь. Одним из эффективных принципов использования полезных свойств янтаря является его ношение в виде бус, т.е. как можно ближе к шее (важен контакт с кожей).
При первых симптомах, связанных с прорезыванием зубов родители склонны применять лечебные средства для успокоения, снятия воспаления и облегчения состояния. Одним из самых старинных, натуральных и доступных средств (используемых в Европе десятилетиями) являются янтарные бусы, которые одевают младенцам на шею для облегчения боли. Эффект от использования бус ZerO-99™, изготовленных из натурального балтийского янтаря, заключается в успокаивающем воздействии на нервную систему ребенка и избавлении от беспокойства и раздражения во время прорезывания зубов.
Читайте также: Как помочь ребёнку при прорезывании зубов
Янтарь — природный анальгетик, его обезболивающие и противовоспалительные свойства делают его идеальным естественным гомеопатическим продуктом для младенцев, детей, а также взрослых. При ношении на теле, янтарная кислота впитывается через кожу ребенка, помогая безболезненно и спокойно перенести прорезывание зубов и сопутствующие симптомы.
Преимущество использования янтарных бус ZerO-99™ — облегчение неприятных симптомов у малыша без помощи лекарственных средств и гелей, долговечность изделия (могут носить несколько детей). Серия товаров ZERO-99™ призвана улучшить качество жизни детей и их родителей!
Полезную и эффективную новинку можно приобрести в детских магазинах Олант, Вотоня, Ласточка, а также на сайте дистрибьютора Baby-trade.orgс доставкой в любой город России.
Поделитесь с друзьям
Также смотрят
Популярные обзоры
Ср-во защиты от тли, белокрылки, трипсов Танрек ,1,5мл. (ампула)
Интерьер и отделка
Напольные покрытия
Плитка керамическая и сопутствующие товары
Камень декоративный и сопутствующие товары
Лакокрасочные материалы
Пены, клеи, герметики
Панели для отделки стен
Двери
Фурнитура и скобяные изделия
Окна и комплектующие
Карнизы, шторы, жалюзи
Обои
Потолочные системы
Декоративные элементы
Предметы декора и сувениры
Текстиль
Посуда
Организация хранения на кухне
Благоустройство
Садовая техника
Садовый инструмент
Моющая техника
Снегоуборочная техника и инвентарь
Тачки и комплектующие
Емкости, полив
Обустройство сада
Тротуарная плитка
Садовая мебель
Заборы и ограждения
Уход за растениями
Семена и растения
Бытовая химия и косметика
Товары для уборки
Уход за одеждой и обувью
Системы хранения
Канцтовары
Товары для животных
Стройматериалы
Изоляционные материалы
Строительные смеси
Кровля и водосточные системы
Устройство стен и потолка
Древесно-плитные материалы
Пиломатериалы
Металлопрокат
Общестроительные материалы
Стеновые и фасадные материалы
Инструмент
Электроинструмент
Ручной инструмент
Расходные материалы к инструменту
Газовое и сварочное оборудование
Спецодежда и средства защиты
Хозтовары, расходные материалы
Пневмоинструмент
Высотные конструкции
Измерительные инструменты
Станки и оборудование
Силовая и строительная техника
Бензоинструмент
Мебель
Мебель столовая
Мебель для кухни
Мебель для прихожих
Мебель офисная
Мебель для ванной
Электрика
Электромонтажное оборудование
Освещение
Удлинители и сетевые разъемы
Фонари и элементы питания
Кабели и провода
Системы прокладки кабеля
Электрощитовое оборудование
Электромонтаж
Телекоммуникация
Системы наблюдения и оповещения
Инструмент и материалы для пайки
Инженерные системы
Отопление
Водоснабжение
Насосное оборудование
Системы фильтрации воды
Вентиляция
Печное оборудование
Канализация
Газоснабжение
Дренажные системы
Бытовая техника
Крупногабаритная бытовая техника
Встраиваемая техника
Мелкая техника для кухни
Климатическая техника
Мелкая техника для дома
Прокат
Прокат Генераторов
Прокат Грузоподъемного оборудования
Прокат Измерительного инструмента
Прокат Компрессоров
Прокат Мотопомп и погружных насосов
Прокат Нагревателей воздуха
Прокат Оборудования для работы на высоте
Прокат Оборудования для стройплощадки
Прокат Опалубки
Прокат Освещения
Прокат Расходных материалов
Прокат Резьбонарезного оборудования
Прокат Садовой техники
Прокат Сварочного оборудования
Прокат Строительного оборудования
Прокат Строительной техники
Прокат Уборочного оборудования
Прокат Электроинструмента
Как выбрать сапфир и распознать подделку
Автор АлмазныйЛучик На чтение 5 мин Опубликовано
Обновлено
Драгоценный камень сапфир, относящийся к одному из многочисленных видов корунда, высоко ценится ювелирными мастерами. Он совсем немного уступает алмазу по красоте и прочности, а многие другие драгоценные камни заслуженно превосходит.
Ограненный минерал обладает потрясающим свойством преломлять свет, при этом блеск, исходящий от изделия, завораживает взгляд. Популярность сапфира можно еще объяснить долговечностью, твердая поверхность выдерживает значительные механические нагрузки.
Началом исторического пути сапфира стала Древняя Индия, затем торговцы привезли россыпь камней в Египет. Местные жрецы по достоинству оценили минерал и использовали его в нагрудных украшениях, сама Клеопатра предпочитала этот вид драгоценных камней. В царские времена сапфир украшал головные уборы практически всех королей: от индийского махараджи до российского Ивана Грозного. При распространении христианства минерал вставляли в перстни епископов, считалось, что он помогает очистить тело и душу и обратить свои мысли к Богу.
Цветовая палитра натурального сапфира
Сложилось ошибочное мнение, что натуральный камень имеет синий цвет. Несомненно, сапфир этого оттенка самый ценный, но в чистом виде встречается в природе крайне редко. Цветовая палитра этого вида корунда зависит от химического состава, входящие в него примеси и определяют окончательный его вид.
- Желтый сапфир. Уникальность этого камня заключается в способности изменять свой оттенок. От термического воздействия сапфир становится светло-желтым, золотистым и даже оранжевым. А если минерал обрабатывается бериллием, то желтый цвет удивляет насыщенностью и яркостью.
- Зеленый сапфир. Структура камня создает обманчивое восприятие его окраса. Осматривая камень при помощи микроскопа зеленных оттенков не увидеть. Такой эффект получается из-за чередующихся полосок синего и желтого цвета.
- Бесцветный сапфир. Достаточно редкий прозрачный камень без малейших вкраплений. Мошенники часто представляют его как бриллиант, но отсутствие характерного блеска и мерцания говорит само за себя.
- Синий сапфир. Камни могут быть как небесно-голубые, так и насыщенного синего цвета. Чаще всего в химический состав входит рутил, делающий поверхность камня матовой. При тепловой обработке этот изъян не так заметен, минерал становится ярким и блестящим.
- Пурпурный сапфир. Только хороший специалист в ювелирном деле может уверенно сказать о принадлежности минерала к этому виду корунда. Дело в том, что пурпурный сапфир по внешнему виду и химическому составу практически не отличается от рубина.
- Розовый сапфир. Корунды этого цвета встречаются очень редко, вес их часто не превышает 1 карата. Ювелиры предпочитают не использовать такие мелкие камни в украшениях. По этой причине драгоценные изделия с крупными розовыми сапфирами не могут стоить дешево.
- Черный сапфир. Самый магический камень с непроницаемой поверхностью и перламутровыми переливами. Кольца с черным камнем часто используют ясновидящие и колдуны, пытаясь создать загадочный образ.
Места добычи минерала
Самая значительная доля добычи сапфиров приходится на месторождения в Австралии. Но большая часть добываемых в этой стране минералов не обладает качеством и ценностью. К дорогостоящим относятся камни, добытые в индийских штатах Кашмир и Джамму. Они отличаются превосходным васильковым оттенком, способным украсить любое ювелирное изделие. Высокая цена индийского сапфира обуславливается небольшими объемами добычи. Ведь месторождения камня находятся высоко в горах, а сбор происходит вручную.
Камни среднего качества встречаются в Таиланде, но месторождения за последнее столетие иссякли. На рынке драгоценных камней вместо тайских сапфиров представляются камбоджийские того же качества. Месторождения камней разнообразных цветов разбросаны по всему миру, но только в Танзании можно встретить экземпляры, способные изменять окрас. Добытые в России камни не представляют особой ценности из-за отсутствия характерной прозрачности и блеска.
К содержанию
Искусственный сапфир
На ювелирном рынке все чаще встречаются синтетические сапфиры, мало отличающиеся по химическому составу от настоящих камней. В их производстве используют специальный прибор, в который помещается дешевая крошка корунда, железо, титан и хром. Вся эта конструкция помещается в печь, при высокой температуре и давлении образуются кристаллы сапфира. Для образования цветных камней в первоначальный состав добавляется окись никеля, ванадия, кобальта или магния. Равномерное окрашивание происходит благодаря диффузному методу и специальному обжигу камней.
Способы определения натурального сапфира
Человеку, далекому от ювелирного искусства, очень трудно отличить натуральный камень от дешевой подделки. Но если знать основные черты сапфира и использовать все возможные способы определения подлинности, то можно распознать фальсификат.
- Наличие вкраплений. При выборе украшения с сапфиром важно хорошее освещение. Только при ярком солнечном свете можно рассмотреть характерные вкрапления, которые будут отсутствовать в синтетическом сапфире. Но новые технологии позволяют даже такие уникальные свойства камня подделывать.
- Механическое воздействие. Следует острым предметом провести по поверхности камня. Повреждений натуральный камень не получит в отличие от подделки.
- Изменение освещенности. Необходимо взглянуть на камень при дневном свете, а затем поднести к электрической лампе. У искусственного сапфира цвет изменится на несколько тонов. Природный минерал останется с такой же окраской.
- Осмотр лупой. Некоторые умельцы частично подделывают украшения с сапфиром. Подлинный камень в этом случае находится на виду, а синтетический – под ним. Место соединения можно увидеть при помощи лупы. Называется такая технология, когда склеивается 2 камня разного качества – «дуплет».
- Специальное устройство. Значение преломления света у натурального сапфира равно 1,762 – 1,778 единицы. Это можно проверить удобным прибором – рефрактометром. Если показатель отличается даже на 0,01 единицы в любую сторону, то перед покупателем дешевая подделка.
Все остальные способы доступны только профессиональным ювелирам и требуют дополнительных знаний и умений.
свойства, значение и кому подходит по знаку зодиака
Ювелирным камнем хромдиопсид начали считать в конце XX века, раньше относились только как породообразующему минералу. Зелёный цвет роднит его с изумрудом, обыватели называют его якутским или сибирским изумрудом, что с точки зрения минералогии неправильно. Сразу скажем, что хромдиопсид от изумруда отличается большей хрупкостью и наличием в каждом, даже маленьком камешке мельчайших дефектов.
Если бы не эти обстоятельства, зелёный сибирский минерал мог стать лидером среди зелёных самоцветов. Как известно, зелёный – самый популярный цвет в ювелирном деле. Кстати, хромдиопсид превосходит изумруд по способности отражать свет – он выглядит ярче.
Описание камня
Оттенков у натурального хромдиопсида немало. Преобладает зелёный цвет, причём находят камни как относительно светлого тона, так и настолько насыщенного, что скорее речь пойдёт о чёрном цвете. Мало того, в природе хромдиопсид встречается также желтоватого, фиолетового, красно-коричневого и как уже сказано, чёрного оттенка в сочетании с зелёным. Цвет придают камню примеси (например, зелёным он обязан хрому), без них минерал бесцветен.
Камень хромдиопсид
Как любые самоцветы, хромдиопсид ценится за насыщенность и яркость цвета. Под солнечными лучами сияет всеми своими гранями. Не зря носит название, часть которого с греческого переводится как «двойной облик». Обладает плеохроизмом – меняет оттенок цвета под разным углом зрения, грани при этом как бы раздваиваются. Блеск стеклянный. Под влиянием ультрафиолета становится самосветящимся – флюоресцентным.
Лучшие кристаллы хромдиопсида считаются ювелирным сырьём 3–4 класса, а мелкая полупрозрачная каменная масса идёт на поделки.
Хоть хромдиопсид – камень, но мягкий, легко расщепляющийся, хрупкий: твёрдость по шкале Мооса не превышает 6 баллов. По этой причине его трудно обрабатывать, трескается.
Таблица 1. Свойства Минерала.
Химическая формула | CaMg(Si2O6) или Ca(Mg,Cr,Al)[(Si,AL)2O6] |
Цвет | фиолетовый, желтый, голубой, коричневый, серый, красный цвета, может быть также бесцветным |
Блеск | стеклянный |
Прозрачность | прозрачный |
Твердость | 5 5,5 6 |
Удельный вес | 3,27-3,37 |
Дополнительно | Разновидность диопсида содержащая хром |
Таблица 2. Качество обработки.
Группа массы кар. (коэфф. кабошона) | Цвет | Группа качества, цена в $/1ct | ||||
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | ||
0,00-0,24 (0,6) | Темно-зеленый Ярко-зеленый насыщенный Зеленый Светло-зеленый | 35 90 60 40 | 20 60 40 25 | 10 30 20 13 | 6 15 10 7 | 2 5 4 3 |
0,25-0,49 (0,55) | Темно-зеленый Ярко-зеленый насыщенный Зеленый Светло-зеленый | 30 80 55 35 | 15 55 32 20 | 8 27 17 10 | 5 15 10 6 | 2 5 4 3 |
0,50-0,99 (0,5) | Темно-зеленый Ярко-зеленый насыщенный Зеленый Светло-зеленый | 35 90 60 40 | 20 60 40 25 | 10 30 20 13 | 6 16 10 7 | 2 6 4 3 |
1,00-1,49 (0,4) | Темно-зеленый Ярко-зеленый насыщенный Зеленый Светло-зеленый | 40 120 90 50 | 25 80 50 30 | 13 40 22 15 | 7 17 11 8 | 3 7 5 4 |
1,5-1,99 (0,4) | Темно-зеленый Ярко-зеленый насыщенный Зеленый Светло-зеленый | 50 130 95 53 | 30 85 53 32 | 15 43 25 17 | 8 20 12 9 | 4 8 6 5 |
2,00-3,99 (0,4) | Темно-зеленый Ярко-зеленый насыщенный Зеленый Светло-зеленый | 53 140 100 55 | 32 90 55 35 | 17 45 28 19 | 8 20 12 9 | 4 8 6 5 |
4,00-5,99 (0,4) | Темно-зеленый Ярко-зеленый насыщенный Зеленый Светло-зеленый | 55 145 105 60 | 35 95 60 40 | 19 50 30 20 | 6 18 10 8 | 4 7 5 5 |
6,00 и свыше (0,4) | Темно-зеленый Ярко-зеленый насыщенный Зеленый Светло-зеленый | 60 150 100 65 | 40 100 65 45 | 20 55 35 22 | 7 18 10 8 | 5 7 5 6 |
Месторождения
Добывают в Финляндии, Южно-Африканской Республике, Китае, Мьянме, Японии, ряде европейских стран, Австралии, Северной Америке. Однако запасы природного минерала везде ограничены и качество не дотягивает до ювелирной ценности. Самое богатое месторождение – в России, на реке Инагли в Якутии. Первооткрыватель месторождения – видный геолог А. Корчагин, доказавший ценность минерала для ювелирного дела.
Минерал хромдиопсид
Месторождение богатое, камни щедро рассыпаны вдоль берегов реки. Масса самоцветов различна, есть очень объёмные кристаллы, но они, как правило, дефектны. Чаще на рынок попадают камни весом до 2 каратов, такие проще обрабатывать, и качество их выше.
С конца 80-х годов хромдиопсид, получивший народное прозвище «якутский изумруд» (в некоторых источниках – сибирлит) официально добывается и продаётся как драгоценный камень. Добыча в России изначально шла активно, так что рынок оказался перенасыщен камнем, в том числе добытым нелегально. В связи с этим стоимость невысокая.
Получилось, что камень хромдиопсид – наиболее дешёвое ювелирное сырьё зелёного цвета. В последнее десятилетие XX века наведён порядок с использованием месторождения, и цена за грамм стабилизировалась.
Магические свойства
Хромдиопсиду присущи магические свойства. По мнению эзотериков он сильный оберег, защищает владельца от сглаза, порчи, других негативных воздействий. Считается, что забирает всё плохое, преобразует в позитив и возвращает хозяину, увеличивая энергетическую силу последнего. Магия камня помогает приобрести гармонию с окружающим миром и самим собой, делает характер мягче, вырабатывает добросердечность, а от негативных мыслей, эмоций и чёрт характера избавляет.
Кольцо с камнем
Если человек твёрдо решил изменить жизнь к лучшему, камень поможет найти правильное решение, выход из трудноразрешимой ситуации. Пассивных и равнодушных не любит и не помогает.
Хромдиопсиду приписывают способность увеличивать уровень благосостояния владельца. Появятся дополнительные источники дохода, наладится собственное дело, благополучно сложится карьера. Мечтающий об этом мужчина носить камень в перстне, женщина – в кольце.
Браслет с обработанным минералом, носимый на правой руке, поможет поймать миг удачи в любой сфере жизни.
Лечебные свойства камня
Выявлено положительное влияние хромдиопсида на нервную систему человека: нормализует эмоциональный фон, прогоняет депрессию, избавляет от бессонницы. Это объяснимо, ведь зелёный цвет успокаивает. Камень формирует ауру равновесия, спокойствия, внутренней гармонии.
Он сводит на нет конфликтные ситуации, настраивает владельца на примирение с несовершенством окружающих людей и мира в целом.
Ношение камня показано людям, имеющим патологии в области сердца и сосудов. Например, ему подвластны гипертония, стенокардия, аритмия. Головные боли, усталость глаз, простудные заболевания проходят, когда камень долго держишь при себе.
Хромдиопсиды
Специалисты по литотерапии (камнелечению) уверяют: если оправить камень в серебро и носить как кулон, он поможет в лечении болезней дыхательных путей. Если же будет обрамлен золотом, уйдут проблемы, связанные с желудочно-кишечным трактом.
Подкупает то, что минерал не имеет противопоказаний при использовании в лечебных целях. А ещё подготавливает больной организм к серьёзному лечению. Рекомендуют в этом случае поместить минерал на область сердца и лёгкими движениями перемещать к солнечному сплетению.
Кому хромдиопсид подходит по знаку зодиака
Астрология предупреждает: камень подходит не каждому знаку зодиака. Благоволит Тельцам, Весам, Рыбам. Причём означает для человека разное в зависимости от места в гороскопе. Как талисман его надо носить Тельцам – станут более уверенными в своих силах, ускорят продвижение по карьерной лестнице, повысят материальный достаток. Весы изменят жизнь к лучшему. Рыб он настроит на жизнерадостный лад, поможет проститься с меланхолическими настроениями.
Серебренная брошь
Овнам или Козерогам хромдиопсид лучше не приобретать – пользы не будет. Для них обладание камнем чревато угнетённым состоянием, нервозностью, неуравновешенностью. Это ухудшит отношения с окружающими.
Подойдёт представителям остальных знаков зодиака. Надевая украшения из хромдиопсида, они будут обрадованы радостными событиями в жизни.
Поскольку «сибирский изумруд» называют двуликим, использовать его энергетическую силу можно только в благих целях. В противном случае возможны непредвиденные последствия.
Знаки зодиака | Совместимость |
---|---|
Овен | – |
Телец | +++ |
Близнецы | + |
Рак | + |
Лев | + |
Дева | + |
Весы | +++ |
Скорпион | + |
Стрелец | + |
Козерог | – |
Водолей | + |
Рыбы | + |
(«+++» — подходит идеально, «+» — можно носить, «-» — категорически противопоказан
Использование ювелирами
Благодаря красивому блеску широко используется в ювелирном искусстве. По виду, как уже говорилось, очень напоминает изумруд. Между тем цена его значительно ниже, так что из хромдиопсида делают недорогие, но изысканные ювелирные украшения.
Огранивают в форме круга, овала и применяют изумрудную огранку, когда после особой обработки на кристаллах время от времени вспыхивают блики света. Камень при этом смотрится чрезвычайно выигрышно.
Больше ценятся минералы чистые, но идут в дело и мутноватые экземпляры, причём результат бывает не хуже. Однако последние чаще идут на поделки, а не на ювелирку.
Чернёное серебро в качестве отделки придаёт хромдиопсиду стильность и оригинальность. Серебряные украшения с камнем смотрятся дорого и элегантно, несмотря на дешевизну. Необычны серьги из самоцвета в золотой оправе. Оригинально смотрятся бусы из обработанных и необработанных камней. Красота хромдиопсида уникальна, и любое искусно сделанное украшение из него восхитит любителей самоцветов, ценителей прекрасного.
Сувенир из зеленого минерала
Как ухаживать за хрупким кристаллом
Уже упоминалось, что камень хрупок. В уходе надо придерживаться несложных правил, чтобы ювелирное изделие радовало как можно дольше. Хранить в отдельной шкатулке завёрнутым в мягкую ткань.
Ухаживать без применения абразивных и химических веществ, используя только тёплую воду и мягкую щёточку. Иногда можно сделать мыльный раствор. Вытирать бережно мягкой тканью. Беречь от механических повреждений.
В подвесках, кулонах, серьгах камень сохраняется лучше, чем в кольце, перстне, браслете.
Настоящий и искусственный хромдиопсид
«Якутский изумруд» не подделывают в чистом виде, но выращивают из берилла, используя гидротермальный метод. Аналог зачастую используется в ювелирном деле. Отличить подделку удастся, рассматривая камень под лупой. Оригинал имеет еле заметные дефекты, которых у аналога, как правило, нет.
«Партнёры» хромдиопсида
Совместимость с другими камнями хорошая. Ювелиры скажут, что камни одного цвета лучше всего сочетаются друг с другом. Утверждение справедливо и для нашего «героя». Мало того, все зелёные минералы и камни в состоянии объединится практическими со всеми другими, разве что рубин не подойдёт.
Общеизвестен секрет совместимости драгоценных камней: яркие экземпляры успешнее «женятся» с такими же насыщенными и заметными. Минералы приглушённых расцветок – с подобными пастельными.
Прекрасный «сибирский изумруд», вставленный в изящную оправу, — не только украшение, но и оберёг, островок веры, надежды, любви в бурном житейском море. Среди значений камня – дарящий отдохновение, обеспечивающий вокруг владельца ауру радости и здоровья. Купить изделие из хромдиопсида – верное решение.
, что они собой представляют и для чего используются
Жир, золотисто-коричневый янтарь, ярчайшая иранская бирюза и чистый черный коралл.
Субха или мисбаха, четки или четки беспокойства, или любое другое название, которое они называют на Ближнем Востоке, гордо висят в окнах ювелиров торгового центра Madinat Zayed, желанный всплеск цвета среди моря золота .
Используется некоторыми людьми во время молитвы и находится под влиянием ислама в их дизайне, для многих четки — это способ расслабиться, отключиться от мира.
Ищите сквозь толпу, и вы их увидите; высовывались из кармана или свободно оборачивались вокруг руки, их обладательница рассеянно двигала большим пальцем вперед и назад каждую бусинку.
Ищите, и иногда вы обнаружите, что они свисают с зеркала заднего вида автомобиля.
От сентиментальной ценности до помощи людям расслабиться, бусы для беспокойства — утешение для многих, — говорит 34-летний Джалал, эмигрант из Йемена, чей семейный бизнес в столице является домом для значительной коллекции.
«Людям они нравятся, потому что они помогают им сконцентрироваться. Другим они нравятся из-за их звука. Некоторые люди верят, что они помогают им достичь духовного состояния ума », — говорит Джалал.
Спрятанный в отдельных потрепанных красных и золотых мешочках, другие упакованы в пучки, магазин продает бусы из зеленого янтаря, черного коралла и граната, среди прочего, по ценам от нескольких сотен дирхамов до тысяч в зависимости от камня, возраста и количества бусы.
Субха, изготовленная из синего или желтого янтаря, обычно стоит самых высоких цен, а лучший янтарь, по словам Джалала, поступает из России и Германии.Для юсра (черного коралла) никогда не следует уезжать далеко из Йемена или Саудовской Аравии, а лучшие деревянные бусы привозят из Судана.
Другие материалы, используемые для субха, включают жемчуг, слоновую кость и лепестки роз.
Несмотря на их повседневное присутствие на Ближнем Востоке и во всем мире, существует множество теорий об их происхождении.
В исламе нить из 99 бусин представляет каждое имя Аллаха. В то время как субха, состоящая из 33 бусинок, относится к хадису, призывающему мусульман после того, как они помолились, повторить субханаллах (славен Бог) 33 раза, альхамдулиллах (вся хвала Богу) 33 раза и Аллаху Акбар (Бог велик) 33 раза. раз.
Само имя, мисбаха, означает хвала Богу.
Какой бы ни была предыстория, бусины для беспокойства позволяют Наджибу, «ювелиру от ювелира от ювелира», успокоиться.
«Вы передаете в эту вещь свои чувства, мысли. Это запрещает вам думать. Вы попробуете это один раз, и что бы вы ни беспокоились, вы не чувствуете беспокойства. В этом весь секрет. Вот почему у меня всегда были эти, — говорит он, залезая в карман куртки за ниткой бус.
Размахивая маленьким набором мутно-желтых бусин, хотя янтарь не идеален, он говорит, что он довольно близок.
«Янтарь — королева мисбаха. Это королева. Кто знает об этих [бусинах для беспокойства], тот знает, что лучшее качество — это янтарь », — говорит Наджиб, который большую часть своих рабочих дней проводит в ювелирном магазине в Мадинат-Заеде.
Но, несмотря на свою красоту, им не хватает по сравнению с ручными.
«Раньше они делались вручную», — печально говорит он. «Сейчас нет ничего ручной работы. Больше ничего не делается вручную ».
А для тех, кто хочет продолжать практику, времена изменились.«Они будут голодать. Теперь игра совершенно другая ».
Старое, соглашается Джалал, всегда лучше. «Это было подлинно, на 100 процентов. Это не было сфабриковано или вылеплено. Сегодня сложно найти настоящие бусы. Вы должны быть очень опытными, чтобы отличить подделку от подлинной ».
Настоящий янтарь, если растереть его между большим и указательным пальцами, будет издавать запах сосновой смолы. В Madinat Zayed некоторые продавцы предоставляют сертификаты подлинности на янтарные бусы. Наджиб, которому при жизни принадлежало бесчисленное количество наборов бус, считает их «превосходно успокаивающими».
«Вы даете пальцам повод двигаться. Вы можете представить, как я делаю это без чего-либо? » — говорит он, роняя бусы на стол и, улыбаясь, шевелит рукой в воздухе.
«Я бы выглядел сумасшедшим».
Другие используемые драгоценные камни включают агат, далматинский камень и, если у вас есть средства, алмазы.
«Самый необычный из алмазов или самый простой из камней — не имеет значения», — говорит Наджиб.
«Смотрите, за бусинками для беспокойства скрывается философия. Тот, кто владеет бусами для беспокойства, — это знак того, что я спокойный человек.
«Вид.»
Зайнеб Аль Хассани — редактор новостей в The National.
02-BKP01-20 | Бусины латунные — ЗОЛОТО — 25 шт. — 2,0 мм | 2,0 мм | 0,02 г | |||
02-BKP01-24 | Бусины латунные — ЗОЛОТО — 25 шт.- 2,4 мм | 2,4 мм | 0,04 г | |||
02-BKP01-27 | Бусины латунные — ЗОЛОТО — 25 шт. — 2,7 мм | 2,7 мм | 0,06 г | |||
02-BKP01-32 | Бусины латунные — ЗОЛОТО — 25 шт.- 3,2 мм | 3,2 мм | 0,10 г | |||
02-BKP01-38 | Бусины латунные — ЗОЛОТО — 25 шт. — 3,8 мм | 3,8 мм | 0,18 г | |||
02-BKP01-47 | Бусины латунные — ЗОЛОТО — 25 шт.- 4,7 мм | 4,7 мм | 0,34 г | |||
02-BKP01-55 | Бусины латунные — ЗОЛОТО — 25 шт. — 5,5 мм | 5,5 мм | 0,52 г | |||
02-BKP01-64 | Бусины латунные — ЗОЛОТО — 25 шт.- 6,4 мм | 6,4 мм | 0,95 г |
Бисер 10/0 18275
Упаковка (и): 20 г
В наличии
(17 упаковка)
| EROKAJL 10/0 18275
1,20 €
€ 0,99
искл.НДС
Упаковка (и): 250г
Распроданный
| ВОРОКАЙЛ 10/0 18275
€ 10,52
€ 8,69
искл.НДС
Подробное описание продукта
Описание продукта отсутствует
Станьте первым, кто разместит статью в этом элементе!
Струя эластичных стеклянных бусин, каждая массой 0.{\ rm {2}}} \ times 0,52 \; {\ rm {m}}} \\ [0,3 см]
& = 3,194 \; {\ rm {м / с}}
\ end {выровнять *}
{/ eq}
Изменение импульса:
{eq} \ Delta p = 2 мВ
{/ eq}
Выражение массы, помещенной на другую чашу весов, чтобы стрелка оставалась на нуле, выглядит следующим образом:
{экв} \ begin {align *}
Mg & = r \ times \ Delta p \ [0,3 см]
Mg & = r \ times \ left ({2mv} \ right) \\ [0,3 см]
M & = \ dfrac {{r \ times \ Delta p}} {g}
\ end {выровнять *}
{/ eq}
Где,
- Ускорение свободного падения {eq} g = 9.{\ rm {2}}}}} \\ [0,3 см]
& \ приблизительно 29,0 \; {\ rm {g}}
\ end {выровнять *}
{/ eq}
Таким образом, масса, помещаемая на другую чашу весов для удержания стрелки на нуле, равна {eq} \ boxed {29.0 \; {\ rm {g}}}
{/ экв}.
Бусины Rocailles bhmisch, wallnuss-braun, Silbereinzug, Inhalt 22 г ,, 0,99 €
Glasperlen von Preciosa Ornela — best bhmische Qualitt aus Tschechien
Артикул: A 123
0,99 €4,30 € за 100 г
inkl.19% США ,
Knapper Lagerbestand
Lieferzeit : 2 — 3 Werktage
In den Warenkorb
Vergleichsliste
Эпитахофорез — новый универсальный метод экстракции общих нуклеиновых кислот
Список химикатов, биологических образцов и наборов
Были использованы следующие химические вещества: моногидрат l-гистидина моногидрохлорида (99%), l-гистидин (99%), N -трис (гидроксиметил) метил-3-аминопропансульфоновая кислота (TAPS, 99.5%), трис (гидроксиметил) аминометан (TRIS, 99,8%), анионный краситель Brilliant Blue FCF (Sigma-Aldrich). Низкий электроэндосмос — многоцелевая агароза, пригодная для молекулярной биологии (Fisher). Лестницы ДНК и РНК (New England BioLabs). Смесь добавляемой РНК ERCC (Thermo Fisher Scientific). SYBR Gold (Invitrogen).
Биологические образцы: Блоки ткани FFPE при колоректальном раке были приобретены в Indivumed Germany (Гамбург, Германия), и локоны были вырезаны на месте с помощью микротома (Leica, RM2255). Клеточная линия карциномы легкого NCI-H975 была приобретена в ATCC (Манассас, США), каталожный номер CRL-5908 и номер лота: 70023980.
Список наборов, используемых для подготовки образцов и сравнения экстракции: Все следующие наборы были приобретены у Promega: ReliaPrep FFPE gDNA Miniprep System, ReliaPrep FFPE Total RNA Miniprep System, Wizard HMW DNA Extraction Kit, ReliaPrep miRNA Cell and Tissue Miniprep System, ReliaPrep System Система Tissue Miniprep, ReliaPrep gDNA Tissue Miniprep.
Список аналитических наборов, использованных в представленном исследовании: наборы для анализа Qubit (Thermo Fisher Scientific) —1x набор для анализа dsDNA HS, наборы для анализа RNA HS, набор для анализа микроРНК.Наборы биоанализаторов (Agilent) — набор для высокочувствительной ДНК и набор для высокочувствительной РНК. Наборы для нанесения покрытий (Agilent) — экранная лента с высокочувствительной ДНК, экранная лента с геномной ДНК, высокочувствительная экранная лента с РНК.
Список наборов, используемых для секвенирования библиотек: фильтры Amicon Ultra-0,5 мл (3 и 10 кДа) были приобретены у Sigma Millipore. Библиотеки секвенирования для экстракции ДНК FFPE были подготовлены с использованием рабочего процесса AVENIO Tumor Tissue Expanded kit Analysis (Roche Diagnostics, только для исследовательского использования. Не для использования в диагностических процедурах).Библиотеки miRNA получали с использованием препарата малых РНК NebNext для Illumina (набор 1, New England BioLabs). Библиотеки секвенирования для общей РНК получали с использованием набора KAPA RNA HyperPrep Kit с RiboErase (Roche Diagnostics, только для исследовательского использования. Не для использования в диагностических процедурах).
Устройство и оборудование ETP
Изготовление устройства ETP: Мы использовали программу 3D-моделирования Autocad (Autodesk) для проектирования платформы (рис. 1a). Конечное устройство ETP из полипропилена с внешними размерами 100 × 100 × 30 мм было изготовлено методом литья под давлением (Fathom Manufacturing, Окленд, США).Устройство ЭТП было снабжено электродами. Катод (внешний диаметр 90 мм, высота 5 мм) был изготовлен из нержавеющей стали (D&V Precision Sheet Metal, Индианаполис, США) и вставлен в верхнюю тарелку (внутренний диаметр 90 мм, глубина 20 мм). Анод нижней тарелки (высота 5 мм) был вырезан лазером из гибкого графитового листа MinGraph с клеем. Его осторожно приклеивали лентой по периметру нижней чашки (внутренний диаметр 100 мм, глубина 30 мм). Пластиковая чашка с полупроницаемой мембраной: установки для диализа Slide-A-Lyzer ™ MINI 2000 Da MWCO (Thermo Fisher Scientific) была вставлена в центральную лунку для сбора, снабженную 1.Уплотнительное кольцо 2 × 9 мм (McMaster). Для минимизации объема Slide-A-Lyzer разрезали пополам лезвием бритвы, создавая сборную чашу объемом менее 150 мкл. Изготовленная на заказ поликарбонатная форма для геля (внутренний диаметр 75 мм и внутренний барьер 5 мм для центрального отверстия, глубина 4 мм) была изготовлена на предприятии AJ Solution Machining (Фремонт, США). Гели закрывали пластиковой крышкой (наружный диаметр 75 мм, центральное отверстие с внутренним диаметром 5 мм), вырезанной лазером из гелевой связующей пленки (Lonza).
Оборудование: Сильноточный источник питания PowerPac ™ HC был приобретен у BioRad, а источник питания uEP300-12 — у Labsmith (Ливермор, США).Настольный pH-метр Orion Star A211 с калибровочным набором ROSS pH Buffer был получен от Thermo Scientific. Лазерный резак — Speedy 360 с источником питания CO 2 мощностью 120 Вт (Trotec). Флуорометр Qubit 4 (Thermo Fisher Scientific) использовали для количественного определения ДНК и РНК из экстрактов. Размер экстрагированной ДНК и РНК проверяли с помощью Bioanalyzer 2100 (Agilent), Tapestation 4200 (Agilent) и Pulse Pippin для электрофореза в импульсном поле (Sage Science). Экстракты обрабатывали на Roche 480 lightCycler (Roche), Illumina NextSeq 500 (Illumina), Veriti Dx (Thermofisher).
Условия разделения ETP
Электролиты и гель были приготовлены по следующей методике: раствор ведущего электролита (LE) — 100 мМ гистидин-HCl, pH 6,25 (10,49 г моногидрата моногидрохлорида l-гистидина 11 г l-гистидина в 500 мл воды ). Раствор скользящего электролита (TE) — 20 мМ TAPS-TRIS, pH 8,30 (0,605 г TAPS и 1,625 г TRIS в 500 мл воды). Гель агарозы — в 20 мМ LE (гистидин-HCl; pH 6,25). Все буферы были приготовлены в деионизированной воде, свободной от нуклеаз (Fisher).0,5% (или 0,7%) гель агарозы — 500 мг (или 700 мг) агарозы смешивали со 100 мл 20 мМ гистидин-HCl LE буфера в стеклянной колбе Эрленмейера и нагревали на горячей пластине до кипения при перемешивании. Смесь кипятили 1 мин. После охлаждения смеси примерно до 60 ° C раствор переносили в круглую гелевую форму. Гель следует приготовить как минимум за 1 час до экстракции, и его можно хранить при 4 ° C в течение ночи. 0,7% агарозный гель использовали для экспериментов FFPE, 0,5–0,7% агарозный гель использовали для экспериментов с клеточными линиями.
Настройка устройства:
Верхняя чашка: чашку для диализа вставляли в центральную лунку.
Нижняя чашка была заполнена 100 мл LE.
Верхняя тарелка была вставлена в нижнюю тарелку.
Центральный колодец был заполнен ЛЭ для предотвращения образования воздушных карманов.
Гель помещали на верхнюю чашку.
Гель закрывали крышкой.
Биологический образец смешивали с 8 мл ТЕ и бриллиантовым синим (10 мкл 0,1 мг / мл в воде).
Смесь образец / ТЕ вводилась в зазор между гелем и электродом.
Подавалась постоянная мощность 2 Вт в течение 40 мин.
Обнаружение и сбор экстракта: бриллиантовый синий использовали для косвенного отслеживания полосы нуклеиновой кислоты (дополнительный рисунок S1). Еще одним бесконтактным методом отслеживания движения ионов было отслеживание изменения напряжения. По достижении заданного идеального напряжения для каждого приложения (дополнительный рис.S2), ETP был остановлен, и экстракт был собран. Объем сбора обычно составлял от 150 до 180 мкл. Из-за ограничения объема, вводимого для последующих анализов, для уменьшения объема использовался блок фильтра Amicon.
Ткань FFPE (экстракция общих нуклеиновых кислот)
Предварительная обработка образца (депарафинизация, лизирование, обработка протеиназой K и устранение перекрестного связывания): с использованием системы Promega ReliaPrep FFPE gDNA Miniprep, локоны FFPE (локоны 2 × 10 мкм на экстракцию) депарафинизировали. лизировали и обрабатывали протеиназой К, как описано производителем.Затем лизаты подвергали деструкции при 80 ° C в течение 1 часа перед холодным шоком на льду в течение 2 минут и хранили при 4 ° C в течение ночи. Затем образцы размораживали при комнатной температуре в течение не менее 10 минут перед экстракцией через ETP. Этот тип экстракции имел две биологические копии для каждого блока FFPE (5 блоков CRC: всего 10 экстракций).
Контрольные экстракты, использованные для исследования FFPE: Система Promega ReliaPrep gDNA Miniprep была использована в соответствии с инструкциями производителя для извлечения ДНК из локонов FFPE (2 × 10 мкм локонов на экстракцию) с незначительной модификацией стадии обработки РНКазой.Этот тип экстракции имел две биологические копии для каждого блока FFPE (5 блоков CRC: всего 10 экстракций).
Измерение выхода нуклеиновых кислот: для точного измерения дцДНК и РНК без фонового вмешательства небольшие части каждого экстракта подвергались воздействию РНКазы А (Promega: A797C из набора гДНК FFPE) или ДНКазы I (биолаборатории Новой Англии: без РНКаз, M0303S) лечения. Часть, обработанную РНКазой, использовали для измерения истинного количества дцДНК (наборы Qubit dsDNA HS Assay Kits), а образцы, обработанные ДНКазой, использовали для измерения точного количества РНК (набор Qubit RNA HS Assay Kit).
Измерение качества ДНК FFPE: Качество ДНК оценивали с помощью набора для выделения и контроля качества опухолевой ДНК AVENIO (Roche Diagnostics). Качество каждого образца ДНК FFPE оценивали с помощью количественной ПЦР (кПЦР) с использованием 2 ампликонов ПЦР (66 п.о. и 191 п.н.). Нормализованный коэффициент качества (Q-ratio) рассчитывали с использованием стандарта ДНК QC PCR известного качества. Мы использовали 3 технических повтора значений Cp на ампликон для расчета оценки Q для каждого образца, включая стандарт ДНК QC PCR, используя следующее уравнение: оценка Q = 2 [среднее (Cp66) — среднее (Cp191)].Мы получили коэффициент Q для каждого образца с помощью следующего уравнения: коэффициент Q = оценка Q образца / стандарт QC ПЦР ДНК.
Подготовка и секвенирование библиотеки ДНК FFPE: библиотеки секвенирования для экстракции ДНК FFPE были подготовлены с использованием рабочего процесса AVENIO Tumor Tissue Expanded kit Analysis (Roche Diagnostics; только для исследовательских целей; не для использования в диагностических процедурах). Вход был рассчитан (100 / (Q-ratio) + 10) нг входной ДНК, где Q-ratio — нормализованная оценка качества из анализа qPCR.Библиотеки секвенировали с использованием Illumina NextSeq 500 High Output v3 (300 циклов, Illumina). Данные секвенирования были проанализированы с использованием внутреннего конвейера анализа, эквивалентного коммерчески доступному программному обеспечению для анализа онкологии AVENIO версии 2.0.0. Чтения были разбиты на 20 миллионов парных конечных чтений. Две реплики экстракции и две библиотеки на реплику (n = 4) из блока CRC FFPE для каждого метода экстракции.
Клеточная линия (miRNA)
Предварительная обработка образцов (лизирование клеток и обработка протеиназой K) для образцов ETP: 100 мкл лизирующего буфера и 10 мкл протеиназы K от Promega ReliaPrep FFPE Total RNA Miniprep System добыча.Смесь переваривали при 56 ° C в течение 15 минут. Затем лизаты подвергали холодному шоку на льду в течение 2 минут перед инкубацией в течение ночи при 4 ° C. Все образцы перед экстракцией размораживали при комнатной температуре в течение не менее 10 минут.
Экстракты после обработки (обработка ДНКазой + очистка колонки РНК): перед последующим анализом часть экстракта ДНК была расщеплена 20-минутной обработкой NEB ДНКазой I (без РНКазы) при 37 ° C. обработанный образец с использованием набора NEB Monarch RNA Clean-up (10 мкг) с 3X этанолом, используемым вместе со связывающим буфером, чтобы гарантировать удержание малой РНК в экстрактах (> 6 нт).Этот протокол был предложен производителем для сохранения малой РНК во время очистки. Это условие имело три реплики экстракции.
Контроль экстракции
miRNA: клетки Promega ReliaPrep miRNA и Tissue miniprep System использовали для предварительной обработки и экстракции общей РНК из выбранных клеточных линий в соответствии с рекомендациями производителя. Затем экстракты дополнительно концентрировали с помощью набора NEB Monarch RNA Clean-up (10 мкг) перед препаратами библиотеки малых РНК. Обратите внимание, что условия, используемые для очистки колонки РНК, были адаптированы для сохранения любой РНК размером более 6 нуклеотидов (в 3 раза больше для этанола).
Измерение выхода нуклеиновых кислот
: набор для анализа Qubit RNA HS (Thermo Fisher Scientific) использовался для измерения общей РНК от каждой экстракции, в то время как набор для анализа микроРНК Qubit (Thermo Fisher Scientific) использовался для оценки количества малой РНК (<1000 н. извлекается по образцу.
Измерение диапазона размеров
РНК после экстракций: размер РНК проверяли с помощью капиллярного гель-электрофореза Tapestation (High Sensitivity RNA ScreenTape for Tapestation 4200, Agilent) и гель-электрофореза на чипе Bioanalyzer 2100 (High Sensitivity RNA, Agilent).
клеточная линия miRNA. Анализ секвенирования и анализ данных. Суммарную РНК экстрагировали из (клеточной линии). 500 нг использовали в качестве исходного материала для препарата малой РНК NebNext для Illumina (набор 1, New England BioLabs). Подготовка библиотеки производилась согласно производственной инструкции. Экстракт РНК нормализовали на 500 нг перед созданием библиотек малых РНК. В качестве метода выбора размера использовались бусины Ampure XP. Было выполнено два раунда очистки борта. Очищенные библиотеки объединяли и затем секвенировали на приборе NextSeq 500 с использованием набора Illumina NextSeq High Output v3 (300 циклов) 2×75 (Illumina).
Мы использовали общедоступный конвейер nextflow для обработки данных секвенирования miRNA. https://github.com/nf-core/smrnaseq. Необработанные данные секвенирования и нормализованные значения CPM (количества на миллион) для каждого из образцов доступны по адресу: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/. Входные данные диаграммы Венна: только транскрипты miRNA с изобилием (больше или равным предварительно определенному порогу обнаружения) во всех репликах ETP или во всех репликах столбца считаются извлеченными соответствующим методом.График разброса: было нанесено среднее значение обнаруженной miRNA по 6 репликам. Нулевые подсчеты были присвоены miRNA, которые не обнаруживались во всех повторностях, даже если они были обнаружены в некоторых библиотеках (выпадающие из рис. 2b). Все miRNA, относящиеся к раку легких, включены 15 .
Клеточная линия (экстракция общих нуклеиновых кислот)
Предварительная обработка образца (лизирование клеток и обработка протеиназой K) для ETP: 100 мкл лизисного буфера и 10 мкл протеиназы K от Promega ReliaPrep Набор FFPE Total RNA Miniprep System использовался для предварительной обработки ~ 557000 клеток на экстракцию.Обработка проводилась при 56 ° C в течение 15 мин. Затем лизаты подвергали холодному шоку на льду в течение 2 минут перед инкубированием в течение ночи при 4 ° C. После инкубации в течение ночи образцы сначала инкубировали при комнатной температуре в течение по крайней мере 10 минут перед следующими этапами. ERCC добавляли к клеточному лизату — 1 мкл разведения 1: 100 ERCC RNA Spike-In Mix (Thermo Fisher Scientific). Лизаты фрагментировали на более мелкие кусочки (500 п.н.) с использованием сфокусированного ультразвукового датчика Covaris E220 (Covaris, Woburn, США). Для стадии фрагментации 130 мкл раствора лизата помещали в микропробирки covaris и использовали следующую программу обработки ультразвуком: рабочий цикл 10%, интенсивность 3, циклов на пакет 200, время 80 с.
Контрольные условия: Контроль очистки колонки ДНК — система очистки геномной ДНК Promega Wizard SV была использована в соответствии с протоколом, предложенным производителем, для извлечения гДНК из ~ 557000 клеток за одну экстракцию. ERCC добавляли в клеточный лизат перед экстракцией нуклеиновых кислот на колонках. Это условие имело две технические повторы.
Контроль очистки колонки
РНК: система Miniprep для РНК-клеток Promega ReliaPrep была использована в соответствии с протоколом, предложенным производителем, для извлечения РНК из ~ 557000 клеток за одну экстракцию.ERCC добавляли в клеточный лизат перед экстракцией нуклеиновых кислот на колонках. Это условие имело три технических повтора.
Измерение выхода нуклеиновых кислот
: Набор для анализа Qubit RNA HS и набор для анализа Qubit dsDNA HS использовали для измерения общей РНК и дцДНК соответственно из каждой экстракции, которые использовали для расчета входных данных для каждого препарата библиотеки секвенирования.
Измерение профиля размера ДНК и РНК. Размер выделенной из профиля ДНК и РНК определяли с использованием Tapestation 4200 (Agilent) с помощью анализа Genomic DNA ScreenTape и High Sensitivity RNA ScreenTape (Agilent) соответственно.Что касается РНК, образцы сначала обрабатывали ДНКазой I (New England Biolabs: RNase-free, M0303S) и подвергали очистке колонки РНК перед анализом профиля размера и препаратами библиотеки секвенирования РНК, чтобы избежать любого фонового сигнала от ДНК.
Подготовка библиотеки РНК линии клеток и секвенирование. Библиотеки секвенирования для экстракции РНК получали с использованием набора KAPA RNA HyperPrep Kit с RiboErase (Roche Diagnostics). Библиотеки секвенировали с использованием Illumina NextSeq 500 High Output v3 (300 циклов, Illumina).Данные секвенирования были проанализированы с использованием внутреннего конвейера анализа, эквивалентного коммерческому программному обеспечению AVENIO Oncology Analysis Software (версия 2.0.0). Чтения были разбиты на 20 миллионов парных конечных чтений.
Анализ секвенирования РНК клеточной линии: мы использовали HISAT2 для выравнивания считываний секвенирования с геномом, а затем использовали Kallisto для количественной оценки количества транскриптов РНК. Численность генов рассчитывалась путем суммирования численности соответствующих транскриптов для гена.
Подготовка и секвенирование библиотеки ДНК клеточной линии. Библиотеки секвенирования для выделения ДНК клеточной линии получали с использованием рабочего процесса AVENIO Tumor Tissue Expanded T Analysis (Roche Diagnostics).Вход в подготовку библиотеки с 100 нг. Библиотеки секвенировали с использованием Illumina NextSeq 500 High Output v3 (300 циклов, Illumina). Данные секвенирования были проанализированы с использованием внутреннего конвейера анализа, эквивалентного коммерческому программному обеспечению AVENIO Oncology Analysis Software (версия 2.0.0). Чтения были разбиты на 20 миллионов парных конечных чтений. Две реплики экстракции и две библиотеки на реплику (n = 4) из блока CRC FFPE для каждого метода экстракции.
Клеточная линия (длинная экстракция ДНК)
Предварительная обработка образца (лизирование клеток и обработка протеиназой К): были использованы буфер для лизиса экстракции ДНК Promega wizard HMW и протеиназа К, как описано при производстве, для лизиса ~ 2
клеток на экстракцию.Наконечники пипеток с широким отверстием использовались для уменьшения срезания ДНК. Это условие имело три реплики экстракции. После лизирования и обработки протеиназой К лизат загружали на ETP и экстрагировали длинную ДНК.
Гелевые условия ETP были такими же, как описано в разделе «Условия разделения ETP» выше.
Состояние и установка ETP без геля. Использовалась миниатюрная версия устройства EPT. Верхняя тарелка из поликарбоната (внутренний диаметр 25 мм, глубина 15 мм) была изготовлена методом литья под давлением (Protolab, США).6-луночный планшет служил нижней чашкой (17,0 мл Multiwell Cell Culture Plates, VWR). Анод (высота 3 мм) был вырезан лазером из гибкого графитового листа MinGraph с клеем. Он был аккуратно приклеен лентой по периметру внешней верхней тарелки. Кольцо из нержавеющей стали (OD 25 мм, высота 2 мм, Smalley, США) служило верхним катодным электродом. Разделительную полупроницаемую мембрану (10 × 30 мм) вырезали из мембранного фильтра Durapore 0,45 мкм (Millipore, Sigma). Затем разделительную мембрану осторожно свернули и прикрепили к вставке с помощью двусторонней клейкой ленты (0.Акриловый клей толщиной 1 мм, McMaster). Вставки были обработаны на станке с ЧПУ из поликарбоната (6 × 8 × 5 мм, высота xODxID). Вставка, снабженная разделительной мембраной и уплотнительным кольцом 1,9 × 5,7 мм, была вставлена в центральное отверстие верхней тарелки (внутренний диаметр 9 мм). Мембрана для диализа (ацетатцеллюлоза, MWCO 10 кДа) была прикреплена с помощью двухстороннего акрилового клея (M3) на дне верхней чашки со вставкой.
Условия разделения ETP: Разделение — 8,3 мл 100 мМ LE в нижней чашке и 200 мкл 100 мМ LE внутри центральной лунки.Образец: 0,9 мл 20 мМ буфера ТЕ, бриллиантовый синий (10 мкл 0,1 мг / мл в воде) и 320 мкл лизата. Постоянная мощность 0,5 Вт подавалась в течение 15 мин.
Контрольные условия / коммерческий набор для экстракции длинной ДНК: Набор для экстракции ДНК Wizard HMW использовали для экстракции длинной ДНК из выбранной клеточной линии (~ 2
клеток на экстракцию) с тремя репликами экстракции для этого условия. При соблюдении протокола, предложенного производителем, обработка РНКазой не проводилась. Наконечники пипеток с широким отверстием (Rainin) использовались для уменьшения сдвига ДНК.
Анализ гелевого импульсного поля: Гель-электрофорез в импульсном поле проводили с использованием прибора Pulse Pippin (Sage Science). Мы использовали 0,75% гель агарозы (SeaKem GOLD, Lonza) в буфере 0,5X KBB. Лямбда-PFG Ladder использовали в качестве стандарта (New England Biolabs). Блок питания был настроен на протокол 5–430 Кбит / с (75 В, 16 ч). После электрофореза гель окрашивали в течение 30 мин в растворе для безопасного окрашивания геля SYBR в 0,5-кратном растворе (Invitrogen). Изображения геля были получены с использованием УФ-света (Protein Simple).
Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie
Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.
Настройка вашего браузера для приема файлов cookie
Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:
- В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
- Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались.
Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie. - Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
- Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г.,
браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере. - Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie.
Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.
Почему этому сайту требуются файлы cookie?
Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie
потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.Что сохраняется в файле cookie?
Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.
Как правило, в файлах cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт
не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к
остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать..